中药复方药代动力学研究新进展

近年来,中药复方药代动力学研究取得了较大的进展,一些新理论、新方法不断涌现,如药动-药效的相关分析、中西药药动学相互作用研究、肠道菌群代谢研究等,但这些方法也存在一定的缺陷,有待进一步完善。

泻心汤黄酮类成分在大鼠体内的药代动力学研究

研究泻心汤中黄酮类成分在大鼠体内药代动力学规律。大鼠灌胃给予泻心汤12g·kg^-1，给药前及给药后不同时间采集血样或尿样，HPLC法测定黄酮类成分浓度，血药浓度-时间数据和尿药排泄量-时间数据用DAS软件进行动力学分析。采用大鼠肾匀浆温孵法，进行黄芩苷的体外代谢研究。结果显示，黄芩苷、汉黄芩苷血药浓度迅速达峰，药时曲线呈现双峰现象，消除T1/2均为6h左右；黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素在尿中均有排泄，尿中排泄量占给药量均〈10%，尿排泄T1/2在6-8h；大鼠肾匀浆可将黄芩苷代谢生成黄芩素，酶动力学参数Vmax=702nmol·min^-1·g^-1（protein），Km=135μmol·L^-1。可见，泻心汤中黄酮类成分可迅速吸收进入体内；黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素均可从尿排泄，但尿药排泄量较少；肾脏可将黄芩苷代谢成黄芩素。

小鼠体内泻心汤中黄芩苷药代动力学

目的:研究泻心汤(大黄、黄连、黄芩)中黄酮类成分在小鼠体内药代动力学规律。方法:小鼠灌胃给予泻心汤4.5、9、18g/kg后,用HPLC方法分析血浆中黄酮类成分、测定血浆中黄芩苷浓度经时变化,浓度-时间数据用DAS药代动力学软件进行分析,计算药动学参数。结果:小鼠灌服泻心汤后血浆中检测到黄芩苷、汉黄芩苷和另一黄酮类成分,其中黄芩苷含量最高。泻心汤灌胃给予4.5、9、18g/kg后,黄芩苷主要药代学参数分别为:T1/2=2.77、5.69、6.20h,AUC0-∞=9.09、23.49、39.57μg·h/mL,CL=12.52、6.962、11.50L·h/kg,Vd=50.11、79.56、102.95L/kg,Cmax1=1.89、3.32、4.79μg/mL(Tp1=0.08h),Cmax2=1.46、2.57、4.16μg/mL(Tp2=3h)。结论:泻心汤中黄酮类成分可以吸收进入体内,其中以黄芩苷为主。

茵陈的药理作用及其主要化学成分药物代谢动力学研究进展

茵陈为菊科植物滨蒿（Artemisia scoparia Waldst.Et Kit.）或茵陈蒿（A.capillaries Thunb.）的干燥地上部分,具有清热利湿、利胆退黄的功效,临床上主要用于治疗各种黄疸性肝胆疾病。根据2010版《中华人民共和国药典》记载,根据采收季节的不同，茵陈可分为绵茵陈和花茵陈2种，前者为春季幼苗期采摘，后者为秋季花蕾长成至花初开时采摘。

大鼠体内泻心汤及其不同配伍黄酮类成分药代动力学的变化规律研究

目的研究泻心汤不同配伍黄酮类成分在大鼠体内药代动力学的差异。方法大鼠随机分为4组,分别灌胃给予泻心汤(XXD),单味黄芩(RS),大黄+黄芩(RRR+RS)和黄连+黄芩(CC+RS),给药前及给药后不同时间采集血样,HPLC法测定黄芩苷和汉黄芩苷浓度,由血药浓度-时间数据计算药动学参数,比较组间差异。结果与RS组相比,其余3组中黄芩苷的AUC和Cmax数值均有不同程度的降低;而CC+RS组中汉黄芩苷的AUC和Cmax数值与RS组相比亦有明显减少。结论泻心汤配伍(黄连和大黄)可能使黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的吸收减少、暴露水平降低,其中黄连的影响更明显。

大鼠口服泻心汤及其配伍组方中原小檗碱类成分尿排泄动力学

目的研究大鼠灌服泻心汤及其配伍组方中3种原小檗碱类生物碱（小檗碱、巴马汀、黄连碱）尿排泄动力学的变化。方法取SD大鼠20只随机分成黄连、大黄黄连、黄芩黄连、泻心汤4组，采集灌胃给药前及给药后不同时间段尿液，用HPLC法测定尿药浓度，由尿排泄-时间数据计算尿排泄动力学参数，采用方差分析比较各组中3种原小檗碱类生物碱尿排泄动力学参数的差异。结果3种原小檗碱类生物碱排泄速率常数相近，排泄半衰期为9～16h。与黄连组比较，泻心汤组、大黄黄连组、黄芩黄连组中黄连碱尿排泄量占给药量比值减少，其中泻心汤组与之比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论3种原小檗碱类生物碱具有类似的尿排泄特征，大黄、黄芩和黄连配伍能减少黄连碱的尿排泄量。

四君子汤对脾虚模型大鼠左氧氟沙星药动学影响的实验研究

目的:研究四君子汤(人参、白术、茯苓、甘草)对脾虚模型大鼠左氧氟沙星药动学的影响。方法:24只大鼠随机分为4组,生理盐水组(给予生理盐水)、生理盐水+四君子汤组(给予生理盐水和四君子汤)、利血平组(给予利血平预处理)、利血平+四君子汤组(给予利血平预处理后用四君子汤治疗),以20 mg/kg灌服左氧氟沙星,于给药后不同时间点采集血样,用高效液相色谱法分析左氧氟沙星的血药浓度,根据血药浓度-时间数据计算药动学参数。结果:利血平引起的大鼠症状类似于中医临床脾虚证。左氧氟沙星在生理盐水组、生理盐水+四君子汤组、利血平组、利血平+四君子汤组大鼠体内的药动学参数分别为:AUC(0-∞)=(8.55±0.99),(7.41±1.39),(4.68±0.95)和(7.89±1.41)mg/(L.h),Cm ax=(3.31±0.63),(2.38±1.15),(1.29±0.45)和(3.35±1.15)mg/L。与生理盐水组相比,利血平组大鼠体内左氧氟沙星的AUC(0-∞)和Cmax显著降低(P<0.01),与利血平组相比,利血平+四君子汤组大鼠体内左氧氟沙星的AUC(0-∞)和Cmax显著增加(P<0.01),而生理盐水组与生理盐水+四君子汤组参数之间没有显著性差异。结论:脾虚状态下左氧氟沙星的生物利用度显著降低,四君子汤可改善脾虚状态下左氧氟沙星的吸收。

黄芩对大鼠体内甲苯磺丁脲药动学的影响

目的研究黄芩对甲苯磺丁脲药动学的影响。方法大鼠12只,雌雄各半,随机分为两组,生理盐水组(NS组)和黄芩组(HQ组)。分别灌服生理盐水和等体积的黄芩水提物,0.5 h后灌胃给予甲苯磺丁脲50 mg/kg。采用HPLC-UV法检测甲苯磺丁脲及其代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲的血浆浓度,计算药代动力学参数。结果在雌性大鼠体内,NS组中甲苯磺丁脲及其代谢产物4-羟基甲苯磺丁脲的AUC0-t分别为(1 760±82)μg/(mL.h)和(18±2)μg/(mL.h),HQ组中分别为(2 360±298)μg/(mL.h)和(25±4)μg/(mL.h),即给予黄芩后,甲苯磺丁脲的AUC0-t升高约34.1%(P<0.05);而甲苯磺丁脲的t1/2以及AUC0-t(甲苯磺丁脲)/AUC0-t(4-羟基甲苯磺丁脲)比值,无论雌雄,NS组和HQ组间的差异无统计学意义。结论黄芩可提高雌性大鼠体内甲苯磺丁脲的总体暴露水平。

生脉颗粒中五味子醇甲药动学研究

目的研究生脉颗粒中木脂素类成分在人和小鼠体内药物代谢动力学规律。方法人口服生脉颗粒3.6g/次,小鼠灌胃给予生脉颗粒4.7g/kg,在不同的时间点采血样,用HPLC方法分析生脉颗粒和血浆样品中木脂素类成分,测定五味子醇甲浓度的经时变化,浓度-时间数据用3P97药代动力学软件进行分析,计算药动学参数。结果人和小鼠给予生脉颗粒后,血浆中检测到五味子醇甲及新的成分,后者推测为五味子醇甲的代谢物。五味子醇甲在小鼠和人体内药动学参数分别是:T1/2ka为0.03和0.04h,T1/2ke为0.88和0.86h,Vd为19.12和1.73L·kg-1,CL为15.06和1.46L·h-1·kg-1,Cmax为1.196和0.098mg·L-1,Tpeak为0.21和0.50h,AUC0-∞为1.096和0.137mg·h·L-1。结论生脉颗粒中五味子醇甲可吸收进入体内,其在体内吸收和消除速度均比较快,并可在体内转化成代谢产物,且符合线性动力学规律。

冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素、东莨菪苷和绿原酸的测定

目的建立冯了性风湿跌打药酒(丁公藤、麻黄、桂枝、泽泻、厚朴、木香等)中主要活性成分东莨菪素、东莨菪苷和绿原酸的测定方法。方法采用HPLC法,用Agilent Poroshell 120 EC-C18柱对冯了性风湿跌打药酒中东莨菪素、东莨菪苷和绿原酸进行测定。用甲醇-0.1%甲酸水作流动相,梯度洗脱,体积流量1 mL/min,检测波长360 nm。结果东莨菪素在0.008 1~0.81μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为98.5%,RSD为0.4%;东莨菪苷在0.026 8μg^2.68μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为99.2%,RSD为1.6%;绿原酸在0.027 04~2.704μg范围内线性关系良好,r=1,平均回收率为98.3%,RSD为0.8%。结论本方法简单可行,重复性好,可作为冯了性风湿跌打酒的质量控制方法。

泻心汤在急性炎症动物模型上的抗炎效应

目的研究泻心汤的抗炎效应及抗炎作用的机制。方法采用4种急性炎症模型,包括大鼠角叉菜胶及蛋清足肿胀、2%冰醋酸小鼠腹腔渗出和小鼠内毒素急性肺损伤模型,观察泻心汤对动物实验性急性炎症模型的影响;并观察小鼠内毒素急性肺损伤模型中,泻心汤对血浆一氧化氮合成酶、一氧化氮、肿瘤坏死因子-α及自由基产物丙二醛的影响。结果泻心汤ig给药后对上述4种炎症模型都具有良好的抗炎效果;并可以抑制内毒素炎症过程中诱生型一氧化氮合成酶的活性,抑制一氧化氮、肿瘤坏死因子-α等炎症因子的产生,减少自由基产物丙二醛生成。结论泻心汤具有良好的抗炎效应,且可以通过多途径产生抗炎作用。

泻心汤不同配伍中蒽醌类成分的变化研究

目的建立测定泻心汤中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚游离与结合型的方法,并探索配伍对各成分的影响。方法采用AgilentHypersilODS色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(75∶25);体积流量:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长:440nm,进样量:50μL。不同配伍中蒽醌类成分的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果建立了同时测定5种蒽醌类成分的方法,这5个成分线性关系良好,加样回收率稳定。与单味大黄相比,大黄-黄芩中5种蒽醌类成分增加;黄连-大黄中芦荟大黄素、大黄素、大黄酚的总量增加,而大黄酸和大黄素甲醚总量减少;泻心汤中大黄酸总量减少,大黄素、大黄酚和大黄素甲醚总量增加,5种蒽醌类成分总和增加。结论本法准确可靠,重现性好,结果稳定,适合于泻心汤中蒽醌类成分的分析。并且不同配伍对泻心汤中蒽醌类成分有影响。

泻心汤不同配伍抗炎作用比较研究

目的对泻心汤不同配伍抗炎作用进行研究,以阐明该方的配伍原理。方法采用脂多糖(LPS)小鼠急性炎症模型,以血清NO浓度变化作为炎症指标,观察ig泻心汤生药18g/kg对血清NO浓度经时变化的影响;ig泻心汤生药4.5、9、18g/kg对血清NO浓度的影响;按正交设计,观察ig泻心汤不同配伍,即大黄、黄连、黄芩、大黄+黄连、大黄+黄芩、黄连+黄芩、全方(全方组生药18g/kg,其余各组按照在全方中的等量生药剂量给药)对血清NO浓度的影响。结果泻心汤给药后小鼠血清NO浓度均较对应时间点模型组低,6h差异显著,12、15h差异非常显著;泻心汤各剂量组小鼠血清NO浓度均较模型组低,高剂量组差异显著;不同配伍结果显示,除黄连组外,各给药组血清NO浓度与模型组相比差异显著;正交分析表明,在抗炎方面,大黄为该方第一要药,黄芩其次,黄芩与大黄有协同作用,黄连无明显作用及影响。结论在抗炎方面,泻心汤中大黄为第一要药,黄芩其次,黄芩与大黄有协同作用。

桂枝汤类方化学成分含量研究

目的:建立HPLC法同时测定桂枝汤(桂枝、白芍、生姜、甘草和大枣)类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的方法,并探索配伍对各成分含量的影响。方法:用SUPELCO Discovery C18柱,0.05%磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长为230nm和254nm;测定桂枝汤、桂枝加桂汤和桂枝加芍药汤中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量,不同配伍之间的差异采用SPSS软件进行方差分析。结果:建立了同时测定原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸含量的高效液相色谱法和相应的回归方程,与单味桂枝相比,三个类方中原儿茶酸含量增加、桂皮酸含量减少,桂枝汤和桂枝加桂汤中香豆素含量增加;与单味芍药相比,三个类方中芍药苷含量减少;与单味甘草相比,三个类方中甘草酸含量增加。结论:本方法专属、重复性好,可用于桂枝汤类方中原儿茶酸、香豆素、桂皮酸、桂皮醛、芍药苷和甘草酸的含量测定。不同配伍对各成分含量有影响,其影响非常复杂。

进口与国产比卡鲁胺片在健康人体的生物等效性

目的研究比卡鲁胺片在(抗雄性激素药)在健康人体内的药代动力学,并比较国产与进口2种制剂的生物等效性。方法44名健康男性志愿者随机平行口服单剂量国产(试验制剂)或进口比卡鲁胺片(参比制剂)50mg后,用高效液相色谱法测定血浆中比卡鲁胺片浓度,用DAS软件计算2者的药代动力学参数及相对生物利用度,并评价2种制剂的生物等效性。结果国产和进口比卡鲁胺片的AUC0-n分别为(94.4±20.6)和(102.3±17.4)μg.h.mL-1;AUC0-∞分别为(102.1±20.8)和(108.7±18.9)μg.h.mL-1,Cmax分别为(538±151)和(619±167)ng·mL-1;tmax分别为(21±12)和(23±12)h,生物利用度F=93.9%。结论国产和进口比卡鲁胺片具有生物等效性。

泻心汤的抗菌作用研究

目的:研究中药泻心汤的抗菌效应。方法:以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌及绿脓杆菌为受试菌,采用倍比稀释法,观察泻心汤的最低抑菌浓度;采用血清药理学方法,观察大鼠灌服泻心汤12g/kg后15min、4h血清的抑菌效应。结果:泻心汤在体外对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为6.25、6.25和100mg/ml;而大鼠给药后含药血清仅具有较弱的抑菌作用。结论:泻心汤在体外具有一定抑菌效应,其含药血清抑菌作用较弱,有待进一步研究。

四君子汤对脾虚模型大鼠体内头孢羟氨苄药动学的影响

目的:探讨四君子汤对脾虚模型大鼠头孢羟氨苄药动学的影响。方法:24只大鼠随机分为4组:生理盐水组、生理盐水+四君子汤组、利血平组、利血平+四君子汤组。给予相应药物干预两周后,灌服头孢羟氨苄(60 mg/kg),给药后不同时间点采集血样,用高效液相色谱法分析头孢羟氨苄的血药浓度,根据血药浓度-时间数据计算药动学参数。结果:利血平引起的大鼠症状类似于中医临床脾虚证。头孢羟氨苄在生理盐水组、生理盐水+四君子汤组、利血平组、利血平+四君子汤组大鼠体内的药动学参数分别为:AUC(0～∞)=59.72±8.03,62.30±9.27,75.08±11.83和63.07±9.21 mg·h^(-1)·L^(-1);Cmax=25.21±2.47,24.45±4.20,34.04±4.77和24.15±5.38 mg/L。与生理盐水组相比,利血平组大鼠体内头孢羟氨苄的AUC(0～∞)和Cmax增加(P<0.05);与利血平组相比,利血平+四君子汤组大鼠体内头孢羟氨苄的AUC(0～∞)和Cmax降低(P<0.05),而生理盐水组与生理盐水+四君子汤组参数之间没有显著性差异。结论:脾虚状态下头孢羟氨苄的生物利用度有所增加,四君子汤可使其吸收恢复接近正常。

槲皮素在糖尿病模型大鼠肝脏甲基化代谢的研究

目的:考察糖尿病模型大鼠体内槲皮素甲基化代谢的变化情况。方法:采用高脂高糖饮食+链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肝匀浆,研究槲皮素甲基化代谢特征及酶动力学,并与正常大鼠比较观察糖尿病状态下甲基化代谢的差异。结果:槲皮素(浓度2.6～165.5μM)在大鼠肝匀浆中甲基化代谢酶动力学符合Michaelis-Menten方程。槲皮素在正常和糖尿病大鼠肝匀浆的甲基化代谢的酶动力学参数米氏常数(Km)分别为12.4±2.6、12.0±0.7μM,最大反应速度(Vmax)分别为440.4±27.5、307.9±5.1pmol/min/mg,内在代谢清除率(CLint)分别为35.4、25.7 ml/min/mg。与正常大鼠相比,糖尿病大鼠肝匀浆中槲皮素甲基化代谢物的Vmax和CLint降低。结论:糖尿病状态降低了槲皮素甲基化代谢,可能会减慢槲皮素在体内的消除过程。

高效液相色谱法测定大鼠血浆中桂皮酸和马尿酸

目的:建立同时测定大鼠血浆中桂皮酸和马尿酸浓度的高效液相色谱法。方法:血浆样品用盐酸和乙酸乙酯萃取,采用SUPELCO Discovery C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以0.05%磷酸-乙腈为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1;以对羟基苯甲酸甲酯为内标,在230 nm(马尿酸)和278 nm(桂皮酸)波长下进行检测。结果:桂皮酸的线性范围为0.05～5.0μg·mL-1(r=0.9987),最低定量限为0.05μg·mL-1,方法回收率为87.5%～102.4%,绝对回收率大于80%,日内和日间的RSD均小于13.1%;马尿酸的线性范围为0.2～20.0μg·mL-1(r=0.9957),最低定量限为0.2μg·mL-1,方法回收率为96.2%～101.6%,绝对回收率大于70%,日内和日间的RSD均小于8.4%。血浆样品的稳定性符合要求。结论:所建立的大鼠血浆中桂皮酸和马尿酸浓度的HPLC测定方法灵敏、准确、精密、稳定,并适用于大鼠体内桂枝的药代动力学研究。

生物样品液质联用分析中的基质效应研究概况

本文对液质联用技术中基质效应产生的原因、基质效应评价尤其是如何消除基质效应等三方面作了简要介绍,为生物样品液质联用定量分析方法学的建立提供参考。