Sprague-Dawley大鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的代谢组学研究

目的系统分析急性肾损伤动物模型体内代谢产物,以评估代谢组学能否早期发现急性肾损伤,进一步寻找新的诊断生物标记物及治疗方法。方法建立肾脏急性缺血再灌注损伤动物模型,收集不同时间点的动物血清,利用高分辨率液相色谱/四级杆-飞行时间-质谱串联的方法对动物血清标本进行代谢产物的分析。结果术后4 h手术组大鼠的血清肌酐、尿素氮显著高于假手术组(P值均<0.01)。代谢组学能在2～72 h各时间点区分手术组与假手术组。差异代谢产物主要有卡尼汀及其衍生物和磷脂酰胆碱分解代谢产物两类,卡尼汀及短链脂酰卡尼汀在缺血再灌注损伤模型血清中含量降低,而后一类物质的血清浓度则有不同程度的升高。结论代谢组学能够早于血清肌酐、尿素氮的变化而发现肾脏损伤,可用于急性肾损伤的早期诊断。

TGF-β/Smads通路与肾脏纤维化研究进展

肾脏纤维化是慢性肾脏病的共同病理过程,是造成肾衰竭的主要原因之一,以间质成纤维细胞增殖、细胞外基质（ECM）过量沉积、肾小管萎缩等为特征[1].肾脏纤维化是一个多因素参与的复杂过程,包括转化生长因子、细胞分泌因子、氧化应激、炎症刺激等,大量的研究证明转化生长因子β1（TGF-β1）是促进肾脏纤维化的最关键因子[2].

慢性肾脏病患者动脉弹性功能相关因素分析

目的:探讨慢性肾脏病(CKD)患者动脉弹性功能指标变化规律,并对其相关因素进行分析,为临床预防和治疗慢性肾脏病患者的心血管并发症提供理论依据。方法:选择92例CKD患者为研究对象,采用标准袖带水银血压计测量非动静脉内瘘侧上臂坐位血压,动脉脉搏波分析仪(SphygmoCor px)检测动脉弹性指数脉搏波速度(PWV)和压力反射波增强指数(AIx),临床检验测定患者各项指标,提取临床病史资料,对患者AIx及PWV与临床各项检查检验指标分别进行单因素相关分析和多元逐步回归分析。结果:(1)Pearson相关分析显示:CKD患者AIx与PWV、年龄、收缩压和舒张压呈正相关,而与身高、体重、红细胞压积、血红蛋白、胆固醇(TC)和肾小球滤过率(GFR)呈负相关;PWV与AIx、年龄、收缩压和病程(月)均呈正相关(P<0.05)。(2)Spearman秩相关分析显示:AIx与心血管病病史及降压药种数呈正相关;PWV与心血管病病史、糖尿病史和降压药种数呈正相关(P<0.05)。(3)多元逐步回归分析显示:年龄、心率、收缩压和心血管病史、身高和体重是影响CKD患者AIx的独立决定因素;而年龄、收缩压和糖尿病是影响患者PWV的独立决定因素(P<0.05)。结论:(1)CKD患者的年龄、收缩压和心血管病史、身高和体重是CKD患者AIx的重要影响因素;而年龄、收缩压和糖尿病是影响患者PWV的独立决定因素。(2)GFR与动脉弹性功能有一定的关联性,传统的致血管硬化因素仍是主要因素。

五酯胶囊对特发性膜性肾病患者环孢素A全血浓度的影响研究

目的了解五酯胶囊对特发性膜性肾病(idiopathic membranous nephropathy,IMN)患者环孢素A(cyclosporine A,CsA)全血浓度的影响,探讨其临床应用意义。方法于2013年1月—2014年3月,选取在第二军医大学附属长征医院肾内科确诊并常规随访治疗的IMN患者48例。按随机数字表法,将其分为对照组27例和试验组21例。对照组采用口服CsA和泼尼松治疗;试验组在对照组治疗的基础上,口服五酯胶囊。比较2组患者治疗前、治疗3个月后及治疗6个月后的尿蛋白定量、血清蛋白(ALB)及肝肾功能;记录并比较2组患者治疗1周后、治疗1个月后及治疗3个月后的CsA全血浓度和CsA给药剂量;评价并比较2组患者的临床治疗效果。结果 (1)治疗前、治疗3个月后及治疗6个月后,2组患者尿蛋白定量、ALB、血肌酐(SCr)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及天冬氨酸氨基转移酶(AST)比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗3个月后和治疗6个月后,2组患者尿蛋白定量和ALB与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05);SCr、ALT及AST与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)根据患者CsA全血浓度调整其给药剂量,治疗1个月后和治疗3个月后,试验组达到治疗窗CsA全血浓度时的给药剂量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)2组患者的临床治疗有效率分别为70.3%(19/27)和71.4%(15/21),差异无统计学意义(χ2=0.01,P>0.05)。结论五酯胶囊可以提高IMN患者的CsA全血浓度,减少患者CsA给药剂量。

慢性肾脏病患者蛋白质能量消耗的预防和治疗

慢性肾脏病（ CKD）患者特别是终末期肾衰竭（ ESRD）、维持性透析患者存在多种营养不良和代谢紊乱，被称之为蛋白质能量消耗（PEW）[1]，多项研究表明PEW影响患者预后，导致住院率和死亡率增加[2]。因此，蛋白质能量消耗的预防和治疗尤为重要，本文针对CKD 3-5期和维持性透析患者蛋白质能量消耗的预防和治疗策略进行综述。

多囊蛋白-1在肾透明细胞癌及常染色体显性多囊肾病患者体液中含量的比较研究

目的比较多囊蛋白-1在肾透明细胞癌、常染色体显性遗传多囊肾病患者及正常人体液中的含量。方法随机选择在本院就诊的肾透明细胞癌患者20例、常染色体显性多囊肾病患者20例及正常健康查体者15例,留取血液及尿液标本各1份。以本实验室制备的鼠源抗多囊蛋白-1单克隆抗体为捕获抗体,以兔源抗多囊蛋白-1多克隆抗体为检测抗体,采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测体液中多囊蛋白-1的含量。结果肾透明细胞癌患者血液中多囊蛋白-1含量为(53.613±8.697)μg/L,显著高于多囊肾病患者血液中含量(6.745±3.215)μg/L(P<0.01)及正常人血液中含量(20.386±14.234)ng/ml(P<0.01)。肾透明细胞癌患者尿液中多囊蛋白-1含量为(10.228±7.989)μg/L,显著低于多囊肾病患者尿液中含量(48.268±16.452)ng/ml(P<0.01),与正常人尿液中含量(10.083±8.941)μg/L比较无统计学差异。结论多囊蛋白-1属于一个新的跨膜蛋白家族,在肾透明细胞癌患者血液中表达增加,而在多囊肾患者血液中表达减少,为进一步揭示多囊蛋白-1的功能提供实验室依据。

酪氨酸激酶抑制剂对多囊肾病PPARγ的影响研究

目的:观察EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)对多囊肾PPARγ的蛋白表达和活性影响,探讨TKI和PPARγ激动剂合并用药治疗多囊肾病的理论依据。方法:免疫组化比对TKI治疗、未治疗与正常表现型Han:SPRD大鼠肾组织中PPARγ蛋白的表达及其磷酸化程度差异。WesternBlot分析不同药物作用MDCK细胞24h后,PPARγ的表达差异。双荧光素酶检测系统检测经TKI干预后PPARγ相对活性的变化。结果:PPARγ在多囊肾较正常表现型大鼠肾组织高表达(0.9175±0.0465,0.0809±0.0762),TKI治疗2月显著增强其表达(1.3313±0.0233),但磷酸化PPARγ依次呈降低趋势。TKI(2μmol/L)作用MDCK细胞,与空白组比,显著增加PPARγ表达(1.0889±0.0544,1.069±0.0534),并随作用时间延长蛋白表达增加。PPARγ活性也随TKI作用时间延长至24h和浓度加大到2μmol/L渐增强,均具有统计学意义。结论:多囊肾病肾组织以及MDCK细胞内,TKI能够增强PPARγ的蛋白表达和活性,且具有时间、浓度依赖性,TKI合用PPARγ激动剂治疗多囊肾病可能增强疗效。

慢性肾病对老年慢性心力衰竭患者地高辛治疗的影响研究

目的探讨慢性肾病(CKD)对老年慢性心力衰竭(CHF)患者地高辛治疗的影响,以及监测血清地高辛浓度的临床意义。方法我院2007年1月—2009年6月收治的100例CHF伴CKD应用地高辛治疗的老年患者,按肾脏病生存质量指导(K-DOQI)的标准分为4个组(CKDⅠ～Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期和Ⅴ期),观察CKD分期和地高辛不良反应与地高辛浓度间的关系。结果 4组血药浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4组心率减慢、心律失常、胃肠道反应、中枢神经系统的不良反应发生率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CHF伴CKD的患者应用地高辛前有必要评估肾功能;CKDⅢ期和Ⅳ期的老年CHF患者服用地高辛必须监测血药浓度;而CKDⅤ期的老年CHF患者应用地高辛治疗必须谨慎,即使监测血清地高辛浓度也难以避免不良反应,需密切观察临床表现,并进行个体化治疗。

镧示踪法透射电镜显示肾脏细胞糖萼的方法学研究

目的不同方案灌注小鼠后电镜观察肾脏各种细胞糖萼的显示情况，探讨镧示踪法显示肾脏细胞糖萼的最佳方法。方法根据灌注方案的不同，将C57／BL6小鼠分为3组：①生理盐水组：小鼠放血后，用生理盐水5ml自主动脉灌注，取。肾脏后用2％硝酸镧一戊二醛固定液固定；②硝酸镧固定液组：用2％硝酸镧一戊二醛固定液5ml相同方法灌注，取肾脏后固定方法同前；③硝酸镧溶液组：用2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液5ml先后进行灌注，取。刖拄，f舌固定方法同前。各组均应用透射电镜观察肾脏的肾间质血管内皮细胞、。肾小球内皮细胞、足细胞和肾间质细胞连接的糖萼的显示情况，计算各组不同肾脏细胞糖萼的显示率，并进行比较。结果镧示踪法透射电镜显示的小鼠肾脏细胞的正常糖萼表现为附着于细胞表面的一层电子致密物层。生理盐水组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼层的显示率均为0％；足细胞糖萼的显示率为20％；肾间质细胞连接的糖萼显示率（92％）较高。硝酸镧固定液组的肾间质血管内皮细胞和肾小球内皮细胞显示率较低（分别为16％和12％）；足细胞糖萼和细胞连接的糖萼层显示率相对较高（分别为84％和96％）。硝酸镧溶液组的肾脏各种细胞糖萼均能清晰显示，肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞、足细胞和细胞连接糖萼的显示率分别为100％、96％、92％和100％。与生理盐水组和硝酸镧固定液组比较，硝酸镧溶液组的肾间质血管内皮细胞、肾小球内皮细胞糖萼的显示率均显著增高（P〈0．01）。硝酸镧固定液组和硝酸镧溶液组的足细胞糖萼的显示率均较生理盐水组显著增高（P〈0．01）。各组的肾间质细胞连接糖萼的显示率无统计学差异（P〉0．05）。结论2％硝酸镧溶液和2％硝酸镧一戊二醛固定液先后灌注小鼠，取肾脏用相同固定液固定后行透射电镜检查，能清晰显示肾脏各种细胞糖萼层，尤其是肾脏血管内皮细胞糖萼层，这为。肾脏糖萼的相关研究提供一种可靠的实验方法。

雷公藤多苷联合小剂量糖皮质激素对IgA肾病伴肾功能减退患者的疗效观察

目的：观察雷公藤多苷联合小剂量糖皮质激素（简称激素）较单用激素治疗IgA肾病伴肾功能减退患者的临床疗效和安全性。方法：56例经肾活检证实且伴肾功能轻中度减退（肾小球率过滤50~80 ml/min）的IgA肾病患者分成两组。雷公藤组应用雷公藤多苷联合小剂量激素治疗,激素组为常规激素治疗,观察治疗0、3、6、9和12个月的蛋白尿、肾功能等临床指标变化,并评价不良反应。结果：激素组治疗9个月时24 h尿蛋白定量较治疗前开始减少（P＜0.05）,雷公藤组治疗6个月时开始减少（P＜0.05）。12个月时,激素组由治疗前（2.12±0.81）g降至（0.99±0.59）g,P＜0.01；雷公藤组由（2.21±0.75）g降至（0.43±0.18）g,P ＜0.01。治疗9、12个月时,雷公藤组24 h尿蛋白定量较激素组降低显著（P＜0.05）。与治疗前比较,激素组治疗6个月时,肾功能开始下降,表现为Scr升高（P＜0.01）,内生肌酐清除率（Ccr）下降（P＜0.01）。雷公藤组9个月时开始下降,Scr升高（P ＜0.01）,Ccr下降（P＜0.01）。两组间治疗后3、6、9个月疗效比较,Scr以及Ccr的变化差异均无统计学意义（P〉0.05）,12个月时,雷公藤组肾功能优于激素组（P＜0.05）。治疗期间激素组3例（10%）出现柯兴貌、面部痤疮,雷公藤组1例出现白细胞轻度减少。结论：雷公藤多苷联合小剂量激素能有效减少伴肾功能减退IgA肾病的蛋白尿,且一定程度上延缓肾功能进展,耐受性好。长期疗效仍需继续随访。

成人特发性膜性肾病的预后危险因素分析

目的：以2年内估算的肾小球滤过率（e GFR）下降30%作为终末期肾脏病（ESRD）替代终点分析影响特发性膜性肾病（IMN）预后的因素。方法：本研究回顾性分析了2009年1月~2012年7月我院临床病理诊断为IMN且随访时间达到24个月的患者的病历资料,以e GFR下降30%或发生ESRD作为观察终点,以达到观察终点和未达到终点为标准分为两组,用卡方检验和多因素Logistic回归分析预后影响因素。结果：总计139例患者入选,活检时年龄18岁~78岁,其中男84例（60.1%）,53例（38.1%）患者达到观察终点,卡方检验显示,年龄〉59岁、肾小管间质损害面积〉25%、血尿素氮（BUN）〉5.3 mmol/L、分期〉2期、蛋白尿不缓解及血清白蛋白（Alb）〈25 g/L使终点事件发生的风险显著增加（P〈0.05）。但两组患者多因素Logistic回归分析结果显示,只有年龄〉59岁、肾小管间质损害面积〉25%及血清Alb〈25 g/L终点事件发生的独立危险因素（P〈0.05）,分别使IMN患者发生终点事件风险分别上升3.471倍、6.724倍和3.195倍。结论：我们的研究结果表明高龄、血清Alb浓度低和肾小管间质损害重是IMN患者发生ESRD的独立危险因素。

环磷酰胺与环孢素A治疗难治性肾病的对比观察

目的:通过检测临床指标的变化,观察对比环磷酰胺和环孢素治疗难治性肾病综合征的疗效差异。方法:将31例难治性肾病综合征患者随机分为A、B两组,在口服泼尼松0.5mg·kg-1.d-1治疗的基础上,A组静脉滴注环磷酰胺0.5～1.0/m2,每月1次;B组口服环孢素5mg·kg-1.d-1。进行1年的随访,在治疗前、治疗3、6、12个月分别记录尿常规、24h尿蛋白定量、肝功能(AST、ALT、Alb)、肾功能(CRE,UA,GLU)及环孢素血药浓度等指标的变化,并记录不良反应。结果:两组患者各项指标均较治疗前好转。从治疗3个月开始,部分患者的尿蛋白定量及血浆白蛋白水平开始有所恢复,前后结果差异有统计学意义(P<0.05)。结论:环磷酰胺及环孢素A均可以有效的治疗难治性肾病综合征,治疗同期两者差异不明显,并且治疗过程中未出现严重的不良反应。

阿伐他汀联合贝那普利治疗早期糖尿病肾病临床观察

目的:观察阿伐他汀联合贝那普利治疗早期糖尿病肾病的疗效并探讨其可能机制。方法:选取糖尿病肾病患者78例,随机分为对照组和治疗组,对照组在常规饮食和降糖药物治疗的基础上加贝那普利(10mg1/d),治疗组在对照组基础上使用阿伐他汀(20mg1/晚),疗程6个月。观察治疗前后患者血压、血脂、尿白蛋白排泄率、肾功能和C-反应蛋白变化。结果:两组治疗后收缩压、舒张压和平均动脉压(MAP)较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.01),治疗组治疗后血胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和C-反应蛋白(CRP)显著下降(P<0.01),与对照组治疗后比较差异有统计学意义(P<0.01),两组治疗后血肌酐水平均较治疗前下降(P<0.05);治疗组治疗后尿蛋白排泄率下降显著(P<0.01),明显优于对照组(P<0.01)。结论:阿伐他汀联合贝那普利在降低血压和血脂的同时能有效的降低尿蛋白排泄率、抑制慢性炎症、改善肾功能,明显延缓糖尿病肾病进展。

环孢素A与环磷酰胺治疗原发性膜性肾病疗效的对比观察

目的:观察环孢素A和环磷酰胺治疗特发性膜性肾病的疗效、复发率及副作用等差异。方法:对随访的经CsA治疗(n=20,分两次口服CsA5mg·kg-1·d-1,3个月后减量维持,6个月无效者停药,同时口服甲基泼尼松龙0.4mg·kg-1·d-1)和经CTX治疗组(静脉滴注CTX0.5～1.0g·m-2·m-1,每月1次,共6月,此后每3月1次,累计剂量8～10g,同时口服甲基泼尼松龙0.8mg·kg-1·d-1)。定期检测尿蛋白定量、血清白蛋白、肝肾功能等指标,对患者治疗期间的疾病缓解率、复发率等进行观察。结果:两组尿蛋白定量及血浆白蛋白水平较治疗前明显好转(P<0.05),治疗前后肝肾功能未见明显变化,CsA组患者缓解率为70%,峰值出现在约第3～6个月间;CTX组患者缓解率为66.7%,峰值出现在约第12个月前后,两组缓解率差异无统计学意义(P>0.05)。CsA组患者复发率为42.9%,谷值出现在约第12个月前后;CTX组患者复发率为25%,谷值出现在约第18个月前后,CTX组复发率明显低于CsA组复发率(P<0.05)。结论:CsA和CTX对IMN的治疗均有一定的疗效。CsA组和CTX组相比较,前者患者的病情缓解发生早于后者,在缓解率方面两者之间不存在明显的差异,但前者短期的复发率要高于后者。对于两种药物的远期效果及患者肾功能的进展,仍需进一步的长期随访观察。

来氟米特治疗表现为难治性肾病综合征的IgA肾病临床分析

目的:观察来氟米特治疗表现为难治性肾病综合征的IgA患者的疗效。方法:经常规治疗无效的此类IgA肾病患者38例,予以来氟米特治疗,观察治疗前、治疗后4周、8周、12周及6个月的24h尿蛋白定量、肝功能、肾功能、血脂、免疫球蛋白等相关临床指标以及用药期间所有不良反应。结果:治疗后尿蛋白定量明显减少,血清白蛋白升高,与治疗前相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗6个月时完全缓解9例,占23.7%;显效11例,占28.95%;有效7例,占18.4%;总有效率71.1%;无效11例,占28.95%。不良反应轻微,患者耐受性良好。结论:来氟米特是治疗表现为难治性肾病综合征的IgA患者的一种安全有效药物。

局灶节段性肾小球硬化分子生物学研究进展

局灶性节段性肾小球硬化（focaland segmental glomerulosclerosis，FSGS）的病理表现主要为累及肾小球部分毛细血管袢的非炎症性硬化疾病，临床上以蛋白尿或肾病综合征为主要表现。国内、外资料显示，近年来FSGS的发病率呈上升趋势，国内FSGS占原发性肾小球疾病的4．6％，而美国的流行病学调查提示，

尾静脉注射重组腺相关病毒载体小鼠肾组织病毒表达的观察

目的:通过小鼠尾静脉注射r AAV8-GFP病毒,观察腺相关病毒作为基因治疗载体在肾组织的表达情况,探讨此造模方法使腺相关病毒作为基因载体在肾脏表达的可行性,为进一步基因治疗肾脏疾病提供依据。方法:取16只C57-BL6小鼠,随机分为两组(n=8),对照组小鼠尾静脉注射PBS 0.2 ml,模型组小鼠尾静脉注射含有1×1011Iu/ml r AAV8-GFP 0.2 ml,4周后处死小鼠,用HE染色和免疫组化方法分别观察携有绿色荧光蛋白(GFP)r AAV-8在肾脏、肝脏、脾脏、肺脏和心脏等各组织,形态结构变化和荧光表达情况,并用PCR和Real-Time PCR方法检测r AAV8-GFP在肾脏、肝脏、脾脏、肺脏和心脏DNA表达情况。结果:与对照组比较,HE染色提示,模型组各脏器组织结构无明显变化。免疫组化提示肝脏有明显绿色荧光蛋白表达,肾脏,脾脏,肺脏和心脏绿色荧光蛋白表达不明显。Real-Time PCR方法发现,与对照组比较,肝脏表达r AAV-8表达最高,心脏,肾脏,肺脏和脾脏都有不同层度表达,但表达水平较低。结论:尾静脉注射r AAV8-GFP造模方法可使r AAV8-GFP在肾组织中有一定程度表达,但表达量偏少,尚不能作为一个较好腺相关病毒在肾脏表达的造模方法。