鹰嘴豆素A对骨关节炎的体外作用机制研究

目的通过体外实验探讨鹰嘴豆素A(BCA)对骨关节炎的作用机制。方法提取大鼠原代软骨细胞进行培养,随后将其分为对照组(不加诱导剂及干扰剂)、模型组[10 ng/mL白细胞介素-1β(IL-1β)诱导]和BCA组(10 ng/mL IL-1β诱导+0、3、6、12、24、48µmol/L BCA干预)。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行细胞活性评估,衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色观察细胞衰老情况,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞内炎症因子和氧化应激指标,蛋白免疫印迹法检测相关蛋白水平,运用分子对接技术验证BCA与Nrf2之间的亲和力。结果MTT法筛选BCA浓度后,选择6、12、24µmol/L BCA进行后续实验。与对照组相比,模型组软骨细胞活性及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性明显减弱(P<0.05),SA-β-gal阳性细胞数显著增加,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、丙二醛(MDA)表达水平明显升高(P<0.05),细胞内Ⅱ型胶原蛋白(COL2A1)、蛋白多糖(ACAN)表达水平明显降低(P<0.05)。与模型组相比,BCA组上述情况均出现明显逆转(P<0.05)。此外,BCA可以显著减弱核因子κB抑制因子α(IκB-α)的降解和NF-κBp65的核转位,并促进Nrf2在细胞核中的表达和人血红素氧化酶1(HO-1)在全细胞中的表达(P<0.05)。分子对接研究结果则进一步证实BCA与Nrf2具有极高的亲和力。结论BCA可通过调控Nrf2/NF-κB信号通路体外抑制骨关节炎软骨细胞氧化应激及炎症反应,缓解关节损伤。