Nrf2在脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研究进展

核因子红细胞2-相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是细胞内重要的抗氧化转录因子,在机体的抗氧化应激防御系统里扮演重要角色。研究表明,Nrf2可被PI3K/AKT、SIRT6、ERK1/2、BRCA1、(microRNA-144-3p)-Brg1等通路激活,进而通过抗炎、抑制氧化应激和神经元凋亡以及促进血管生成等作用来减轻脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)。该文就Nrf2结构、Nrf2在CIRI中的作用机制,以及近年来通过Nrf2途径治疗CIRI的相关研究进行综述,试图为缺血性脑病的发病机制及防治靶点提供新思路及理论依据。

原花青素B2通过AKT-FoxO3拮抗脂质诱导的小鼠肝细胞衰老研究

目的研究原花青素B2(PCB2)对小鼠肝细胞衰老的调控作用,探讨其可能的分子机制。方法将小鼠胚胎肝细胞株BNL CL.2以梯度浓度棕榈酸(PA)及PCB2处理后,采用噻唑蓝(MTT)检测肝细胞活力,确定PA及PCB2最适浓度。将BNL CL.2细胞分为对照组、PA组和PCB2组,其中PA组用于建立肝细胞衰老模型,PCB2组用最适浓度的PCB2和PA共同作用于细胞。以β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况,反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞周期相关基因表达情况,免疫荧光检测细胞丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-叉头转录因子3(AKT/FoxO3)通路的蛋白表达情况。结果MTT筛选得到PA最适浓度为100μmol/L,PCB2为12.5μg/ml,并用于后续实验。SA-β-Gal染色结果显示,PA组染色阳性细胞数较对照组明显增加;经PCB2处理后,染色阳性细胞数较PA组减少,差异有统计学意义(P<0.001)。RTqPCR结果提示,与对照组比较,PA处理后细胞周期相关基因CDK2表达下调,p21表达上调;经PCB2干预后,CDK2表达较PA组增加,p21表达较PA组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,与对照组比较,PA处理后AKT表达在胞核中减少,在胞质中增加,FoxO3在胞核中明显增加;与PA组比较,PCB2处理后AKT表达在胞核中增加,在胞质中减少,FoxO3在胞核中明显减少。结论PCB2对PA诱导的小鼠肝细胞衰老具有明显保护作用,其机制可能是通过AKT/FoxO3信号通路发挥调控作用。

香叶木素保护对乙酰氨基酚诱发的急性肝损伤

为探究香叶木素对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的急性肝脏损的保护作用及机制,体外实验人非肿瘤性肝细胞LO2设置空白组及不同浓度香叶木素(Dios)预处理组处理6 h后,给予APAP(10 mM)孵育24 h。体内实验40只C57BL/6 J小鼠随机分为正常组、APAP组、Dios 30 mg/kg和Dios 60 mg/kg剂量组。每组10只,Dios组小鼠给予不同剂量的Dios灌胃1次,连续7 d。实验末期,除正常组其余各组给予APAP300mg/kg建立急性肝损伤模型,测定小鼠血清ALT、AST;肝GSH、MDA水平;HE染色;Westernblot法检测Nrf2的表达;PCR检测m Nqo1,m G6pdx,m SOD2的表达。结果表明在LO2细胞中,与APAP组相比,Dios预处理组可以恢复细胞活力和GSH含量。高剂量组可以明显降低小鼠血清ALT、AST水平,下调肝组织MDA表达并提高GSH含量,进而诱导Nrf2转位入核,其下游相关基因Nqo1、G6pdx、SOD2也显著上升。高剂量组可保护APAP引起的急性肝损伤,并且该保护作用与激活抗氧化应激Nrf2/ARE信号通路有关。