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淫羊藿苷对急性肾损伤向慢性肾脏病转化小鼠模型的预防性保护作用
1
作者
谢林
程烨
+7 位作者
郑琦敏
张熙
付莉莉
陈敏
王怡
梅长林
谢静远
顾向晨
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期8-19,共12页
目的·探究淫羊藿苷在急性肾损伤(acute kidney disease,AKI)向慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)转化中的作用并探讨其可能的机制。方法·C57BL/6小鼠腹腔注射马兜铃酸2周,制作AKI向CKD转化模型,并于造模前1周或马兜铃...
目的·探究淫羊藿苷在急性肾损伤(acute kidney disease,AKI)向慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)转化中的作用并探讨其可能的机制。方法·C57BL/6小鼠腹腔注射马兜铃酸2周,制作AKI向CKD转化模型,并于造模前1周或马兜铃酸注射2周结束时持续灌胃给予淫羊藿苷5周或2周。监测小鼠肾功能和肾脏病理损伤,并用透射电子显微镜观察肾小管上皮细胞线粒体结构,采用荧光定量PCR(qPCR)及免疫组织化学染色法检测脂肪酸氧化代谢通路、纤维化及炎症指标等。采用Transwell细胞小室共培养大鼠肾脏成纤维细胞株和大鼠肾小管上皮细胞株,模拟2种细胞之间的相互作用。先提前1 h在肾小管上皮细胞培养液中加入淫羊藿苷,再加入马兜铃酸干预24 h;去除药物干预后,将肾小管上皮细胞与成纤维细胞共培养24 h。qPCR或Western blotting检测肾脏上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptorα,Ppara)、促纤维化因子、炎症因子、活化胱天蛋白酶(cleaved caspase-3),以及肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因mRNA或蛋白表达的变化。用Ppara-siRNA转染肾小管上皮细胞,观察淫羊藿苷提前于马兜铃酸干预后PPARα下游线粒体脂肪酸氧化代谢相关指标以及cleaved caspase-3的表达变化。结果·马兜铃酸注射2周结束时和注射结束后2周(造模4周),仅注射马兜铃酸的小鼠血清肌酐及尿素氮水平较对照组均显著升高,肾脏炎症细胞大量浸润,肾小管损伤严重;而提前给予淫羊藿苷干预的小鼠较马兜铃酸组肾功能明显改善,肾脏病理损伤减轻。造模4周时马兜铃酸组肾小管上皮细胞线粒体结构损伤严重,脂肪酸氧化代谢通路相关基因mRNA水平较对照组显著降低,伴巨噬细胞浸润及肾纤维化,提前给予淫羊藿苷干预后上述损伤或指标均明显缓解。在马兜铃酸注射2周结束时给予淫羊藿苷的小鼠血清肌酐和尿素氮水平、肾脏病理损伤、纤维化指标均与马兜铃酸组无明显差异。体外实验中,马兜铃酸可抑制肾小管上皮细胞Ppara mRNA表达,促进cleaved caspase-3、炎症因子及促纤维化因子表达升高,并上调共培养的肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因的表达,而淫羊藿苷提前干预对上述变化有明显的纠正作用。用siRNA敲低肾小管上皮细胞的Ppara后,淫羊藿苷对马兜铃酸抑制脂肪酸氧化代谢及促进细胞凋亡的预防保护作用减弱。结论·淫羊藿苷能预防马兜铃酸诱导的小鼠AKI向CKD转化;它可能是通过改善肾小管上皮细胞线粒体脂肪酸氧化代谢通路(尤其是PPARα)发挥作用。
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关键词
淫羊藿苷
急性肾损伤
慢性肾脏病
线粒体
脂肪酸氧化
肾小管上皮细胞
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职称材料
麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究
被引量:
7
2
作者
高俊丽
刘国香
+3 位作者
朱赟洁
戚怡沁
徐艳秋
王巍巍
《四川中医》
2020年第10期62-67,共6页
目的:探讨麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用及可能的机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)及中药治疗组(Z组),M组及Z组建立DN大鼠模型。Z组予麻黄附子细辛汤合苓桂术...
目的:探讨麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用及可能的机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)及中药治疗组(Z组),M组及Z组建立DN大鼠模型。Z组予麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭灌胃治疗4周。实验结束时留取血尿及肾脏标本,检测血尿生化指标,HE、Masson染色观察肾脏病理特点及肾小球面积,WT-1染色观察肾小球中足细胞的密度。结果:实验结束时,与N组比较,M组及Z组大鼠体质量显著降低,24h尿量、UACR及BUN水平显著升高(P<0.01)、24h-Upro水平升高(P<0.05);M组TC及TG的水平均升高(P<0.05),Z组TC及TG的水平均升高(P>0.05)。与M组比较,Z组大鼠体重升高,24h-Upro、UACR、BUN及TC水平降低(P<0.05);血TG水平降低(P>0.05),24h尿量增加(P>0.05)。HE及Masson染色提示:Z组大鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增生及血管内膜增厚均减轻,肾小管空泡样变性、间质纤维化及炎性细胞浸润程度显著降低。与N组比较,M组及Z组大鼠肾脏指数显著升高,肾小球截面积显著增加,足细胞的密度显著降低(P<0.01);与M组比较,Z组大鼠的肾脏指数降低,肾小球截面积缩小,足细胞密度升高(P<0.05)。结论:麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭可有效延缓DN大鼠的病程进展,可能与其改善DN大鼠的血脂及尿蛋白水平,保护足细胞形态及功能,从而减轻肾脏病理损伤程度密切相关。
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关键词
糖尿病肾病
麻黄附子细辛汤
苓桂术甘汤
菟丝子
水蛭
WT-1
原文传递
题名
淫羊藿苷对急性肾损伤向慢性肾脏病转化小鼠模型的预防性保护作用
1
作者
谢林
程烨
郑琦敏
张熙
付莉莉
陈敏
王怡
梅长林
谢静远
顾向晨
机构
上海
交通
大学
医学院
附属
瑞金
医院
肾脏科
上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院肾脏科
海军军医
大学
第二
附属
医院
(
上海
长征
医院
)
肾脏科
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第1期8-19,共12页
基金
国家自然科学基金面上项目(81774106)
上海市浦江人才计划(18PJD049)
+1 种基金
上海交通大学医学院“中西医结合研究平台”(2022zxy003)
上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院院级基金(2021yyjm01)。
文摘
目的·探究淫羊藿苷在急性肾损伤(acute kidney disease,AKI)向慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)转化中的作用并探讨其可能的机制。方法·C57BL/6小鼠腹腔注射马兜铃酸2周,制作AKI向CKD转化模型,并于造模前1周或马兜铃酸注射2周结束时持续灌胃给予淫羊藿苷5周或2周。监测小鼠肾功能和肾脏病理损伤,并用透射电子显微镜观察肾小管上皮细胞线粒体结构,采用荧光定量PCR(qPCR)及免疫组织化学染色法检测脂肪酸氧化代谢通路、纤维化及炎症指标等。采用Transwell细胞小室共培养大鼠肾脏成纤维细胞株和大鼠肾小管上皮细胞株,模拟2种细胞之间的相互作用。先提前1 h在肾小管上皮细胞培养液中加入淫羊藿苷,再加入马兜铃酸干预24 h;去除药物干预后,将肾小管上皮细胞与成纤维细胞共培养24 h。qPCR或Western blotting检测肾脏上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptorα,Ppara)、促纤维化因子、炎症因子、活化胱天蛋白酶(cleaved caspase-3),以及肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因mRNA或蛋白表达的变化。用Ppara-siRNA转染肾小管上皮细胞,观察淫羊藿苷提前于马兜铃酸干预后PPARα下游线粒体脂肪酸氧化代谢相关指标以及cleaved caspase-3的表达变化。结果·马兜铃酸注射2周结束时和注射结束后2周(造模4周),仅注射马兜铃酸的小鼠血清肌酐及尿素氮水平较对照组均显著升高,肾脏炎症细胞大量浸润,肾小管损伤严重;而提前给予淫羊藿苷干预的小鼠较马兜铃酸组肾功能明显改善,肾脏病理损伤减轻。造模4周时马兜铃酸组肾小管上皮细胞线粒体结构损伤严重,脂肪酸氧化代谢通路相关基因mRNA水平较对照组显著降低,伴巨噬细胞浸润及肾纤维化,提前给予淫羊藿苷干预后上述损伤或指标均明显缓解。在马兜铃酸注射2周结束时给予淫羊藿苷的小鼠血清肌酐和尿素氮水平、肾脏病理损伤、纤维化指标均与马兜铃酸组无明显差异。体外实验中,马兜铃酸可抑制肾小管上皮细胞Ppara mRNA表达,促进cleaved caspase-3、炎症因子及促纤维化因子表达升高,并上调共培养的肾脏成纤维细胞细胞外基质相关基因的表达,而淫羊藿苷提前干预对上述变化有明显的纠正作用。用siRNA敲低肾小管上皮细胞的Ppara后,淫羊藿苷对马兜铃酸抑制脂肪酸氧化代谢及促进细胞凋亡的预防保护作用减弱。结论·淫羊藿苷能预防马兜铃酸诱导的小鼠AKI向CKD转化;它可能是通过改善肾小管上皮细胞线粒体脂肪酸氧化代谢通路(尤其是PPARα)发挥作用。
关键词
淫羊藿苷
急性肾损伤
慢性肾脏病
线粒体
脂肪酸氧化
肾小管上皮细胞
Keywords
icariin
acute kidney injury(AKI)
chronic kidney disease(CKD)
mitochondria
fatty acid oxidation
renal tubule epithelial cell
分类号
R286 [医药卫生—中药学]
下载PDF
职称材料
题名
麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究
被引量:
7
2
作者
高俊丽
刘国香
朱赟洁
戚怡沁
徐艳秋
王巍巍
机构
中国人民解放军第四五五
医院
肾脏科
上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院肾脏科
出处
《四川中医》
2020年第10期62-67,共6页
基金
上海市高级中西医结合人才培养计划(编号:ZY3-RCPY-4-2039)
南京军区医学科技创新项目重大课题(编号:14ZX05)。
文摘
目的:探讨麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用及可能的机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(N组)、模型组(M组)及中药治疗组(Z组),M组及Z组建立DN大鼠模型。Z组予麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭灌胃治疗4周。实验结束时留取血尿及肾脏标本,检测血尿生化指标,HE、Masson染色观察肾脏病理特点及肾小球面积,WT-1染色观察肾小球中足细胞的密度。结果:实验结束时,与N组比较,M组及Z组大鼠体质量显著降低,24h尿量、UACR及BUN水平显著升高(P<0.01)、24h-Upro水平升高(P<0.05);M组TC及TG的水平均升高(P<0.05),Z组TC及TG的水平均升高(P>0.05)。与M组比较,Z组大鼠体重升高,24h-Upro、UACR、BUN及TC水平降低(P<0.05);血TG水平降低(P>0.05),24h尿量增加(P>0.05)。HE及Masson染色提示:Z组大鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增生及血管内膜增厚均减轻,肾小管空泡样变性、间质纤维化及炎性细胞浸润程度显著降低。与N组比较,M组及Z组大鼠肾脏指数显著升高,肾小球截面积显著增加,足细胞的密度显著降低(P<0.01);与M组比较,Z组大鼠的肾脏指数降低,肾小球截面积缩小,足细胞密度升高(P<0.05)。结论:麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤加菟丝子水蛭可有效延缓DN大鼠的病程进展,可能与其改善DN大鼠的血脂及尿蛋白水平,保护足细胞形态及功能,从而减轻肾脏病理损伤程度密切相关。
关键词
糖尿病肾病
麻黄附子细辛汤
苓桂术甘汤
菟丝子
水蛭
WT-1
Keywords
Diabetic nephropathy
Mahuang Fuzi Xixin Decoction
Linggui Zhugan Decoction
Cuscuta
Bloodsucker
WT-1
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
淫羊藿苷对急性肾损伤向慢性肾脏病转化小鼠模型的预防性保护作用
谢林
程烨
郑琦敏
张熙
付莉莉
陈敏
王怡
梅长林
谢静远
顾向晨
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
下载PDF
职称材料
2
麻黄附子细辛汤合苓桂术甘汤治疗糖尿病肾病大鼠的实验研究
高俊丽
刘国香
朱赟洁
戚怡沁
徐艳秋
王巍巍
《四川中医》
2020
7
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