GPC_3C末端融合蛋白在肝细胞癌中的分布及其临床意义

目的 :检测Glypican 3(GPC3 )在肝细胞癌中的表达 ,探讨GPC3 在肝细胞癌中的作用。方法 :( 1 )定向克隆GPC3 基因C末端 1 80bp的片段 ,IPTG诱导原核表达载体 pGEX 5X 1、鉴定并利用谷胱苷肽转移酶纯化GPC3 末端融合蛋白 ;( 2 )免疫家兔 ,制备抗体 ;( 3)应用免疫组化 (SP法 )检测了肝细胞癌及其癌旁组织中GPC3 的表达。结果 :( 1 )纯化了GPC3 末端融合蛋白 ;( 2 )制备了抗人GPC3 多克隆抗体 ;( 3)免疫组化结果表明 2 5例低分化肝细胞癌中 1 8例为阳性 ,表达率为 72 % ;阳性结果为棕色颗粒均匀分布于肝细胞癌的细胞膜上和胞浆内 ;正常肝细胞、胆管细胞、血管内皮细胞、Ito细胞及成纤维细胞均呈阴性 ;癌旁组织不表达。GPC3 的表达和肿瘤大小及门脉癌栓形成有密切关系。结论 :GPC3 在肝细胞癌中高表达 ,且具有细胞特异性 ;GPC3 在低分化的肝细胞癌中有重要作用。