目的:探讨染料木黄酮(Genistein,Gen)与5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导人肝癌M H C C97-L细胞周期阻滞与细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinasesERK)1/2信号通路的关系.方法:MTS法检测细胞增殖;流式细胞术检...目的:探讨染料木黄酮(Genistein,Gen)与5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导人肝癌M H C C97-L细胞周期阻滞与细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinasesERK)1/2信号通路的关系.方法:MTS法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测总ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白表达.结果:Gen与5-FU单用及联用均能抑制肝癌MHCC97-L细胞增殖;Gen诱导细胞S期阻滞少量抑制ERK1/2磷酸化,ERK1/2抑制剂可促进Gen对MHCC97-L细胞的生长抑制作用,而对S期阻滞无明显影响;5-FU单用和二者联用组均阻滞S期细胞,并显著激活ERK1/2磷酸化ERK1/2抑制剂可促进两组药物对MHCC97-L细胞的生长抑制和诱导S期阻滞作用.结论:Gen与5-FU单用及联用均可通过阻滞细胞周期来发挥抗肝癌细胞增殖的作用;抑制ERK1/2通路可抵抗Gen诱导的肝癌细胞S期阻滞,而促进5-FU单用和二者联用组诱导肝癌细胞S期阻滞.展开更多
目的:探讨在染料木黄酮(genistein,Gen)与氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导肝癌MHCC97-L细胞凋亡作用中p42/44丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)对Bax的调控.方法:倒置显微镜观察细胞密度和细胞形态;荧光...目的:探讨在染料木黄酮(genistein,Gen)与氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导肝癌MHCC97-L细胞凋亡作用中p42/44丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)对Bax的调控.方法:倒置显微镜观察细胞密度和细胞形态;荧光显微镜(Annexin V-FITC/PI)检测细胞凋亡及细胞死亡;Western blot检测Bax蛋白表达.结果:倒置显微镜下,所有药物组细胞密度均下降,死亡细胞及碎片散落在培养液中,贴壁细胞皱缩或变形,胞浆透明度下降,可见空泡结构,其中以PD98059+Gen+5-FU组变化最明显;荧光显微镜下,所有药物组均可检测到凋亡和死亡细胞;Western blot检测各组Bax蛋白的相对表达量由高到低依次为Gen+5-F U、G e n、5-F U、P D98059+G e n+5-F U、PD98059+5-FU、PD98059+Gen、PD98059、对照组,PD98059+Gen组的Bax蛋白表达与P D98059组十分接近,且明显低于G e n组;PD98059+5-FU组和PD98059+Gen+5-FU组的Bax蛋白表达介于单用抑制剂组与未用抑制剂预处理的对应药物组之间.结论:Gen、5-FU和Gen+5-FU均能诱导MHCC97-L细胞凋亡,并与上调Bax有关;Gen对Bax的调控与p42/44 MAPK通路关系密切;5-FU和联用组调控Bax需要有p42/44 MAPK通路参与.展开更多
文摘目的:探讨染料木黄酮(Genistein,Gen)与5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导人肝癌M H C C97-L细胞周期阻滞与细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinasesERK)1/2信号通路的关系.方法:MTS法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测总ERK1/2和磷酸化ERK1/2蛋白表达.结果:Gen与5-FU单用及联用均能抑制肝癌MHCC97-L细胞增殖;Gen诱导细胞S期阻滞少量抑制ERK1/2磷酸化,ERK1/2抑制剂可促进Gen对MHCC97-L细胞的生长抑制作用,而对S期阻滞无明显影响;5-FU单用和二者联用组均阻滞S期细胞,并显著激活ERK1/2磷酸化ERK1/2抑制剂可促进两组药物对MHCC97-L细胞的生长抑制和诱导S期阻滞作用.结论:Gen与5-FU单用及联用均可通过阻滞细胞周期来发挥抗肝癌细胞增殖的作用;抑制ERK1/2通路可抵抗Gen诱导的肝癌细胞S期阻滞,而促进5-FU单用和二者联用组诱导肝癌细胞S期阻滞.
文摘目的:探讨在染料木黄酮(genistein,Gen)与氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导肝癌MHCC97-L细胞凋亡作用中p42/44丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)对Bax的调控.方法:倒置显微镜观察细胞密度和细胞形态;荧光显微镜(Annexin V-FITC/PI)检测细胞凋亡及细胞死亡;Western blot检测Bax蛋白表达.结果:倒置显微镜下,所有药物组细胞密度均下降,死亡细胞及碎片散落在培养液中,贴壁细胞皱缩或变形,胞浆透明度下降,可见空泡结构,其中以PD98059+Gen+5-FU组变化最明显;荧光显微镜下,所有药物组均可检测到凋亡和死亡细胞;Western blot检测各组Bax蛋白的相对表达量由高到低依次为Gen+5-F U、G e n、5-F U、P D98059+G e n+5-F U、PD98059+5-FU、PD98059+Gen、PD98059、对照组,PD98059+Gen组的Bax蛋白表达与P D98059组十分接近,且明显低于G e n组;PD98059+5-FU组和PD98059+Gen+5-FU组的Bax蛋白表达介于单用抑制剂组与未用抑制剂预处理的对应药物组之间.结论:Gen、5-FU和Gen+5-FU均能诱导MHCC97-L细胞凋亡,并与上调Bax有关;Gen对Bax的调控与p42/44 MAPK通路关系密切;5-FU和联用组调控Bax需要有p42/44 MAPK通路参与.