竹节参皂苷不同浓度乙醇洗脱物对肝细胞损伤的保护作用

目的研究不同浓度竹节参总皂苷对游离脂肪酸诱导的肝细胞(Hep G2)损伤的保护作用。方法制备竹节参总皂苷不同浓度乙醇洗脱(10%、30%、60%及90%)的有效部位,应用棕榈酸(PA)诱导肝癌细胞Hep G2脂肪变性的细胞模型(模型组),正常组应用DMSO。提取细胞总RNA检测内质网应激标志基因葡萄糖调节蛋白(GRP-78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,通过噻唑蓝(MTT)方法反映细胞存活状况,以及油红O染色,观察细胞脂肪变性情况。结果 MTT结果显示模型组与正常组比较,Hep G2细胞存活率明显降低,竹节参提取物中,90%乙醇洗脱组的细胞存活率较模型组明显升高,差异有统计学意义;油红O染色其细胞内泡状脂滴数目较模型组明显减少,细胞肿胀减轻,细胞数目增多,而其他萃取部位效果不明显;RT-PCR显示,模型组内质网应激相关基因表达量明显高于正常组,而竹节参90%乙醇萃取部位则较模型组有明显降低,与正常组比较差异无统计学意义。90%乙醇洗脱组经高效液相色谱法(HPLC)测定,其主要成分为齐墩果烷型皂苷。结论竹节参齐墩果烷型皂苷能明显降低PA诱导的Hep G2细胞脂肪变性,其机制与干预内质网应激相关。