葛根素通过Fetuin B-AMPK/ACC信号通路减轻2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗

目的探讨葛根素通过Fetuin B-AMPK/ACC信号通路对高脂饮食联合链脲佐菌素诱导的2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗的调控机制。方法 C57BL/6J小鼠随机选取10只正常饮食作为正常对照组,其余40只通过高脂饲料喂养联合腹腔注射100 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病小鼠模型,造模成功后采用随机数字表法将小鼠分为模型对照组、葛根素低剂量组(Pue-50 mg/kg)、葛根素中剂量组(Pue-100 mg/kg)和葛根素高剂量组(Pue-200 mg/kg),干预8周。末次给药后,尾静脉取血检测各组小鼠空腹血糖(FBG),取血和肝组织;ELISA法检测各组小鼠血清空腹胰岛素(FINS),肝脏甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸水平;HE染色法观察小鼠肝脏病理变化;免疫组化法检测小鼠肝脏Fetuin B含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠肝脏Fetuin B、AMPK、ACC mRNA表达;Western blot法检测小鼠肝脏Fetuin B、AMPKα1、ACC、P-AMPKαT183/T172、P-ACCS79蛋白表达。结果末次给药后,Pue-100 mg/kg、Pue-200 mg/kg剂量组甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸及FBG低于模型对照组(P<0.01);葛根素不同剂量给药组较正常对照组,FINS和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)降低(P<0.01)。与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝脏Fetuin B、ACC mRNA表达明显上升,AMPK mRNA表达降低(P<0.01);Fetuin B、ACC蛋白表达升高,AMPKα1、PAMPKαT183/T172、P-ACC S79蛋白表达降低(P<0.01);病理学观察到肝脏脂肪变性明显,肝脏Fetuin B表达含量增加。与模型对照组比较,葛根素呈剂量依赖性抑制肝脏Fetuin B、ACC mRNA表达和Fetuin B、ACC蛋白表达,上调AMPK mRNA表达和AMPKα1、P-AMPKαT183/T172、P-ACC S79蛋白表达(P<0.01)。Pue-50 mg/kg给药组上调AMPK mRNA表达,下调ACC mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论葛根素可能通过调节肝脏Fetuin B-AMPK/ACC信号通路减轻2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗,进一步改善糖脂代谢。