七氟烷对胶质瘤U87细胞侵袭能力的影响及机制研究

目的探讨七氟烷对U87细胞侵袭能力的影响及机制。方法于2022年9月—2023年6月,采用徐州医科大学麻醉学实验室提供的U87细胞培养至对数生长期。Transwell实验取对数生长期细胞分成8份,然后随机分为对照(Con)组和七氟烷(Sev)组,每组4份进行平行实验。培养的细胞置于麻醉箱内,七氟烷组通载体气体和1.4%七氟烷4 h,对照组只通载体气体,观察七氟烷对U87细胞侵袭能力的影响;免疫印迹实验取对数生长期细胞分成12份,然后随机分为对照组,七氟烷2 h组和七氟烷4 h组,每组4份进行平行实验,观察七氟烷对pERK1/2、ERK1/2表达水平的影响;细胞免疫荧光化学实验取对数生长期细胞分成8份,然后随机分为对照组和七氟烷组(4 h),每组4份进行平行实验,检测七氟烷对pERK1/2、Nrf2在细胞分布的影响。结果与对照组相比,七氟烷组U87细胞穿过微孔膜的数目减少[Con组(100.000±0.000)%,Sev组(34.180±3.342)%],差异有统计学意义(t=16.697,P<0.05)。与对照组相比,七氟烷组pERK1/2的灰度值下降[Con组(100.000±0.000)%,Sev2 h组(0.196±0.028)%,Sev4 h组(0.073±0.025)%],差异有统计学意义(F=546.886,P<0.05),且核内pERK1/2[Con组(21.903±1.776)%,Sev组(8.412±0.367)%]及核内Nrf2表达水平均显著下降[Con组(18.083±0.788)%,Sev组(12.315±1.604)%],差异有统计学意义(t=7.438、3.228,P均<0.05)。结论七氟烷通过抑制ERK1/2-Nrf2信号通路抑制人胶质细胞瘤U87侵袭能力。

异氟烷抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取

本文探讨了异氟烷对星形胶质细胞葡萄糖摄取的影响,应用培养的大鼠星形胶质细胞,通过免疫荧光观察异氟烷对星形胶质细胞结构的影响;利用6-NBDG检测异氟烷对星形胶质细胞葡萄糖吸收影响;通过RT-PCR和免疫印迹检测葡萄糖转运体的变化。与对照组相比,异氟烷诱导GFAP向细胞膜处聚集,抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取及GLuT1的表达。异氟烷可以通过抑制星形胶质细胞葡萄糖转运体的表达,抑制葡萄糖摄取。

异氟烷短期内可逆的抑制星形胶质细胞葡萄糖摄取

本文主要探讨了异氟烷处理后复灌对星形胶质细胞葡萄糖吸收的影响。利用培养的大鼠星形胶质细胞,2%异氟烷孵育6h,分别复灌24h、48h、72h,观察星形胶质细胞的形态;利用CCK-8试剂盒检测星形胶质细胞活性;加入荧光标记6-NBDG,观察星形胶质细胞葡萄糖吸收的变化;运用RT-PCR检测葡萄糖转运体GLuT1的变化。实验结果表明,异氟烷处理后复灌的星形胶质细胞形态无明显差别,细胞活性均不受影响;复灌24h葡萄糖摄取受抑制,48h恢复;复灌24h的GLuT1 mRNA水平降低,48h恢复;异氟烷可抑制星形胶质细胞葡萄糖转运体的表达并导致葡萄糖摄取障碍,但在短期可逆转。

椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉对单侧肺大泡切除术的免疫影响

目的:探索胸椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉对胸腔镜下单侧肺大泡切除术的免疫功能影响。方法:选取60例择期行经胸腔镜单侧肺大泡切除术的患者,随机分为研究组(n=30)和对照组(n=30)。研究组采用胸椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉法,对照组采用双腔管全身麻醉法,记录两组丙泊酚、瑞芬太尼用药量、麻醉复苏时间,术后按压止痛泵次数;记录术前(T_(0))、术毕(T_(1))、术后24 h(T_(2))、术后48 h(T_(3))的IL-6,IL-10,CD_(4)^(+)、CD_(8)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)。结果:研究组丙泊酚用量、瑞芬太尼用量、止痛泵按压次数比对照组减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。研究组IL-6、IL-10在T_(1)、T_(2)时间点的测量值均较对照组减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组患者T_(1)、T_(2)、T_(3)时间点的CD_(4)^(+)及CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)值均较术前降低,但研究组的术毕、术后24 h的CD_(4)^(+)值较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组T_(1)、T_(2)、T_(3)时间点CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)较对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胸椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉对胸腔镜下单侧肺大泡切除患者免疫功能的抑制程度小于双腔管全身静脉麻醉。

吗啡联合加巴喷丁对术后持续性痛大鼠脊髓小胶质细胞的影响

目的:观察鞘内注射吗啡联合加巴喷丁对皮肤/肌肉切口和牵拉(skin/muscle incision and retraction,SMIR)术后持续性痛大鼠脊髓背角小胶质细胞活化的影响。方法:选择鞘内置管成功的雄性SD大鼠120只,随机分为5组(n=24):假手术组、术后持续性痛组、吗啡组、加巴喷丁组和吗啡联合加巴喷丁组。按Flatters法制作大鼠SMIR术后持续性痛模型;应用机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)评定大鼠的疼痛行为学;应用免疫荧光技术检测脊髓背角活化的小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子-1(ionized calcium bindingadaptor molecule-1,Iba-1)的表达。结果:与假手术组比较,术后持续性痛组的MWT在术后第3 d、7 d、12 d、22 d明显下降(P<0.05),脊髓背角Iba-1表达在术后第3 d、7 d明显增加(P<0.05);与术后持续性痛组比较,吗啡组和加巴喷丁组的MWT和脊髓背角Iba-1的表达无明显变化;与术后持续性痛,吗啡组和加巴喷丁组比较,吗啡联合加巴喷丁组的MWT在术后第3 d、7 d、12 d、22 d明显增加(P<0.05),脊髓背角Iba-1表达在术后第3 d、7 d明显减少(P<0.05)。结论:吗啡联合加巴喷丁对大鼠SMIR术后持续性痛有镇痛作用,可能与抑制脊髓背角小胶质细胞的活化有关。

成年哺乳动物海马齿状回神经发生的研究进展

神经干细胞（NSCs）在一定条件下可增殖分化成神经元和神经胶质细胞，参与神经功能的修复过程，称之为神经发生。传统观念认为，神经发生主要存在于胚胎期。近年研究发现，成年哺乳动物的中枢神经系统也存在神经发生，生理状态下神经发生较少，而病理状态下神经发生较多。这为临床上神经损伤的修复提供了理论依据。现将成年哺乳动物海马齿状回神经发生的研究进展综述如下。

七氟醚预处理通过改善心肌Cx43侧面化减轻缺血／再灌注性心律失常

目的探讨缝隙连接蛋白43（Cx43）侧面化在七氟醚预处理减轻离体大鼠心脏心肌缺血／再灌注性心律失常方面的作用。方法雄性Wistar大鼠24只，随机分为3组（n=8）：对照组（c组）、缺血／再灌注组（IR组）、3％七氟醚预处理组（SP组）。采用Langendorff灌注装置进行离体心脏灌注：C组持续灌注90min；IR组平衡30min，缺血30min，再灌注30min；SP组平衡10min，3％七氟醚预处理15min，洗脱5min，缺血30min，再灌注30min。记录各组的心电图，并于再灌注结束后取左心室游离壁通过免疫荧光观察Cx43的侧面化情况。结果与IR组相比，sP组的期前收缩次数明显减少（P〈0．05），室性心动过速和心室纤颤的时程明显缩短（P〈0．05），心室纤颤发生率降低（P〈0．05），心律失常评分降低（P〈0．05）。Cx43的侧面化情况sP组明显优于IR组（P〈0．05）。结论七氟醚能有效减轻缺血／再灌注性心律失常的发生，其机制可能与改善Cx43的侧面化程度有关。

椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉在单侧肺大泡切除术的应用

目的研究椎旁神经阻滞联合喉罩全麻应用于保留自主呼吸单侧肺大泡切除术的安全性及可行性。方法选取2017年1-12月中山大学附属佛山市第一人民医院60例行经胸腔镜单侧肺大泡切除术的患者,用随机数字表将患者分为S组(n=30)和H组(n=30)。S组采用双腔管插管的全身麻醉方法,H组采用椎旁神经阻滞+喉罩全身麻醉保留自主呼吸麻醉方法。两组术后均采用舒芬太尼2μg/kg,加生理盐水稀释到100mL,背景输注速率为2mL/h,锁定时间为15min。结果两组患者的一般情况、手术时间、肺萎陷评分差异无统计学意义(P>0.05);S组与H组拔管后5min的血压分别为(90±9)、(78±14)mm Hg;术后复苏时间分别为(15.5±4.3)、(7.3±3.4)min;术后6h视觉模拟评分(VAS)分别为(5.1±0.8)、(2.4±0.8)分;丙泊酚用量分别为(690±10)、(565±15)mg,以上指标两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。H组肺萎陷后15min及拔除喉罩后5min的平均动脉血二氧化碳分压值分别为(60±8)、(42±4)mm Hg。结论椎旁神经阻滞联合喉罩全身麻醉保留自主呼吸的麻醉方法对单侧肺大泡切除术具有麻醉血流动力学平稳,术后复苏快,麻醉药物用量少等优点。

CaMKⅡ与左西孟旦抗心肌缺血再灌注致大鼠心律失常作用的关系：离体实验

目的评价心肌钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）与左西孟旦抗心肌缺血再灌注致大鼠心律失常作用的关系。方法健康成年雄性Wistar大鼠30只，体重250～300g，采用随机数字表法，将其分为3组（n=10）：对照组（C组）、缺血再灌注组（I／R组）和左西孟旦组（L组）。采用Langendorff灌注装置建立离体心脏灌注模型。平衡灌注20rain后，C组用K．H液继续灌注60min；I／R组缺血30min后，K-H液灌注30min；L组缺血30min后，用含左西孟旦300nmol／L的K-H液灌注30min。分别于缺血前即刻、再灌注15和30min时记录左心室发展压（LVDP）、左心室舒张末压（LVEDP）、左心室内压最大上升速率（＋dp／dtmax）、左心室内压最大下降速率（-dp／dtmax）和心率（HR）。记录再灌注期间心律失常的发生情况，并进行评分。于再灌注30min时取心尖部组织，测定细胞内钙离子浓度（[ca2＋]i），取左心室心肌组织，测定CaMKll的活性。结果与C组比较，I／R组心律失常评分、[Ca2＋]i和CaMKU活性升高，再灌注15和30min时LVDP、＋dp／dtmax、-dp／dtmax和HR降低，LVEDP升高（P〈0．05）；与I／R组比较，L组室性早搏数量、心律失常评分、[Ca2＋]i和CaMK11活性降低，再灌注15和30min时LVDP、＋dp／dtmax、-dp／dtmax和HR升高，LVEDP降低（P〈0．05）。结论左西孟旦降低心肌缺血再灌注致大鼠心律失常的机制与抑制CaMKlI活性有关。

基于RNA高通量测序研究右美托咪定对人神经母细胞瘤细胞基因表达的影响

目的 分析右美托咪定对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞表达谱差异的影响,探讨右美托咪定在脑保护中的潜在机制。方法 培养SH-SY5Y细胞,分为实验组(T组,生物学重复n=3)和对照组(C组,生物学重复n=3)。实验组用右美托咪定刺激48 h,对照组相同条件下用DMSO处理。使用Trizol提取RNA,在Illumina Novaseq平台进行RNA测序。采用Limma分析实验组与对照组的差异基因,并对差异基因进行基因本体(GO)富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果 T组与C组相比,共有211个差异表达基因(上调105个,下调106个)。其中FGF1、GNG13、P2RY4在实验组和对照组中表达差异明显,差异倍数分别为2.23、2.00和6.56。GO富集分析示差异基因主要富集于磷脂酶C活化的G蛋白偶联受体信号通路、蛋白激酶B信号的调控、BMP信号通路。KEGG通路富集分析示差异基因主要富集于白细胞跨内皮迁移。结论 FGF1、GNG13、P2RY4等基因可能参与右美托咪定对脑的保护作用。右美托咪定可能主要通过炎症机制参与对中枢神经系统的保护。

脊髓NF—κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用

目的评价脊髓NF-κB信号通路在大鼠持续性术后痛中的作用。方法选择鞘内置管成功的成年雄性SD大鼠90只，体重200—250g，采用随机数字表法，将其随机分为3组（n=30）：假手术组（S组）、持续性术后痛组（SMIR组）和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐组（PDTC组）。SMIR组和PDTC组采用皮肤／肌肉切口牵拉法制备大鼠持续性术后痛模型；S组仅分离暴露肌肉，未牵拉。术后1d时开始，PDTC组于30s内鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC10ng，S组和SMIR组鞘内注射等容量生理盐水，1次／d，连续7d。于术前1d（T0）、术后1d（T1）、3d（T2）、7d（T3）、12d（T4）和22d（T5）时，测定机械缩足反应阈值（MWT）；各时点MWT测定结束后，随机取5只大鼠，断头处死后取脊髓组织，采用ELISA法测定TNF-α含量。结果与S组比较，T1-5，时SMIR组MWT降低，T2时PDTC组MWT降低，T3-5时SMIR组和PDTC组脊髓TNF-α含量升高（P〈0．05或0．01）；与SMIR组比较，T2-5，时PDTC组MWT升高，T3,4时脊髓TNF-α含量降低（P〈0．05或0．01）。结论脊髓NF-κB信号通路参与了大鼠持续性术后痛的发生发展。

钙/钙调蛋白依赖的钙调蛋白激酶Ⅱ磷酸化目的蛋白对再灌注心律失常的影响

背景 虽然恢复冠状动脉血流是挽救缺血心肌的重要措施,但是再灌注本身可以导致再灌注心律失常的发生,它与细胞内钙超载密切相关,钙/钙调蛋白依赖的钙调蛋白激酶Ⅱ（calcium/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ）是一种重要的丝/苏氨酸蛋白激酶,活化的CaMKⅡ通过多种方式调节胞内Ca2＋的浓度. 目的 探讨CaMKⅡ的结构、功能及CaMKⅡ磷酸化目的蛋白对再灌注心律失常的影响. 内容 CaMKⅡ可能是再灌注早期发生心律失常的重要信号分子,CaMKⅡ功能异常导致钙稳态失衡,是再灌注心律失常的重要原因. 趋向 在缺血/再灌注的过程中选择合适的药物减轻钙超载,进而调节CaMKⅡ磷酸化目的蛋白的过程可能是未来治疗再灌注心律失常的重要靶点.