血清丙氨酸与谷氨酰胺水平对胰腺癌患者术后预后效果预测的列线图模型建立与验证

目的分析丙氨酸、谷氨酰胺水平及其他胰腺癌患者术后预后的影响因素,并建立基于丙氨酸、谷氨酰胺的胰腺癌术后预后效果的列线图预测模型。方法回顾性分析2016年1月至2023年1月在天津市中西医结合医院(天津市南开医院)接受胰腺癌手术治疗的220例患者的临床资料,选取其中2016年1月至2021年1月收治的147例患者作为训练集,2021年2月至2023年1月收治的73例患者作为测试集。使用logistic回归模型归纳影响胰腺癌患者术后预后的相关因素,建立可视化的列线图预测模型,并用测试集验证模型预测效能。结果训练集147例胰腺癌术后患者中,18例患者存活(生存率为12.24%)。多因素logistic回归模型分析显示,术前血清丙氨酸和谷氨酰胺水平、TNM分期、分化程度和淋巴结阳性率(LNR)是胰腺癌术后预后的独立影响因素(P<0.05)。根据logistic回归分析结果建立的列线图预测模型的受试者操作特征(ROC)曲线下面积为0.97(95%CI 0.95~1.00);测试集验证结果显示,ROC曲线下面积为0.97(95%CI 0.93~1.00),校正曲线接近理想曲线,预测概率与实测值基本一致。结论术前血清丙氨酸、谷氨酰胺、TNM分期、分化程度和LNR是胰腺癌患者术后预后的独立影响因素,据此建立的列线图预测模型对胰腺癌患者术后预后具有良好的预测效能,可用于指导治疗决策。

细菌性腹水患者病原菌分布、实验室指标及预后情况分析

目的探讨细菌性腹水患者的临床特征、实验室指标及预后情况,为临床早期诊断和治疗提供依据。方法回顾性分析2019年1月至2022年1月天津中医药大学第一附属医院诊断为肝硬化腹水患者的临床资料,根据诊断标准将其分为细菌性腹水组(n=24)、自发性细菌性腹膜炎组(n=20)与对照组(n=26)。比较三组患者的临床特征、实验室指标及预后情况。结果由乙型肝炎引起的肝硬化腹水占比最高。细菌性腹水组患者的血白细胞计数、中性粒细胞百分比、腹水白细胞计数及多形核白细胞计数均显著高于对照组(P<0.05)。革兰阳性菌是引起细菌性腹水的最主要病原体,其中葡萄球菌占比最高。有感染症状的10例细菌性腹水患者,进行腹水培养同时给予抗感染治疗,病情均好转;无感染症状的14例患者,根据病情发展给予不同的治疗方案,1例患者死亡,其余患者病情好转。结论临床中细菌性腹水患者数量较大,主要致病菌为革兰阳性球菌;将临床症状与实验室指标结合,有利于细菌性腹水的早期诊断,并决定治疗方案。

新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

目的对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测7种振荡混匀方法进行比较,确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究:第1阶段,采用小样本(每种方法30例),从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应(PCR)3个层面评价7种振荡方法的有效性,并确定最优时间参数;第2阶段,采用大样本(2150例),验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示,除超声振荡外,其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多(P<0.05)。实时荧光PCR结果显示,颠倒和回旋振荡处理后,核酸扩增未见内参循环阈值(Ct)明显下降(P>0.05);吹打6次和往复振荡5 min处理后,核酸扩增未见内参Ct值下降;单管/多管涡旋和超声振荡处理后,核酸扩增内参Ct值显著下降(P<0.0001)。大样本量实时荧光PCR结果显示,多管涡旋振荡2 min较超声振荡5 min效果更优(P<0.0001)。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。

实时荧光聚合酶链反应检测新型冠状病毒室内质控方法初探

目的绘制实时荧光聚合酶链反应(RT-PCR)定性室内质控图和基于循环阈值的Levey-Jennings质控图,探究新型冠状病毒RT-PCR检测的室内质控方法。方法使用无菌生理盐水按照1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40对第三方质控物进行倍比稀释,确定室内弱阳性质控的稀释倍数。统计该实验室2022年1-2月新型冠状病毒RT-PCR阴阳性质控原始记录,以自定义数值绘制定性结果散点图。统计2022年1-2月每批次弱阳性质控的靶基因Ct值,分别对N基因和ORF1ab基因两组Ct值进行正态分布检验,根据前20次检测结果分别计算N基因和ORF1ab基因的靶值X和标准差s,绘制Levey-Jennings质控图。结果确定1∶30为每日室内质控的弱阳性质控品的稀释倍数。定性检测散点图可直观发现1次弱阳性质控检出阴性的“假阴性”反应。弱阳性质控N基因、ORF1ab基因Ct值均符合正态分布(P>0.05)。N基因Ct值靶值X为34.13,变异系数为1.91%,所有Ct值均在X±3 s以内,5次出现±2 s警告,符合Westgard质控规则。ORF1ab基因Ct值靶值为35.30,变异系数为2.58%,出现1次+3 s失控,5次±2 s警告,第31~41批次违反了10x规则,第73~80批次违反了R 4s规则。结论应用定性室内质控散点图和Levey-Jennings质控图建立的新型冠状病毒室内质控方法具有可行性,能够有效监测和预警检测过程中的质量问题,保证检测结果准确可靠。

血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平对类风湿关节炎预后的预测价值

目的探究血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-1β、红细胞沉降率(ESR)水平对类风湿关节炎(RA)预后的预测价值。方法选择2019年8月至2022年8月在天津中医药大学第一附属医院就诊的167例RA患者作为研究对象,入院后均接受中西医规范治疗,检测比较治疗前后RA患者血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平,并根据临床治疗30 d疾病转归情况分为预后良好组和预后不良组,采用多因素Logistic回归分析探究血清IFN-γ、IL-1β、ESR与RA预后的关系,绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平对RA预后的预测价值。结果治疗30 d后,167例RA患者中有108例患者预后良好,59例患者预后不良。治疗后,RA患者血清IFN-γ、IL-1β、ESR水平均低于治疗前[(27±3)ng/L比(39±6)ng/L,(105±4)ng/L比(159±21)ng/L,13(5,17)mm/1 h比65(60,72)mm/1 h](P<0.01)。预后不良组年龄、简式疼痛问卷表评分、28个关节疾病活动度评分系统评分、血清类风湿因子、趋化素、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白、白细胞计数、血小板计数、血尿酸、基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-9、IL-17、Toll样受体4阳性率、IFN-γ、IL-1β、ESR高于预后良好组(P<0.01),吸烟史占比、血清调节性T细胞水平、IL-4低于预后良好组(P<0.01),晨僵时间长于预后良好组(P<0.01)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,高IFN-γ、IL-1β、ESR、趋化素、TNF-α水平是影响RA患者预后不良的危险因素(OR=3.865,95%CI 1.211~6.519;OR=3.796,95%CI 1.174~6.418;OR=3.747,95%CI 1.034~6.460;OR=3.543,95%CI 1.241~5.845;OR=3.384,95%CI 1.116~5.652)(P<0.01)。血清IFN-γ、IL-1β、ESR指标联合检测预测RA患者预后的灵敏度、特异度、AUC分别为81.36%、82.41%、0.869,高于血清IFN-γ、IL-1β、ESR单独检测。结论IFN-γ、IL-1β、ESR在RA患者血清中呈高表达,可作为预测RA疗效预后的有效指标,且联合检测预测价值更高。

微流控芯片分选富集循环肿瘤细胞的研究进展

近年来,循环肿瘤细胞(CTCs)研究得到了越来越多的关注,许多研究报告已经证实其在肿瘤转移的早期诊断、治疗方案选择、个体化治疗及探索肿瘤转移机制等方面具有潜在的价值,然而CTCs在循环系统中的含量极低,这成为限制其临床相关应用的主要难点。微流控芯片技术具有低成本、快速、高通量及操作简单等优势,利用微流控芯片可实现CTCs的高速、高回收率、高纯度的分选富集,近年来得到广泛的关注。本文综述了近年来在微流控芯片内进行CTCs分选富集的研究并探讨了各种方法的优缺点,并在本研究团队的研究基础上进行了展望。

动物水平的绿原酸通过Notch1信号通路调控非小细胞肺癌凋亡及机制研究

背景与目的绿原酸类物质可通过调节细胞周期、诱导凋亡、抑制细胞生长等途径产生抗癌作用,Notch信号通路与人类许多肿瘤都存在密切的关系,本研究旨在探讨绿原酸通过Notch1信号通路控制非小细胞肺癌细胞凋亡的作用机制,为临床应用以及Notch1靶向药物的研究提供依据。方法 MTT法检测不同浓度的绿原酸对非小细胞肺癌细胞系A549细胞形态和细胞增殖的影响;流式细胞仪检测绿原酸对A549细胞的凋亡和细胞周期的影响;建立A549细胞的裸鼠荷瘤模型;测量肿瘤大小和重量;实时荧光定量PCR法检测Notch信号通路相关因子的m RNA表达水平;免疫印迹法检测Notch信号通路相关因子的蛋白表达水平。结果绿原酸抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,增加细胞G2期/M期细胞百分比增加(P<0.05),并且呈现剂量依赖趋势。在A549细胞的裸鼠荷瘤模型中,实验组肿瘤大小和体积明显小于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01)。试验组Notch1、VEGF、Delta4、HES1、HEY1 m RNA表达量较对照组明显减少(P<0.05)。实验组Notch1蛋白明显减少,PTEN、p-PTEN、p-AKT明显增加(P<0.05)。结论在动物水平,绿原酸可能通过Notch1信号通路调控非小细胞肺癌的凋亡,可能是通过减少VEGF的表达,下调Delta 4水平,从而抑制Notch1信号通路的活化。Notch1信号通路可能通过PTEN与PI3K/AKT通路存在交叉调控作用。

SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响

背景与目的肺癌是最严重的恶性肿瘤之一,其中非小细胞肺癌发病率在肺癌中居首位。部分患者对顺铂耐受是导致化疗失败的主要原因。SOX4是转录调节因子,在多种肿瘤的发生发展过程中发挥着重要的作用,通过调控β-catenin的表达对Wnt信号通路进行调控。本研究旨在探讨SOX4对非小细胞肺癌细胞A549的顺铂耐药作用的影响。方法体外诱导法建立顺铂耐药的肺癌细胞株A549/DDP,CCK8法检测A549及A549/DDP细胞对顺铂的耐药性。绘制A549与A549/DDP细胞生长曲线。Western blot检测耐药细胞株中SOX4的蛋白表达水平。CCK8法检测敲减SOX4后耐药细胞株A549/DDP对顺铂耐药性。实时定量PCR和免疫印迹法检测敲减SOX4后A549/DPP细胞中β-catenin和Survivin蛋白的表达。结果成功构建非小细胞肺癌顺铂耐药细胞株A549/DDP,其耐药性是亲本细胞的13.7倍,差异有统计学意义(P<0.001)。生长曲线显示耐药细胞株与亲本细胞增殖速度没有统计学差异(P<0.05);与A549细胞相比,耐药细胞A549/DDP细胞中SOX4的表达显著增高(P<0.001)。敲减SOX4后,A549/DDP细胞的耐药性显著降低;敲减SOX4后,A549/DDP细胞中β-catenin和Survivin的m RNA和蛋白表达水平显著降低。结论 SOX4的表达水平影响非小细胞肺癌细胞A549对顺铂的耐药性。

线粒体酶活性及线粒体肿胀与不同运动强度的关系

背景:关于不同运动强度对机体的影响早有研究,并且取得了不少有价值的成果。但是对于不同运动强度对线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性以及线粒体肿胀程度影响的研究较少。目的:观察不同运动强度对大鼠骨骼肌线粒体Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶以及线粒体肿胀的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为正常对照组,中等强度运动组和高强度运动组。正常对照组大鼠正常笼内生活,不运动。另2组游泳训练方式,分别建立中强度和高强度运动模型,进行相应的运动锻炼,训练4周。结果与结论:中强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均增高(P<0.05),线粒体肿胀程度降低(P<0.05);而高强度运动组线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性与正常对照组相比均降低(P<0.05),线粒体肿胀程度增大(P<0.05)。实验结果表明中强度运动可以保护线粒体Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活性,提高线粒体功能;而高强度运动则降低了线粒体的功能。

同型半胱氨酸的临床应用

同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢过程中的一个重要中间产物。血浆同型半胱氨酸代谢异常会引起高同型半胱氨酸血症,是多种疾病的独立危险因素。现就该指标在心脑血管疾病、糖尿病肾病、肿瘤等疾病的最新临床应用作一综述,以便更多了解其对疾病的诊断、疗效以及预后的重要应用价值。

血清降钙素原与C反应蛋白在细菌感染性疾病中的临床应用

目的对血清降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)试验在细菌或病毒感染中的鉴别诊断中的价值进行评价。方法对该院住院的85例细菌感染患者血清PCT、CRP浓度进行检测,并与46例病毒感染患者进行分析比较。结果如以血清PCT≥0.5ng/mL为阳性标准,则细菌感染组的血清PCT检测阳性率为94.12%,病毒感染组为10.87%,对细菌性感染诊断的灵敏度为94.12%,特异度为87.5%,阳性预测值为94.12%,阴性预测值为89.13%,诊断符合率为92.37%;以血清CRP≥8mg/L为阳性判断标准,则细菌感染组CRP阳性率为29.41%,病毒感染组为23.91%,对细菌性感染诊断的灵敏度为29.41%,特异度为76.09%,阳性预测值为69.44%,阴性预测值为36.84%,诊断符合率为45.8%。结论血清PCT试验对于细菌或病毒感染性疾病的鉴别诊断作用明显优于血清CRP试验。

急性脑梗死患者检测Hcy、NOS及STM检测的临床意义探讨

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)、一氧化氮合成酶(NOS)及可溶性血栓调节蛋白(STM)在急性脑梗死(ACI)疾病中水平变化及临床意义。方法检测150例ACI患者及50例健康成人血清标本中的Hcy、NOS及STM水平并进行显著性检验及相关性分析。结果与健康对照组比较,ACI患者Hcy、NOS及STM结果明显偏高,差异有统计学意义(P<0.05)。ACI患者血清NOS、STM升高水平与Hcy升高水平呈正相关。结论 Hcy、NOS及STM是ACI发生内皮损伤的标志物,检测其平对判断病情、指导治疗具有一定意义。

脑钠素与肾损伤

脑钠素(BNP)的功能、结构、作用方式与心钠素(ANP)类似,具有很强的利钠、利尿、扩张血管和降低血压的作用,是天然的肾素-血管紧张素-醛固酮系统拮抗剂。BNP的降解是由于肾脏分泌的24,11-中性肽链内切酶(NEP)破坏其环状结构而失活。人类BNP前体(proBNP)分裂产生的N末端片段(NT-proBNP)在我国表面健康人群中的水平随年龄增高而呈上升趋势。慢性肾衰患者其NT-proBNP的水平可明显升高。BNP可作为肾脏功能损伤的标志物。

血小板活化因子病理、生理学研究进展

血小板活化因子(PAF)是迄今为止发现的一种最强活性的脂类介质,作为一种特殊类型的细胞因子,参与多种生理及病理效应,在体内发挥着类似于激素的生物学活性。生理状态下,体内PAF主要参与细胞内信息传递和调节,与生殖,胎儿发育、分娩和肾脏的作用联系紧密。在病理情况下,PAF可以在炎性反应、心脑血管微循坏障碍、胃肠黏膜损害等一系列相关疾病的发生、发展过程中发挥重要作用。现就PAF的病理、生理学最新研究概况作一综述。

人绒毛膜促性腺激素对人PBMC产生MIF的影响

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人外周血单核细胞(PBMC)产生巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的影响。方法:分离正常人PBMC,体外加入不同浓度的hCG,在37℃5%CO2条件下培养一定时间收获细胞或加入一定浓度的hCG,同样条件下培养,在不同时间收获细胞,用荧光定量PCR方法检测MIF mRNA转录水平。结果:在实验的hCG浓度范围内,MIF的转录水平随着hCG浓度增加而明显提高。在100U/mL的hCG作用下,MIF mRNA表达在培养的1～2h达到峰值,随后很快下降,至8h基本回到刺激前水平。结论:hCG在一定浓度范围内有促进MIF mRNA转录的作用,且在本实验筛选浓度下,MIF mRNA转录水平与作用时间相关,提示hCG可通过促进PBMC分泌细胞因子参与一定的免疫调节作用。

人绒毛膜促性腺激素对人PBMC IL-8mRNA表达的影响

目的:探讨人绒毛膜促性腺激素(hCG)对人外周血单个核细胞(PBMC)IL-8基因表达的影响。方法:分离正常人PBMC,体外加入或不加hCG,37℃5%CO2条件下培养8h,收获培养细胞,用荧光定量PCR方法检测IL-8mRNA表达水平。结果:在使用的hCG浓度范围内,IL-8的表达水平随着hCG剂量增加而明显提高。而在hCG100U/mL的作用下,IL-8mRNA表达在培养8h达到峰值,随后逐渐下降,至24h降到最低水平。结论:hCG可通过促进PBMC分泌细胞因子参与一定的免疫调节作用。

不同溯源的两台血凝仪测定纤维蛋白原方法学比较

目的比较SYSMEX CA6000与STA Compact 2台血凝仪测定纤维蛋白原的结果,了解其偏倚的可接受性。方法根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)EP9-A2文件,用2台血凝仪同时测定40例患者的纤维蛋白原,检查离群点并进行直线相关分析,计算医学决定水平处的预期偏倚。结果2台仪器测定结果均无离群点。直线回归方程为YΛ=0.851 6X-0.048 7,r=0.992。3个医学决定水平处预期偏倚分别为0.093、0.197、0.791 g/L。结论纤维蛋白原的3个医学决定水平处预期偏倚95%置信区间下限均低于允许偏倚,SYSMEX CA6000测定结果与STA Compact测定结果相当,偏倚可接受。

肺炎支原体感染血清学检测分析

目的分析该院肺炎支原体（MP）感染者血清学情况。方法采用日本富士瑞必欧株式会社MP抗体检测试剂，对2009年1月至2010年12月在该院就诊的怀疑为MP感染患者进行血清MP抗体检测（被动凝集法），对不同年度、不同季节及不同年龄MP肺炎的发病情况进行统计。结果2009年MP抗体阳性率为40．4％，2010年为57．4％。0～1岁婴儿期MP阳性率25．9％；〉1～3岁组幼儿MP阳性率为44．5％；4～6岁学龄前期MP感染阳性率为55．1％；7～14岁学龄期MP感染阳性率为60．3％；20～40岁阳性率为55．2％；〉60岁阳性率为28．3％。说明阳性率的高低与不同的年龄段有关。通过观察发现支原体肺炎一年四季均可发病。但20lO年秋季开始呈流行上升趋势，尤其在12月达最高峰，为73．7％。结论支原体肺炎的发病与年龄、季节和年度有密切关系，尤其是MP感染引起的肺外表现，可使病情复杂化，应引起高度重视，从而做好控制及预防。

缺血性脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2检测的临床意义

缺血性脑卒中疾病的重要病理基础是动脉粥样硬化（ atherosclerosis， AS ），而炎症现已被公认为是AS发展过程中的核心因子，贯穿于AS的整个发生、发展环节［1］。脂蛋白相关磷脂酶 A2（ lipoprotein-associated phospholipase A2， Lp-PLA2）作为一种新型的炎症标志物，参与AS斑块形成的各个阶段，在坏死中心、巨噬细胞、凋亡的巨噬细胞内以及易损和破裂的斑块中有高度表达［2］。 D-二聚体（D-dimer，D-D）是纤溶酶作用于交联纤维蛋白后产生的特异性降解产物，其升高特异地反映体内纤溶活性增强和凝血酶生成增多，对血栓形成性疾病有早期快速诊断的价值［3］。 D-D与Lp-PLA2可能对缺血性脑卒中的发生、发展有重要意义。为此，我们检测了缺血性脑卒中患者血浆Lp-PLA2水平，并分析其与颈动脉内中膜厚度（ carotid intima-media thickness， CIMT）、动脉粥样硬化斑块的稳定性以及D-D之间的关系，以期为缺血性脑卒中的临床诊断、分期及疗效观察提供理论依据。