黄芪甲苷干预碘酸钠诱导的光感受器退行性病变的效应及相关机制

目的观察并初步探讨黄芪甲苷(AS-A)干预碘酸钠(NaIO_(3))诱导的光感受器退行性病变的效应及相关机制。方法6~8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠60只,随机分为正常对照组(NC组)、NaIO_(3)组、AS-A组,每组20只。建模前30 min,AS-A组按100 mg/kg的剂量腹腔注射100μl AS-A;30 min后,NaIO_(3)组、AS-A组小鼠按30 mg/kg的剂量腹腔注射100μl NaIO_(3)。其后,AS-A组小鼠每天早晚间隔12 h给药2次,直到实验结束。建模后1 d,紧密连接蛋白(ZO-1)染色观察视网膜色素上皮(RPE)细胞结构;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组小鼠视网膜趋化因子配体2(Ccl2)、白细胞介素1β(Il-1β)、混合谱系激酶结构域样蛋白(Mlkl)、受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)、肿瘤坏死因子(Tnf)等基因的mRNA相对表达量。建模后3 d,免疫组织化学染色观察各组小鼠视网膜中离子钙接头蛋白1(Iba1)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达;原位末端标记(TUNEL)法检测各组小鼠视网膜光感受器细胞的死亡情况。建模后4 d,采用眼底彩色照相、光相干断层扫描(OCT)检查观察各组小鼠眼底形态;苏木精-伊红染色(HE)观察各组小鼠视网膜形态结构。两组间比较采用独立样本t检验;三组间比较采用单因素方差分析。结果眼底彩色照相、OCT检查发现,NaIO_(3)组小鼠眼底可见大量散在黄白色玻璃膜疣样结构,RPE层出现大量强反射区;AS-A组RPE层中强反射区数量减少。ZO-1染色结果显示,NaIO_(3)组RPE细胞膜上ZO-1大量丢失;AS-A组ZO-1均匀分布于RPE细胞膜上。HE染色结果显示,NaIO_(3)组RPE层可见圆形黑色沉积物,光感受器内外节结构严重受损,外核层(ONL)细胞层核数显著减少;AS-A组RPE层色素整齐,光感受器内外节结构完整,ONL细胞核层数显著增加。TUNEL检测结果显示,NaIO_(3)组ONL可见大量TUNEL阳性细胞核,AS-A组视网膜ONL中TUNEL阳性细胞核数量显著减少,差异有统计学意义(t=2.66,P<0.05)。qPCR检测结果显示,与AS-A组比较,NaIO_(3)组视网膜中Mlkl、Ripk3、Ccl2、Il-1β、Tnf mRNA相对表达量显著升高,差异有统计学意义(F=39.18、10.66、53.51、41.40、24.13,P<0.001)。免疫组织化学染色结果显示,与NC组、AS-A组比较,NaIO_(3)组视网膜中GFAP阳性表达显著升高,差异有统计学意义(F=9.62,P<0.05)。结论AS-A能有效抑制NaIO_(3)诱导的光感受器退行性病变,其效应部分与抑制光感受器死亡和神经炎症反应,维护视网膜稳态相关。

二硝基苯酚及相关药物治疗肥胖及相关代谢性疾病的研究进展

肥胖及其相关代谢改变是心血管疾病等多种慢性复杂性疾病的主要危险因素,有效控制肥胖及相关代谢改变具有重要的临床意义。线粒体解偶联可促进能量支出和消耗,已成为干预肥胖症的新药物靶点。线粒体解偶联剂2,4-二硝基苯酚(DNP)通过线粒体氧化磷酸化解偶联、抑制脂肪组织炎症、促进脑源性神经营养因子的表达等,起到降低体重及改善糖脂代谢的作用。然而,DNP可引起产热过多、乳酸堆积及电解质紊乱等多种不良反应,限制了其临床应用。近年来,通过改造药物结构、改进药物递送等方法,研发了DNP-甲基醚,DNP控释制剂、DNP液晶凝胶载体药物,以及DNP联合丙酮酸脱氢酶激酶抑制剂用药策略,提高了其有效性和安全性,为临床治疗肥胖及相关代谢性疾病提供了新的手段。