病原生物学网络课程的设计与构建

介绍了病原生物学网络课程的设计思路及构建情况，以人体寄生虫学规划教材为依据进行制作，主要包括基本信息、课程学习、交互工具、作业考试、效果分析及相关资源等模块，并阐述了网络课程在现代教学中的重要意义。

碳纳米管在生物医药领域的应用及其安全性

碳纳米管包括单壁碳纳米管和多壁碳纳米管,是目前最有应用前景的纳米材料之一。作为载体,其具有的独特中空结构和纳米管径,可运送生物活性分子及药物进入细胞或组织。作为一种新型生物材料,能促进骨组织修复生长、神经再生,减少神经组织瘢痕产生。然而,碳纳米管对人体也有一定的毒性作用,目前研究主要集中在肺脏毒性和细胞毒性,表现为可引起肺脏炎症、肉芽肿和细胞凋亡、活力下降、细胞周期改变等。其毒力大小与碳纳米管的特性有关,如结构、长度、表面积、制备方法、浓度、剂量等,毒性作用机制可能与氧化应激有关。

大劣按蚊感染约氏疟原虫defensins基因的克隆及生物信息学分析

目的为探讨大劣按蚊对约氏疟原虫侵入的免疫反应,克隆大劣按蚊的抗菌肽defensins基因并对基因序列进行生物信息学分析。方法分别提取感染疟原虫的大劣按蚊的蚊胃总RNA,根据冈比亚按蚊defensins基因设计、合成简并引物,进行RT-PCR扩增目的片段,TA克隆后测序并进行序列分析。结果用简并引物的RT-PCR扩增出约氏疟原虫感染的大劣按蚊的189bp目的片段,序列分析表明与冈比亚按蚊defensins有87%同源性,与白蚊伊蚊defensinsD有88%同源性,为大劣按蚊的defensins基因。结论成功克隆并分析了大劣按蚊抗菌肽defensins基因,为进一步的重组表达和研究按蚊抗菌肽的生物活性奠定基础。

原位杂交检测斯氏肺吸虫童虫半胱氨酸蛋白酶的基因表达部位

目的—从基因水平研究半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达,并进行虫体定位。方法—利用地高辛标记原位杂交技术检测半胱氨酸蛋白酶基因在斯氏肺吸虫童虫的表达并定位。结果—在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中呈强阳性着色,在虫体皮层细胞中有弱阳性着色。结论—半胱氨酸蛋白酶主要在斯氏肺吸虫童虫的肠管上皮细胞中表达,在虫体皮层细胞中也有弱表达。

病原生物学课程教学中创新教育的实施和探索

基础医学是医学教育的重要组成部分，而创新教育已成为现代医学教育的特征。从军校医学教育理念、教学模式、培养目标及能力训练等创新思维和素质培养环节人手，在病原生物学教学中，对调动学生的学习积极性和主动性、培养学生的创新思维和能力进行探讨与实践。

蛋白质药品的真空冷冻干燥技术及研究进展

目的介绍真空冷冻干燥技术制备蛋白质药品的方法。方法查阅国内外近年来有关文献,综述了真空冷冻干燥原理、蛋白质药品的冻干工艺及药品贮存期间影响其活性的各个因素。结果真空冷冻干燥过程中可引起蛋白质药品不同程度的变性,加入保护剂可增加其稳定性。结论冷冻干燥时,不同的蛋白质药品需加入不同的保护剂。

脑出血后细胞凋亡和Caspase-3的关系

目的 :研究脑出血后血肿周围水肿带细胞凋亡随出血时相点的变化规律 ,以及脑出血后神经细胞凋亡和Caspase 3的关系 ,为脑出血的治疗提供理论依据 .方法 :健康雄性Wistar大鼠随机分为生理盐水对照组、Ⅳ型胶原酶 /肝素钠组 ,分为术后 6h ,1 2h ,2 4h ,3d ,7d共 5个时相点 .术后制作冰冻切片 ,对切片进行TUNEL染色 ,以及Caspase 3免疫组化和原位杂交染色 ,之后利用图像分析仪 ,观察阳性细胞数 .结果 :脑出血后 6h后血肿周围出现TUNEL阳性细胞 ,3d左右TUNEL阳性细胞范围最广 .Caspase 3的表达和细胞凋亡的变化趋势一致 .结论 :脑出血后存在细胞凋亡 ,且细胞凋亡和Caspase 3表达变化趋势一致 ,提示Caspase

按蚊TEP1基因与硝喹诱导疟原虫卵囊黑化反应的相关性

目的对斯氏按蚊TEP1基因与抗疟药硝喹诱导约氏疟原虫卵囊黑化反应的相关性进行初步研究。方法斯氏按蚊吸血感染约氏疟原虫后,随机分为两组(各300只),A组喂饲含0.1%硝喹蔗糖水,B组喂饲10%蔗糖水。另设正常对照组(C组),常规蔗糖水饲养。分别于用药后第1、2、3和4天,取各组雌蚊的血淋巴(各50只),提取cDNA模板,设计引物,克隆斯氏按蚊TEP1基因,用荧光定量PCR检测TEP1基因在抗疟药硝喹诱导下的变化;同时解剖各组雌蚊(各25只),光镜观察约氏疟原虫卵囊的黑化情况,分析TEP1基因与抗疟药诱导的黑化反应的关系。结果成功克隆TEP1基因,推测其氨基酸序列含有TEP分子高度保守的硫酯序列区(GCGEQ)。荧光定量PCR检测结果显示,抗疟药硝喹可诱导斯氏按蚊TEP1基因表达上调,于诱导后第3天,A组的TEP1基因相对表达量为2.423,是B组(1.036)的2.5倍,两者差异有统计学意义(P<0.05)。相同时点,光镜观察显示,A组蚊经硝喹诱导后的约氏疟原虫卵囊出现黑化现象,黑化率约14.0%,而B组则未发现有黑化现象。结论抗疟药物硝喹可诱导斯氏按蚊TEP1基因上调,该基因与约氏疟原虫卵囊黑化相关。

血吸虫病免疫病理研究进展

血吸虫病主要病理变化是宿主肝组织内虫卵的沉积诱发虫卵肉芽肿及其后的纤维化病变。在动物模型的相关研究已显示Th1细胞主要参与血吸虫虫体抗原的免疫调节反应,而虫卵衍生抗原主要介导Th2细胞免疫反应。研究证明Th1细胞、Th2细胞、巨噬细胞、Treg细胞和IL-17分泌型淋巴细胞对调节虫卵肉芽肿反应和肝脏的纤维化过程起重要作用。

主动入侵的疟原虫子孢子通过CSP蛋白诱导DC成熟

目的观察约氏疟原虫子孢子能否诱导DC成熟,并探讨其机制。方法GM-CSF常规诱导小鼠骨髓前体细胞,获得足量的DC,然后,解剖按蚊唾液腺子孢子与DC共培养,分别于2、4和24 h后,荧光显微镜下观察子孢子与DC的相互关系,同时采用流式细胞分析技术检测DC表面的MHC-Ⅱ类分子、CD80和CD86共刺激分子的表达情况,最后转染重组pFLAG-CMV8-CSP质粒后24 h,检测DC表面的共刺激分子的表达情况。结果在共培养后2h,子孢子便逐渐向DC迁移甚至黏附于DC表面;4 h后部分子孢子便进入DC且仍然保持子孢子的弯月形形态;24 h后DC内的部分子孢子逐渐变圆,类似肝期裂殖体的形态。流式检测发现共培养2 h后对DC共刺激分子表达无明显影响,而共培养4 h和24 h后DC共刺激分子的表达均上调。转染pFLAG-CMV8-CSP重组质粒至DC中后同样能诱导DC的共刺激分子的表达上调。结论在体外共培养的情况下,大部分子孢子可以主动侵入DC而少部分可以被DC吞噬,主动入侵DC的子孢子可能是通过其表面的CSP由纳虫空泡进入胞浆内后诱导DC成熟。

大劣按蚊丝氨酸蛋白酶cDNA克隆和表达

目的 克隆、表达大劣按蚊丝氨酸蛋白酶。方法 根据已报道昆虫的前酚氧化酶激活酶 (prophenoloxidase -acti vatingenzyme,PPAE)的保守氨基酸序列设计简并引物 ,以大劣按蚊血细胞mRNA为模板 ,进行RT -PCR扩增 ,克隆和测定插入片段 ;所得序列进行BLAST查询 ,并原核表达其中的两种PPAE样丝氨酸蛋白酶cDNA ,通过SDS -PAGE和Westernblotting检测表达产物。结果和结论 获得了 3种大劣按蚊血细胞丝氨酸蛋白酶cDNA部分序列 ,即AdsP1(5 12bp) ,AdsP2(488bp)和AdsP3(5 12bp)。AdsP1和AdsP3与冈比亚按蚊sP14D1、sP14D2、3种昆虫PPAE和黑腹果蝇Easter很相似 ,推测AdsP1和AdsP3可能是大劣按蚊的PPAE ,起调节大劣按蚊黑化包裹约氏疟原虫反应的作用。另外 ,成功表达了AdsP1和Ad sP3部分cDNA序列。

脂质体经皮给药研究进展

目的 :分析总结近年来国外脂质体经皮或黏膜给药研究的特点和应用进展。方法 :对近年来脂质体药物特点 ,主要对在皮肤疾病和美容方面 ,对局部伤口的治疗 ,在皮肤损伤和保护中的应用 ,在眼科疾病中的应用进行综述。结果与结论 :脂质体是一种很好的定向药物载体 。