Ⅰ期肺腺癌中不同高级别成分与临床病理特征、基因变异的相关性分析

目的 根据WHO(2021)胸部肿瘤分类浸润性肺腺癌新分级,初步探讨伴高级别成分Ⅰ期肺腺癌的临床病理特征和常见基因变异的关系。方法 收集785例Ⅰ期肺腺癌的临床资料,采用HE、免疫组化EnVision法、维多利亚蓝弹力纤维染色,应用PCR法检测常见基因变异(EGFR/KRAS/ALK/ROS1/RET),分析Ⅰ期肺腺癌中不同高级别成分与临床病理特征、基因变异的相关性。结果 Ⅰ期肺腺癌785例,其中伴高级别成分者332例,不伴高级别成分者453例。伴高级别成分中1级腺癌7例,2级腺癌150例,3级腺癌175例。2级腺癌中伴2种高级别成分组的肿瘤细胞沿气腔播散、脉管侵犯和胸膜侵犯阳性率为61.5%、21.2%和26.9%,均显著高于伴1种高级别成分组(20.4%、7.1%和5.1%),在3级腺癌中伴2种及以上高级别成分组的气腔播散、脉管侵犯和胸膜侵犯阳性率差异无统计学意义。2级腺癌中伴1种高级别成分的微乳头组气腔播散阳性率(39.0%)显著高于复杂腺体组(9.3%)和实体组(0),复杂腺体组与实体组差异无统计学意义,在3级腺癌中三组之间的差异均无统计学意义。伴2种及以上高级别成分者167例,其中复杂腺体合并微乳头74例(44.3%),复杂腺体合并实体67例(40.1%),微乳头合并实体8例(4.8%),伴3种成分18例(10.8%)。复杂腺体合并实体组胸膜侵犯和KRAS基因突变或融合基因(ALK/ROS1/RET)阳性率为49.3%、28.3%,显著高于复杂腺体合并微乳头组(27.0%、8.6%)。砂砾体在高级别成分组的阳性率(24.7%)显著高于不伴高级别成分组(3.5%)(P<0.01),砂砾体在基因突变(EGFR/KRAS)组的阳性率(40.4%)高于无基因突变组(26.7%)(P<0.05)。结论 Ⅰ期肺腺癌中不同高级别成分的临床病理特征并不完全相同,其侵袭性可能有不同的生物学背景,观察形态学特征有助于诊断。

乳腺伴极性翻转的高细胞癌临床病理学特征分析

目的探讨乳腺伴极性翻转高细胞癌(tall cell carcinoma with reversed polarity,TCCRP)的临床病理学特征、诊断、鉴别诊断。方法收集4例TCCRP患者的临床资料,采用HE、免疫组化EnVision法染色、Sanger测序技术进行检测,分析其临床病理特征并复习相关文献。结果4例患者平均年龄56.5岁,以乳腺肿块或乳头溢液就诊。肿瘤最大径1.8~0.7 cm,灰白色实性结节状。镜下肿瘤细胞呈实性巢状、膨胀性浸润模式,有纤细纤维血管轴心的实性乳头样结构,高柱状、立方状肿瘤细胞呈栅栏排列,细胞核呈圆形或卵圆形,可见极性翻转的特征性表现:细胞核远离基底。免疫表型:三阴型或激素受体呈局灶弱阳性,Ki-67增殖指数低;Calretinin、GATA3、TRPS1、CK5/6、CK14等均阳性;Calponin、p63等阴性。3例IDH2免疫组化检测均阳性,Sanger检测4例均存在IDH2 R172突变。结论TCCRP属于罕见的低度恶性乳腺癌亚型;具有独特的组织学、免疫表型和分子特征,大多数患者临床病程缓慢、预后较好。

双表型肝细胞癌的临床病理分析

目的 探讨双表型肝细胞癌(DPHCC)的组织形态学特征、免疫表型、鉴别诊断要点及预后。方法 收集9例DPHCC患者的临床及病理资料,分析DPHCC组织的HE形态及免疫组织化学染色结果,并复习相关文献。结果 镜下肿瘤细胞排列成粗梁状、假腺样及团片状,间质伴丰富的血窦样腔隙,纤维间质少;肿瘤细胞呈多角形,胞浆丰富且嗜酸,核仁明显,核分裂象多见,其中3例见微血管侵犯。免疫表型:9例患者的肿瘤细胞均表达CK19,其中4例患者的肿瘤细胞同时表达CK7;9例患者的肿瘤细胞不同程度地表达一种或多种肝细胞标记物(Glypican-3、AFP、Hepatocyte-1、Arginase-1)。7例患者有完整的随访资料,其中4例患者确诊后20个月内死亡。结论 DPHCC组织形态学具有肝细胞癌特征,但免疫表型同时表达肝细胞癌及胆管细胞癌的标记物,与普通型肝细胞癌相比,其侵袭性更强,临床预后更差,准确认识并诊断DPHCC具有重要的临床意义。

甲状旁腺激素化学发光免疫分析试剂盒的开发及临床应用

目的用双抗体夹心法建立人血清甲状旁腺激素的化学发光免疫测定方法。方法反应模式为生物素化的甲状旁腺激素抗体和吖啶酯标记的甲状旁腺抗体和样本中的抗原形成“三明治”复合物,通过加入发光底物读取信号值来计算待测物浓度,并且分析解决钩状效应的方法。结果建立了人血清甲状旁腺激素的双抗体夹心化学发光免疫测定方法,所建立的方法具有良好的分析性能和热稳定性。采用四参数方程建立测定甲状旁腺激素的标准曲线。空白限为0.2 pg/mL,批内精密度为4.07%~7.17%,批间精密度为3.30%~8.91%,回收率为91%~109%。加速稳定性试验显示,试剂在37℃表现出良好的稳定性。当甲状旁腺激素浓度为40000 pg/mL时,未观察到钩状效应。用所建立的方法与贝克曼库尔特UniCel DxI 800免疫分析系统同时测试207份血清样本,进行比对分析,线性回归方程为y=0.986x+0.5594,相关系数(r^(2))为0.9739,结果具有很好的一致性。结论本研究的试剂盒检测结果与临床结果符合较好,试剂盒可以应用于临床辅助诊断。

肝脏局灶性结节性增生的临床病理分析

目的探讨肝脏局灶性结节性增生(FNH)的临床病理学特点、病因、治疗及预后。方法收集2013年5月~2017年8月我院收治的5例FNH患者的临床资料,观察其病理学形态及免疫组化染色,并结合国内外最新文献对该病变的特点进行总结分析。结果典型的FNH大体有特征性的中央瘢痕,镜下见肿块由结节状增生的肝细胞构成,结节内肝细胞呈1~2层排列,结节间由杂乱的纤维分隔,肝细胞无明显异型。不典型FNH需要与肝细胞腺瘤、肝细胞癌鉴别。结论 FNH是一种少见的良性病变,临床切除后,预后良好。

乳腺导管周围间质肿瘤临床病理观察

目的探讨乳腺导管周围间质肿瘤的临床病理学特征、鉴别诊断、治疗及预后。方法观察1例乳腺导管周围间质肿瘤的病理学形态,并结合文献对其临床特点进行总结分析。结果乳腺导管周围间质肿瘤镜下可见梭形细胞围绕单个或多个扩张的导管呈袖套状增生,并浸润于脂肪组织中形成多个结节。免疫组化:vimentin、CD34(+),CD10、CD117可以(+),SMA、desmin和S100(-)。结论乳腺导管周围间质肿瘤是一种罕见的肿瘤,应与其它肿瘤鉴别,临床上扩大切除后一般预后良好。

三阴性乳腺癌与肿瘤相关巨噬细胞

三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)因缺乏明显的标志物及有效的靶向治疗,是乳腺癌亚型中侵袭性及病死率最高的恶性肿瘤。肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)是癌症的重要组成部分,而肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)是TME中占比最高的免疫细胞。TAMs可以极化为抑制肿瘤的M1型和促进肿瘤的M2型TAMs,二者在一定条件下可以相互转化。M1型TAMs通过促进炎症和免疫反应发挥抗肿瘤活性。M2型TAMs通常表达高水平的细胞因子、生长因子和蛋白酶,支持其致癌功能。TAMs在TNBC中的作用机制正在被阐明。纳米药物载体的抗肿瘤作用可以促进M2型向M1型TAMs转化或直接靶向M2型TAMs从而杀伤癌细胞。未来靶向TAMs可能成为TNBC辅助治疗的重要策略。

ARMS法检测同一位点连续突变的病理解决方案

扩增受阻突变体系（amplification refractory mutation sys—tern，ARMS）法是分子病理检测领域发展最快的方法之一，其是建立在RT—PCR基础上的检测方法，灵敏度高。ARMS法作为RT—PCR检测方法的发展和延伸，也具有RT．PCR法的缺点，即污染对检测结果的影响。在我科日常的分子病理检测中，曾出现一起连续检测到多例同一位点发生突变的事件，在本科科主任的带领下，与临床医师、受检患者、医院主管领导、试剂生产与供货方沟通后，妥善解决一起可疑污染事件，形成一套较为完备的分子病理预警处理方案，现报道如下。

一步核酸扩增法检测早期宫颈癌前哨淋巴结转移的效果

目的评价一步核酸扩增法(one-step nucleic acid amplification,OSNA)检测早期宫颈癌前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)转移的效能及对非前哨淋巴结(nSLN)转移的预测价值。方法前瞻性纳入68例早期宫颈癌患者,收集术中SLN组织标本。所有患者均行系统盆腔淋巴结清扫。术中将每枚SLN分为2份,一份行OSNA检测,一份行快速冰冻切片(frozen section,FS)检测;术后病理检测结果作为诊断金标准。分析OSNA、FS与术后病理结果评估微转移(micrometastasis,MM)及宏转移(macrometastases,MC)的一致性,并比较评估特异度、灵敏度;比较OSNA与FS评估MC及MM的灵敏度。比较OSNA检出不同SLN阳性数患者盆腔nSLN阳性比例。结果68例患者中,共收集SLN130枚,43例检出1枚SLN、22例检出2枚SLN、3例检出2枚以上SLN,平均每例患者1.9枚SLN。术后病理检出阳性SLN 26枚(20.0%),其中13枚为MC、13枚为MM。OSNA检出阳性SLN 29枚(22.3%),其中13枚为MC、16枚为MM,4枚为假阳性;101枚OSNA阴性的SLN中,1枚术后病理检测为阳性。OSNA检测SLN转移的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值分别为96.2%、96.2%、99.0%、86.2%(P=0.375),与术后病理一致性较好(Kappa值=0.885);FS检测SLN转移的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值分别为100%、61.5%、91.2%、100%(P=0.002),与术后病理一致性一般(Kappa值=0.719)。对于MC SLN,OSNA与FS检出的灵敏度均为100%;对于MM SLN,OSNA检出灵敏度为92.3%、FS检出灵敏度为23.1%(P=0.030)。盆腔nSLN阳性患者中,OSNA检出阳性SLN>1枚患者比例高于检出1枚SLN阳性患者(77.8%vs 22.2%,P=0.041)。OSNA检出SLN阳性患者术后病理显示肿瘤细胞分化更差、增殖指数更高,且存在淋巴脉管侵犯。结论OSNA操作简便、快速,检测SLN转移的灵敏度与术后病理相近,高于FS,可用于术中判断早期宫颈癌SLN转移。

EGFR/ALK/ROS1三联检测在非小细胞肺癌中的临床意义

目的探讨EGFR-TKI敏感突变、T790M耐药突变及ALK、ROS1融合基因突变在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的活检小标本中联合检测的检出率,筛选适合的靶向药物实现晚期NSCLC的精准治疗。方法收集经皮肺穿刺、经支气管镜活检、气管镜刷片、胸水富集细胞等肺癌小标本合计40例,采用荧光定量PCR法联合检测EGFR、ALK、ROS1基因状态,并分析敏感突变患者与靶向治疗疗效的相关性。结果 NSCLC小标本中,驱动基因的总突变率为42. 5%(17/40),EGFR敏感突变为35. 0%(14/40),EGFR耐药突变Exon20 T790M 2. 5%(1/40),ALK融合基因突变5. 0%(2/40),ROS1未检测到突变。临床随访资料表明,驱动基因敏感突变患者在应用TKI治疗后,临床客观缓解率达90. 0%(9/10)。结论利用荧光定量PCR对NSCLC的小标本中EGFR/ALK/ROS1突变进行联合检测,可以用于临床指导肺癌的靶向治疗。

肺移植急性排斥反应3例报道及文献复习

目的报告3例肺移植急性排斥反应,讨论其临床病理特点及诊断方法。方法对3例肺移植后可疑急性排斥反应患者经支气管活检(TBB)标本进行光镜观察、组织化学染色、免疫组化染色和电镜观察。结果第1例左肺移植术后第9天发生1次急性排斥A2b级。第2例右肺移植第7天持续发生急性排斥A4c级,第3例左肺移植第9天、第15天发生2次急性排斥A3a级。结论TBB是诊断急性排斥的重要指标,免疫组织化学和电镜在肺移植急性排斥的诊断中无特异性,但可观察其形态改变,有助于分级。

卵巢原发性平滑肌瘤3例报道

卵巢原发性平滑肌瘤很罕见,是急性腹痛的一个很少见的原因,术前常不能确诊,易误诊为卵巢癌或阔韧带肌瘤。本文总结3例该疾病,希望能提供更多的诊断线索。

CD109在口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究白细胞分化抗原109(cluster of differentiation 109,CD109)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达并探讨其与患者临床特征及预后的关系。方法:采用实时定量PCR和免疫组织化学法检测OSCC组织中CD109 mRNA和蛋白的表达;结合临床病理资料分析CD109表达与临床特征及患者预后的关系。结果:在OSCC组织中,CD109的mRNA和蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P<0.05);CD109表达与淋巴结转移(P=0.019)、远处转移(P=0.007)和美国癌症联合委员会癌症分期(P=0.031)相关;多因素分析证实CD109表达水平是OSCC患者的独立预后因素(P<0.001);与CD109低或无表达的OSCC患者相比,CD109高表达的OSCC患者总生存期更短(P=0.004)。结论:CD109是影响患者预后的独立危险因素,可能成为判断OSCC预后的肿瘤标志物。

原发于胃的人免疫缺陷病毒阴性的浆母细胞性淋巴瘤3例报道

浆母细胞性淋巴瘤(plasmablastic lymphoma,PBL)是一种比较罕见的B细胞来源的淋巴瘤,临床表现呈高度侵袭性,属于弥漫性大B细胞淋巴瘤的亚型。肿瘤细胞形态类似B免疫母细胞,呈弥漫性增生,但免疫组化表达浆细胞相关标记,而成熟B细胞标记不表达[1]。PBL首次由学者于1997年报道[2],该报道中16例PBL患者,其中15例人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)阳性,仅1例HIV阴性,因此认为PBL与HIV感染关系密切,但是一种与HIV相关的淋巴瘤。

高分辨率T2WI联合合成双反转恢复图像判断直肠癌T分期

目的观察合成MRI(SyMRI)定量参数及高分辨率T2WI(HR-T2WI)联合合成双反转恢复(SyDIR)图用于直肠癌T分期的价值。方法回顾性分析79例经病理证实直肠腺癌,将病理T1及T2期归为肌层未突破组、T3及T4期归为肌层突破组。由2名影像科医师(分别具有低及高年资)基于HR-T2WI及联合SyDIR图行直肠癌T分期,观察其与病理结果的一致性,计算T分期诊断准确率;比较组间SyMRI定量参数值T1、T2及质子密度(PD)的差异。绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积(AUC),评估HR-T2WI及其联合SyDIR图和T2值诊断直肠癌突破肌层的效能。结果79例中,病理T分期T1期3例,T2期32例,T3期27例,T4期17例。2名医师基于HR-T2WI判断直肠癌T分期与病理结果的一致性均较强(Kappa=0.626、0.784,P均<0.001),诊断准确率分别为75.95%(60/79)及86.08%(68/79);基于HR-T2WI联合SyDIR图判断直肠癌T分期与病理结果的一致性为较强及强(Kappa=0.783、0.829,P均<0.001),诊断准确率分别为84.81%(67/79)及88.61%(70/79)。低年资医师基于HR-T2WI联合SyDIR图判断直肠癌突破肌层的AUC(0.940)高于基于单一HR-T2WI(AUC=0.843,Z=2.443,P=0.015);高年资医师基于HR-T2WI联合SyDIR图的AUC(0.954)与基于单一HR-T2WI差异无统计学意义(AUC=0.943,Z=0.366,P=0.720),后者与低年资医师基于HR-T2WI联合SyDIR图差异无统计学意义(Z=0.108,P=0.918)。2名医师所测肌层未突破组T2值均高于肌层突破组(P均<0.001),其余定量参数差异均无统计学意义(P均>0.05);根据T2值判断直肠癌突破肌层的AUC为0.812。结论SyMRI定量参数T2值对判断直肠癌T分期具有一定价值;HR-T2WI联合SyDIR图有助于提高低年资影像科医师判断直肠癌T分期的效能。

细胞周期蛋白D1、基质金属蛋白酶-9在胃癌组织中的表达水平及与幽门螺杆菌感染的相关性

目的探讨细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胃癌组织中的表达水平及与幽门螺杆菌(Hp)感染的相关性,为临床诊断与合理治疗提供参考。方法回顾性分析2018年1月至2021年1月江南大学附属医院收治的100例胃癌患者的临床资料,检测患者Hp感染的情况,采用免疫组化法检测胃癌组织中cyclinD1、MMP-9表达情况。分析Hp感染、cyclinD1、MMP-9表达与胃癌患者临床病理特征的关系,胃癌患者Hp感染与cyclinD1、MMP-9表达的相关性。结果100例胃癌患者中Hp感染70例;100例胃癌患者中cyclinD1表达阳性57例,阴性43例;MMP-9表达阳性20例,阴性80例;cyclinD1、MMP-9阴性患者中胃癌TNM临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、中高分化程度患者占比均分别显著低于cyclinD1、MMP-9阳性;与Hp感染患者比,非Hp感染患者中cyclinD1阳性、MMP-9阳性患者占比均显著降低;胃癌患者中,Hp感染与cyclinD1阳性、MMP-9阳性表达均呈正相关(r=0.462、0.571,均P<0.05)。非Hp感染患者胃癌TNM临床分期、分化程度占比均低于Hp感染患者,但经比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Hp感染性胃癌中,cyclinD1、MMP-9表达水平较高,且其与Hp感染均呈正相关,可为预后分析提供参考。

肺癌ALK、ROS1基因荧光原位杂交检测技术要点

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）技术是分子病理学检测中一种常用的方法,利用荧光素标记探针与细胞核内特定的DNA序列进行杂交,在荧光显微镜下观察结合的探针荧光信号,以检测细胞内的基因状况。该项技术在产前诊断、血液学诊断、实体瘤诊断中均发挥重要作用^（[1]）。近年来,随着肺癌靶向药物治疗的发展,肺癌靶向基因检测位点也在不断增加。

基于FFPE组织切片的膀胱癌N-连接糖链原位酶解及分析

目的研究膀胱癌FFPE组织切片的N-连接糖链,发现膀胱癌FFPE肿瘤组织的异常N-连接糖链修饰情况。方法发展基于FFPE组织切片原位提取N-连接糖链的实验流程。通过PNGase F酶切FFPE组织解释放N-连接糖链。对N-连接糖链自由端进行全甲基化修饰。通过MALDI-TOF/TOF-MS检测N-连接糖链的相对含量。进行数据库匹配,确定N-连接糖链的可能糖型。ROC分析用于预测显著差异N-连接糖链作为预测膀胱癌生物标志物的准确度。结果MALDI-TOF/TOF-MS检测泛甲基化修饰N-连接糖链的数据显示,在16例膀胱癌患者的肿瘤和癌旁组织的3次重复实验中,肿瘤组织中蛋白质高甘露糖型N2H6、N2H7、N2H8、N2H9和复杂型N5H6F1糖链修饰水平显著上升,同时高甘露糖型N2H5、杂合型N3H5以及复杂型N3H4、N4H4、N5H6F1S2糖链修饰水平显著下降。ROC分析显示,双天线型N-连接糖链N3H4(AUC=0.90)和N4H4(AUC=0.91)在单独或者共同区分膀胱癌患者肿瘤组织和癌旁组织中都具有很好的可靠性,可能成为膀胱癌的潜在生物标志物。结论膀胱癌FFPE肿瘤组织中存在蛋白质异常N-糖基化修饰,N-连接糖链N3H4和N4H4或可成为膀胱癌的潜在生物标志物。

表皮生长因子受体19号外显子非经典突变肺腺癌1例

患者女性,65岁,无吸烟史,2016年3月出现咳嗽、咳痰。胸部CT示:右肺上叶见一大小3.8 cm×3.1 cm的团片样高密度影,病灶边缘欠清,其周围可见斑片样模糊影,其内可见扩张扭曲的支气管影,邻近胸膜局限性不均匀增厚。患者靶向治疗前:右肺下叶背段支气管截断术术后改变,两肺多发小结节及环状高密度影,考虑肿瘤转移。靶向治疗后:两肺小结节及环状高密度影较前减少(图1)。予抗炎、补液、止血等对症处理后,症状减轻。患者于2016年5月11日在全麻下行右上肺癌根治术,术中查见胸腔少许粘连,右上肺后段肿瘤大小5 cm×6 cm×7 cm,质硬,与中叶粘连。

颅枕部甲状腺病变1例

患者女性,91岁,因右侧枕部包块入院。自述4年前发现右侧枕部包块,约黄豆大小,无明显不适症状,后包块逐渐增大至鸡蛋大小,偶有疼痛,约14年前在外院有良性甲状腺切除史,病理结果不详。MIR示:右侧枕部见椭圆形等T1、等T2信号,内见点状及条状短T1、长T2信号病灶,大小5.8 cm×2.8 cm,边界清晰,向外生长(图1),局部颅骨内外板及板障压迫吸收,考虑嗜酸性肉芽肿伴少量出血可能性大。