老年冠心病患者血浆Klotho水平测定的临床意义

目的探讨老年冠心病患者血浆Klotho蛋白测定的临床意义。方法随机选取60岁以上的老年住院患者,根据冠状动脉造影或冠状动脉CTA结果分为冠心病组138例(根据病变冠状动脉数目又分为单支病变组和多支病变组两个亚组)和对照组(140例),分别对各组进行血浆Klotho蛋白检测,并对冠心病组患者的冠状动脉狭窄程度与其血浆Klotho蛋白水平进行相关性分析。结果冠心病组患者血浆Klotho蛋白水平显著低于对照组,多支病变组患者血清Klotho蛋白水平低于单支病变组。冠心病组患者的冠状动脉狭窄程度与血浆Klotho蛋白水平呈负相关。结论血浆Klotho蛋白水平一定程度上可以反映冠状动脉狭窄程度,其可以作为评价冠状动脉狭窄程度的指标之一。

老年短暂性脑缺血发作患者脑血流参数、凝血及神经功能指标变化研究

目的:研究老年短暂性脑缺血发作患者脑血流参数、凝血及神经功能指标变化情况。方法:选取老年短暂性脑缺血发作患者54例作为观察组,并以同时间段的54例健康同龄老年人员作为对照组。检测并比较两组老年人的脑血流参数、凝血指标及神经功能指标,比较不同分类与ABCD2评分短暂性脑缺血发作患者的检测结果。结果:观察组脑血流参数、凝血指标及神经功能指标均差于对照组(P均<0.05),不同分类短暂性脑缺血发作患者的检测结果无统计学差异(P均>0.05),而不同ABCD2评分者的检测结果则存在统计学差异(P均<0.05)。结论:老年短暂性脑缺血发作患者的脑血流参数、凝血及神经功能指标呈现异常的表达水平,且不同ABCD2评分患者的表达水平也存在明显的差异,因此认为其具有一定的临床检测价值。

甲泼尼龙片口服治疗老年间质性肺疾病临床疗效观察

目的:探讨甲泼尼龙片口服治疗老年间质性肺疾病的临床疗效。方法:老年间质性肺疾病患者80例,随机分为对照组与研究组,其中对照组给予常规抗感染、抗纤维化治疗,研究组在对照组基础上给予甲泼尼龙片治疗,比较两组患者临床疗效及肺功能改变。结果:对照组总有效率62.5%,研究组85.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),两组患者治疗后肺功能指标均明显改善,研究组优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),研究组患者出现空腹血糖、血压升高,对照组无明显不良反应,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:甲泼尼龙片口服治疗老年间质性肺疾病临床效果显著,可有效改善患者临床症状及肺功能,用药期间血压与血糖均在可控范围,停药后均恢复正常。

老年2型糖尿病患者胰岛素治疗后低血糖症发生频率的观察

目的观测老年胰岛素治疗的2型糖尿病患者低血糖症的频率。方法选取近三个月有低血糖症史的接受胰岛素治疗的2型糖尿病患者,分为老年组（≥60岁,240例）和非老年组（〈60岁,238例）,用动态血糖监测系统（CGMS）监测72小时,记录低血糖症（血糖≤3.9 mmol/L）的发生频率。结果血糖在2.8~3.9 mmol/L之间,老年组无症状低血糖症频率为27.38次/患者年,症状性低血糖症频率7.10次/患者年,两者差异有显著统计学意义（P〈0.01）;无症状低血糖症频率,老年组27.38次/患者年,非老年组11.25次/患者年,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论在用胰岛素治疗的2型糖尿病患者中,老年患者无症状低血糖症频率明显高于症状性低血糖症频率,老年患者比非老年患者更易发生无症状低血糖症。

甲钴胺对老年糖尿病周围神经病变患者平衡功能的影响

目的观察甲钴胺对老年糖尿病周围神经病变（DPN）患者平衡功能的影响。方法老年2型糖尿病合并DPN患者56例，随机分为两组，每组28例。治疗组给予肌注甲钴胺500μg，1次/天，对照组给予肌注维生素B1100mg＋维生素B120．5mg，1次／天，共治疗8周。治疗前后运用Berg平衡量表（BBS）评价患者平衡功能。结果治疗组BBS评分8周后较治疗前显著提高（P〈0．05），治疗前后BBS评分变化比较两组有显著性差异（P〈0．01）。结论甲钴胺能有效改善老年DPN患者的平衡功能。

Klotho基因G-395A多态性与华中地区老年汉族人群颈动脉内中膜厚度的相关性

目的探讨Klotho基因G-395A位点多态性与华中地区老年(年龄≥60岁)汉族人群颈动脉内中膜厚度(IMT)的相关性。方法随机选取278例华中地区老年汉族患者,根据IMT分为IMT增厚组(IMT≥1 mm,132例)和对照组(IMT<1 mm,146例),分别检测各组血压、血糖、血脂等生化指标,并用Taq Man基因探针法检测各组Klotho基因G-395A位点的基因型。结果与对照组相比,IMT增厚组GG基因型和G等位基因频率明显增高,AA基因型和A等位基因频率明显降低,AG基因型无明显差异。经多元Logistic回归分析后,G等位基因频率与IMT增厚存在相关性,为IMT增厚的独立危险因子。结论 Klotho基因G-395A位点多态性与华中地区老年汉族人群颈动脉IMT具有相关性,G-395A多态性有可能作为颈动脉IMT增厚的预测指标之一。

Mfn2介导缬沙坦抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

目的研究缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth mus-cle cells,VSMCs)增殖的影响,并探讨其新的作用机制。方法体外培养VSMCs,采用AngⅡ诱导其增殖,用不同浓度的缬沙坦(10-5、10-6、10-7 mol/L)进行干预,细胞计数及四氮唑盐试验(MTT)检测VSMCs增殖情况,Western blot检测各组线粒体融合素基因-2(mitofusin-2,Mfn2)、Raf、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signalregulated kinase 1/2,ERK1/2)表达水平的变化。结果 AngⅡ能够明显促进VSMCs的增殖,下调Mfn2的表达、增强Raf和ERK1/2的表达;缬沙坦10-5、10-6 mol/L可以拮抗AngⅡ的上述作用,而缬沙坦10-7 mol/L无此作用;缬沙坦对无AngⅡ刺激的VSMCs增殖无明显影响。结论缬沙坦能有效抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,其机制与调节Mfn2的表达、抑制Ras-Raf-ERK/MAPK信号通路有关。

可溶性Klotho蛋白抑制THP-1源性泡沫细胞形成

目的:探讨可溶性Klotho(KL)蛋白对THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法:THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯孵育48 h后,诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,给予THP-1源性巨噬细胞不同浓度(25、50、100和200μg/L)的可溶性KL蛋白预处理后,再由氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导其转变为泡沫细胞。油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,通过液体闪烁计数法测定THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出情况,酶荧光法检测细胞内游离胆固醇及胆固醇酯的含量,并分别用Western blot法及RT-qPCR法检测酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)和ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的蛋白及mRNA表达。结果:可溶性KL蛋白能增加THP-1源性巨噬细胞内胆固醇流出,抑制THP-1源性泡沫细胞形成,且可溶性KL蛋白呈一定浓度依赖性地抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程中ACAT1表达的上调和ABCA1表达的下调(P<0.05)。结论:可溶性KL蛋白能够抑制THP-1源性泡沫细胞形成,其机制可能与靶向调控细胞内ACAT1和ABCA1的表达有关。

睾酮抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞表型转化和增殖

目的研究睾酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)表型转化和增殖的抑制作用,并探讨其可能机制。方法培养大鼠VSMC,利用血清饥饿法进行同步化处理。将细胞分为对照组:不进行任何处理;ox-LDL组:给予50μg/m L ox-LDL处理;睾酮组:分别加入5×10-8mol/L和5×10-7mol/L睾酮预处理12 h,然后与50μg/m L ox-LDL共培养;另外设置血清组,用含100 m L/L胎牛血清的培养基培养。水溶性四甲基偶氮唑盐(WST-1)法检测各组细胞增殖的变化;流式细胞术检测各组细胞周期的变化;Western blot法检测各组细胞线粒体融合素2(Mfn2)、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及骨桥蛋白(OPN)表达的变化。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞增殖能力增强,G0/G1期细胞比例降低,S期细胞比例增加,Mfn2表达降低,p-ERK1/2表达增加,PCNA表达增加,α-SMA表达降低,OPN表达增加。与ox-LDL组比较,不同浓度睾酮组细胞增殖受抑制,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,Mfn2表达增加,p-ERK1/2表达降低,PCNA表达降低,α-SMA表达增加,OPN表达降低,以上作用呈现一定的浓度依赖性。结论睾酮可抑制ox-LDL诱导的大鼠VSMC发生表型转化及增殖,可能与其上调Mfn2抑制ERK1/2信号通路有关。

卒中相关性肺炎血清炎症因子和外周血淋巴细胞亚群的分析

目的探讨卒中相关性肺炎(SAP)病人血清炎症因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-4、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平变化及其临床意义。方法选取2016年3月至2017年3月收治的48例SAP,根据A2D2S2L评分分为低危(0~2分,14例)、中危(3~9分,15例)、高危(≥10分,19例)三组。入院后次日清晨取空腹静脉血,应用流式细胞仪测定外周血T淋巴细胞亚群(CD3^+、CD4^+、CD8^+),应用酶联免疫吸附试验法检测血清炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4)。结果随着危险程度的增高,血清IL-1β、IL-6、IL-4、TNF-α水平均明显增高(P<0.05),外周血CD3^+和CD4^+细胞百分比显著增高(P<0.05)。低危组CD4^+/CD8^+显著高于高危组和中危组(P<0.05),而后两组无统计学差异(P>0.05);三组CD3^+/CD8^+均无显著差异(P>0.05)。结论血清炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4以及T细胞淋巴亚群变化情况反映SAP病人的A2D2S2L评分,血清IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α与A2D2S2L评分呈正相关,T细胞亚群CD3^+、CD4^+百分比与A2D2S2L评分呈负相关。

睾酮抑制大鼠血管平滑肌细胞泡沫化及机制研究

目的研究睾酮对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)转化为泡沫细胞的抑制作用,并探讨其可能机制。方法培养大鼠VSMC,分为对照组、ox-LDL组、低(1nmol/L)、中(10nmol/L)、高(100nmol/L)浓度睾酮组。另外,设置睾酮组(100nmol/L)、氟他胺组(1μmol/L)、睾酮与氟他胺合用组,并与ox-LDL共培养建立泡沫细胞模型。利用油红O染色及酶荧光法检测不同浓度睾酮及氟他胺预处理对VSMC内脂质含量的影响,免疫印迹法检测各组细胞内线粒体融合素2(Mfn2)、清道夫受体CD36和ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)的表达变化。结果与ox-LDL组比较,不同浓度睾酮组VSMC脂质蓄积减少,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均降低(P<0.05),Mfn2和ABCA1表达增加(P<0.05),CD36表达降低(P<0.05)。与睾酮组比较,睾酮与氟他胺合用组VSMC脂质蓄积增加,总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量均增加(P<0.05),Mfn2和ABCA1表达降低(P<0.05),CD36表达增加(P<0.05)。结论睾酮以雄激素受体依赖的方式,抑制ox-LDL诱导的VSMC泡沫化过程,其作用与睾酮上调Mfn2表达进而调节CD36和ABCA1表达有关。

贝前列素钠对糖尿病肾病患者血浆内皮素1水平的影响

目的观察贝前列素钠对糖尿病肾病患者临床疗效及血浆内皮素1水平的影响。方法选择2型糖尿病患者75例，根据是否合并糖尿病肾病将其分为无肾病组（27例）和肾病组（48例）。将’肾病组患者完全随机分为对照组和研究组，各24例。在常规治疗的基础上，研究组另用贝前列素钠20仙g／次，1次／d，口服。用药前及用药后8周测定3组糖尿病患者血浆内皮素1水平、尿微量白蛋白及尿白蛋白排泄率（UAER）。结果肾病组和无肾病组用药前血浆内皮素1分别为（138±9）ng／L和（67±3）ng／L，差异有统计学意义（P〈0．01）。研究组应用贝前列素钠后血浆内皮素1和UAER明显低于对照组，组间差异有统计学意义[血浆内皮素1：（72±4）比（126±9）ng／L，P〈0．05；UAER：（89±27）比（109±35）mg／24h，P〈0．01]。结论内皮素1水平升高在糖尿病肾病的发病中发挥重要作用。贝前列素钠治疗可纠正糖尿病’肾病患者血浆内皮素1平衡失调，改善糖尿病肾病内皮功能，降低尿蛋白，对糖尿病。肾病有保护作用。

高龄患者脑小血管病合并脑大动脉粥样硬化对认知影响的对比研究

目的评估脑小血管病(CSVD)总体负担及大动脉粥样硬化对高龄患者认知的影响。方法回顾性选择2013年1月至2022年12月在武汉市中心医院老年科住院的高龄患者178例,根据蒙特利尔认知评估量表评分分为痴呆组83例和非痴呆组95例,所有患者均行头颅MRI平扫、磁敏感成像、脑动脉成像,根据患者MRI影像学表现,评估所有受试者CSVD总负担评分及大动脉粥样硬化对认知的影响。分别对CSVD负担≤2分和CSVD负担≥3分的左、右侧14个脑回容积进行测量。结果痴呆组脑微出血灶>10个,腔隙灶≥5个的比例明显高于非痴呆组,差异有统计学意义(P<0.01),2组颅内动脉狭窄和颅外动脉狭窄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CSVD负担≥3分患者左、右脑前扣带回和旁扣带脑回,右脑海马、左脑海马旁回、右脑颞横回、左脑颞下回体积低于CSVD负担≤2分患者(1723.444vs1867.167,1590.167vs1595.670,1481.466vs1509.540,1543.831vs1585.505,1038.345vs1305.831,1220.525vs1392.352,P<0.05)。结论高龄患者的认知功能主要受CSVD负担影响,大动脉粥样硬化狭窄并不是影响认知功能的主要因素。CSVD总负担与部分脑回萎缩呈相关性。

复心片治疗稳定型心绞痛38例

目的观察复心片治疗稳定型心绞痛的疗效。方法选取稳定型心绞痛患者70例,随机分成两组。治疗组38例,口服复心片,每次4片,tid;对照组32例,口服单硝酸异山梨酯缓释片60 mg,qd。疗程8周。结果治疗组缓解心绞痛症状总有效率为89.47%,对照组为93.75%,两组比较差异无显著性(P>0.05);治疗组心电图改善疗效达52.63%,对照组为56.25%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。结论复心片治疗稳定型心绞痛疗效与单硝酸异山梨酯缓释片相似。

胰岛素联合糖脉康颗粒治疗2型糖尿病41例

目的观察胰岛素联合糖脉康颗粒治疗2型糖尿病的疗效及安全性。方法选取用胰岛素治疗的2型糖尿病患者86例，随机分成两组。治疗组41例，对照组45例。两组均采用胰岛素皮下注射治疗，每例患者平均每日用量40～60u。治疗组另外口服糖脉康颗粒，每次5g，tid。疗程3个月。结果治疗组与对照组治疗前后空腹血糖及餐后2h血糖比较差异均无显著性（均P〉0．05）；3个月后治疗组胰岛素用量与治疗前及对照组比较均降低，差异均有显著性（均P〈0．05）；治疗组低血糖发生率比对照组少，差异有显著性（P〈0.05）。结论胰岛素联合糖脉康颗粒治疗2型糖尿病，在同等控制血糖的情况下，可显著降低胰岛素用量，减少低血糖发生率。

西洛他唑在糖尿病慢性并发症中的应用

随着病程的延长,糖尿病患者慢性并发症逐渐增多。西洛他唑作为一种抗血小板药物在临床应用已有十余年,通过大量动物实验和临床研究的开展,发现西洛他唑除有抗血小板聚集、扩张外周动脉等功能外,还能通过抗多种炎性因子、抑制血管平滑肌增生、保护神经细胞、调节血脂等多种机制,对多种糖尿病慢性并发症起到一定预防和治疗作用。

miR-499通过Drp1介导线粒体自噬保护缺氧/复氧心肌细胞

目的探究miR-499对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用,并从线粒体自噬方面探究其可能机制。方法缺血/再灌注(I/R)诱导心肌细胞H9c2(2-1),建立缺氧/复氧(H/R)心肌细胞模型,使用miR-499 mimics和(或)P110处理细胞。将细胞分为BC组、I/R组、I/R+mi组、I/R+NC组、I/R+mi+P110组、I/R+NC+P110组。使用CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测ROS、线粒体膜电位和细胞凋亡,试剂盒检测MDA、SOD、ATP含量,qRT-PCR和Western blot检测线粒体融合、分裂、自噬相关基因Fis1、Mfn1、Parkin、LC3-Ⅱ、p62和Drp1的mRNA和蛋白表达水平,透射电镜观察线粒体自噬。结果miR-499 mimics和/或P110可使I/R诱导的心肌细胞增殖抑制率和凋亡率下降;线粒体膜电位下降、线粒体自噬减少、ATP含量上升;Fis1、Parkin、LC3-Ⅱ和Drp1的基因和蛋白表达水平下降,Mfn1和p62的基因和蛋白表达水平上升;细胞内ROS和MDA含量减少,SOD含量增加。结论miR-499可通过降低Drp1介导的线粒体自噬减少氧化应激的发生,从而保护I/R诱导的心肌细胞。

miR-499通过抑制calcineurin抑制缺血/再灌注心肌细胞的凋亡

目的 探讨miR-499对钙调磷酸酶(calcineurin,CaN)的调控作用以及在缺血/再灌注(ischemia/repefusion,I/R)损伤心肌细胞中的作用机制。方法 将大鼠心肌细胞H9c2分成6组:对照组、I/R组、I/R+mimics组(转染miR-499 mimics后构建I/R细胞模型)、I/R+NC组(转染miR-NC后构建I/R细胞模型)、I/R+mimics+CsA组(转染miR-499 mimics后加入CaN抑制剂CsA处理,最后构建I/R细胞模型)和I/R+NC+CsA组(转染miR-NC后加入CsA处理,最后构建I/R细胞模型)。CCK-8检测各组细胞增殖能力,Hochest33258染色观察各组细胞形态的变化,TUNEL检测各组细胞凋亡情况,qRT-PCR检测各组细胞中miR-499、CaN和凋亡相关(Bcl-2、Bax、Caspase-3)基因的表达,Western blot检测各组细胞中CaN和凋亡相关(Bcl-2、Bax、Caspase-3)蛋白的表达。结果 与对照组相比,I/R组细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞致密浓染,呈亮蓝色,凋亡细胞增多,细胞中miR-499、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01),CaN、Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01);与I/R+NC组相比,I/R+mimics组和I/R+NC+CsA组细胞增殖能力均显著升高(P<0.01),致密浓染的细胞核均有所减少,凋亡细胞减少,细胞中miR-499、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),CaN、Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.05);与I/R+NC+CsA组相比,I/R+mimics+CsA组上述作用更加显著。结论 miR-499能够抑制CaN的表达,抑制I/R损伤心肌细胞的凋亡,减轻心肌细胞损伤。

JNK-PPARγ信号转导通路在肺炎衣原体诱导THP-1源性泡沫细胞形成中的作用

目的:观察c-Jun氨基末端激酶(JNK)-过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPARγ)信号通路在肺炎衣原体(Cpn)诱导THP-1源性泡沫细胞形成的作用。方法:THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞后随机分为5组:对照组、Cpn感染组、罗格列酮(PPARγ特异性激动剂)+Cpn组、GW9662(PPARγ特异性抑制剂)+Cpn组、SP600125(JNK特异性抑制剂)+Cpn组。免疫印迹法(Western blot)检测细胞磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达,并分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测细胞PPAR-γmRNA和蛋白表达,油红O染色和酶荧光化学法检测泡沫细胞的形成。结果:Cpn可上调pJNK的表达,下调PPARγ表达;而SP600125可阻断Cpn对PPARγ表达的下调。罗格列酮及SP600125抑制Cpn诱导的THP-1源性泡沫细胞形成,而GW9662促进Cpn诱导的THP-1源性泡沫细胞形成。结论:肺炎衣原体通过JNK-PPARγ信号转导通路诱导THP-1源性泡沫细胞形成。

睾酮抑制小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞形成

生理浓度的睾酮具有抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）作用[1],但其分子机制尚不清楚。巨噬细胞迁入内膜下吞噬脂质转变为泡沫细胞是AS早期的标志性事件。本文旨在观察睾酮对泡沫细胞形成的作用,以及对相关蛋白表达的影响,探讨睾酮抗AS的可能机制。1材料与方法1.1材料：小鼠巨噬细胞系RAW264.7（中科院上海细胞生物所）;氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）（尚善生物）;