下瘀血汤对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的治疗作用及机制

目的探讨下瘀血汤调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)抑制高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法15只雄性C57BL/6小鼠随机分为低脂饮食(LFD)组、HFD组和下瘀血汤-HFD(XYXD)组,每组各5只。测量肝功能指标ALT和AST、血脂代谢指标TG、TC水平;肝组织经过HE染色、油红O染色,观察小鼠组织形态、脂滴沉积;实时荧光定量PCR检测肝组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及NLRP6表达水平;Western Blot检测NLRP6、NF-κB和NF-κB p65蛋白水平;免疫组化检测NLRP6和CD68表达。棕榈酸(PA)、脂多糖(LPS)和下瘀血汤含药血清处理鼠Raw264.7细胞,检测炎症情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与LFD组比较,HFD组血清ALT、AST和TC、TG水平显著升高(P值均<0.05)。肝组织病理学显示,HFD组肝脂肪变性明显,NAS评分显著升高(P<0.05);实时荧光定量PCR结果显示,IL-1β、IL-18等炎症相关因子显著升高,NLRP6表达显著下调(P值均<0.05)。免疫组化显示NLRP6表达与巨噬细胞标志物CD68重合。Western Blot显示,NLRP6表达下调后,磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)显著上调(P<0.05)。与HFD组相比,下瘀血汤可有效改善HFD小鼠的肝脏炎症,上调NLRP6的表达,下调p-NF-κB p65(P<0.05)。PA处理Raw264.7细胞后下调NLRP6,促进炎症进展(P<0.05);下瘀血汤处理可上调NLRP6,抑制炎症和NF-κB(P<0.05)。结论下瘀血汤可显著改善HFD诱导NAFLD小鼠模型的肝脂肪变性和炎症,调控NLRP6/NF-κB减轻巨噬细胞活化可能是其作用机制之一。

平足蛋白(PDPN)在肝星状细胞活化以及肝纤维化中的作用分析

目的探究平足蛋白(PDPN)在肝星状细胞活化以及肝纤维化中的作用,并对其机制进行初步探讨。方法收集2019年9月—2022年6月首次就诊于上海中医药大学附属普陀医院感染科的75例慢性乙型肝炎患者肝活检组织样本,实时定量PCR(RT-PCR)和免疫组化检测PDPN在不同肝纤维化分期患者肝组织中的表达。12只雄性C57/BL6小鼠随机分为正常组和模型组,每组各6只。模型组腹腔注射含10%CCl_4,对照组注射等体积橄榄油共6周,HE染色、天狼星红染色观察肝组织病理学变化,分离小鼠肝脏原代细胞,检测PDPN mRNA在各类型细胞中表达;使用PDPN蛋白处理小鼠原代肝星状细胞,并使用NF-κB抑制剂BAY11-7082处理,分析PDPN诱导肝星状细胞炎症因子表达情况。计量资料2组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。两组数据相关性分析采用Spearman相关性分析法。结果慢性乙型肝炎患者肝活检样本中,PDPN mRNA在正常肝脏中表达较低,S3、S4期肝组织中表达显著升高,与正常肝组织比较差异均有统计学意义(P值均<0.001);免疫组化染色结果显示,PDPN阳性表达主要集中在纤维间隔及肝窦,S4期肝组织PDPN阳性面积比S0期表达显著升高(t=8.892,P=0.001)。正常组小鼠中PDPN主要在肝窦表达少许,在CCl_4模型小鼠中PDPN表达显著升高(t=0.95,P<0.001),主要在纤维间隔表达;RT-PCR结果显示,PDPN mRNA在CCl_4模型小鼠中显著升高(t=11.25,P=0.002)。与肝细胞、肝星状细胞、Kupffer细胞和肝内胆管细胞相比,PDPN在肝窦内皮细胞中明显高表达(F=20.56,P<0.001);PDPN蛋白处理小鼠原代肝星状细胞15 min,炎症相关因子TNF-α、CCL3、CXCL1和CXCR1的m RNA表达,与对照组相比均显著升高(P值均<0.05),BAY11-7082(NF-κB信号抑制剂)处理后,上述炎症指标水平均明显下降(P值均<0.05)。结论在肝纤维化中主要表达在肝窦内皮细胞的PDPN增加,其通过NF-κB信号调节肝星状细胞活化,促进肝纤维化进展。

陈建杰教授使用二术清解汤治疗晚期肝癌经验

肝癌是指一种发生于肝脏的恶性肿瘤,全球的发病率为9.5/10万,位列所有肿瘤的第5名,死亡率为8.7/10万,位列所有肿瘤的第3名,严重危害人类健康,对社会经济也造成了重大负担。2022年中国肝癌发病率为18.7/10万,死亡率为17.2/10万,均远高于全球平均水平,且死亡率为亚洲第一[1]。

丙氨酸氨基转移酶持续正常的慢性乙型肝炎病毒感染者的肝脏病理与临床关系

目的探讨血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平持续正常的慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者的肝脏组织学的炎症分级和纤维化分期，并分析引起肝脏组织学改变的相关因素。方法选择经肝活组织检查的61例ALT水平持续正常的慢性HBV感染者，根据肝组织不同炎症及纤维化分组，对比各组性别、年龄、HBV-DNA及血清HBeAg阳性率表达差异。结果61例患者中，肝脏炎症分级以G2为主，占40例（66％），与G1组相比，G2与G3组年龄逐渐上升，且有显著的统计学差异（P〈0．05）；血清HBV-DNA水平随着炎症分级增加而下降，且G2组与G1组比较有显著的统计学差异（P〈0．05）；纤维化分期以s1为主，占32例（52％），仍有7例（11％）患者达s2，3例（5％）达s3；年龄分布以s3的年龄最大，与s0组相比，有显著的统计学差异（P〈0．05）；与s0组比较，S1及s2组血清HBV-DNA水平差异均有显著的统计学差异（P〈0．05）；血清HBeAg的表达S0、S1期以阳性为主，s2、s3期以阴性为主，各组间比较差异有显著的统计学意义（P=0．001）。结论无论病毒载量高低、e抗原状态如何，对于ALT水平持续正常的慢性HBV感染者，仍有66％的患者炎症活动度达G2，有16％的患者纤维化程度达s2甚至s3。因此，对可检测到病毒载量的持续ALT正常的慢性HBV感染患者仍应考虑行肝脏活检，以免延误抗病毒治疗时机。

慢性乙型肝炎肝纤维化中医证型与肝组织病理、FibroScan、FibroTouch、APRI相关性概述

慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)是一种发病率高、病程长、难治愈、易反复的常见病。而我国则是该病的中流行地区,肝纤维化是西医的病理组织学概念,CHB可发展成肝硬化、甚至肝癌,成为终末期肝病的主要死因。肝纤维化贯穿CHB发展的始末,大量的动物和细胞实验、临床研究证实,肝纤维化是可以减轻或逆转的,若进展为肝硬化则难以逆转。通过探索CHB肝纤维化中医证型与肝组织病理、FibroScan、FibroTouch、APRI的相关性,发现CHB肝纤维化常见的肝郁脾虚证、湿热蕴结证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证和瘀血阻络证之间的肝组织病理和FibroScan、FibroTouch、APRI肝脏硬度值均存在差异,其中瘀血阻络证较其他证型差异显著(P<0.05),瘀血阻络证肝纤维化程度更高,这些研究为CHB中医辨证分型提供了客观证据,有利于探索优化中西医结合治疗CHB肝纤维化方案。本文将CHB肝纤维化中医证型与肝组织病理、FibroScan、FibroTouch、APRI相关性概述如下。

ALT正常慢性HBV感染者肝组织病理与年龄、ALT和HBV DNA水平相关性研究

目的分析ALT正常慢性HBV感染者的肝组织病理学特点,并探讨其与性别、年龄、ALT和HBV DNA水平的相关性。方法选取ALT正常的慢性HBV感染者114例,行B超定位下肝穿刺组织活检,观察肝组织炎症分级及纤维化分期,并分析其与性别、年龄、ALT和HBV DNA水平的相关性。组间比较采用χ^2检验,相关性分析采用回归分析。结果(1)慢性HBV感染者的肝组织炎症分级与纤维化分期相关(P<0.05),炎症分级越高,纤维化分期也越高。(2)114例感染者肝组织病理:炎症程度≥G2者101例(88.59%),纤维化程度≥S2者63例(55.26%)。(3)感染者的性别与肝组织炎症及纤维化程度无相关性(P>0.05)。(4)将感染者按年龄分组,第一组<30岁,第二组30~40岁,第三组>40岁,三组感染者的年龄与肝组织炎症分级无相关性(P>0.05)、与纤维化分期存在相关性(P<0.05),年龄越大肝组织纤维化程度越高。(5)ALT水平与肝组织炎症分级及纤维化分期相关(P<0.05),ALT水平越高,肝脏炎症及纤维化程度越高。(6)将114例感染者按HBV DNA水平分组,第一组HBV DNA<10^4,第二组HBV DNA:10^5~10^7拷贝/mL,第三组HBV DNA>10^8,三组之间肝组织炎症分级和纤维化分期差异无统计学意义(P>0.05)。结论慢性HBV感染者的肝组织炎症分级越高,纤维化分期也越高;大多数ALT正常慢性HBV感染者的肝组织炎症分级或纤维化分期都在中等程度及以上(≥G2者占73.7%或≥S2者占75.4%);感染者的年龄越大、ALT水平越高,肝组织纤维化程度也越高。

非酒精性脂肪性肝病的中医研究进展

从病名、病因病机、临床治疗、实验研究等方面综述非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的中医研究进展。本病归属于中医学"肝癖"的范畴,其发病与情志、饮食、劳逸、久病迁延等因素相关,病机虚实相兼、寒热错杂,由肝郁、脾虚、湿聚、气滞、血瘀、痰凝等多种病理因素相互作用所致,攻补兼施是其基本治则。目前存在疾病不同阶段病机研究不够深入、缺乏统一的辨证标准及行之有效的科学评估体系等问题,建议依托代谢组学、基因组学等新兴系统生物学技术平台,拓宽中医药治疗NAFLD的物质基础及作用机制研究,助力NAFLD中医诊治的标准化、系统化及规范化。

陈建杰运用二术清解方治疗原发性肝癌的临床观察

目的:观察二术清解方对原发性肝癌的治疗效果。方法:采用回顾性分析方法,收集陈建杰2005—2021年在现代医学治疗的基础上运用二术清解方治疗的68例肝癌患者设为中医治疗组,并设立仅运用现代医学治疗的原发性肝癌患者62例为对照组,观察2组在血清生化学改善、抑制原发性肝癌患者肿瘤生长和患者主要症状控制等方面的差异。结果:与对照组相比,中医治疗组临床总有效率及疾病控制率明显升高;2组均能降低患者ALT、AST和AFP水平,与对照组相比,中医治疗组在ALT、AST及AFP下降幅度上明显优于对照组,Alb明显上升,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,中医治疗组在神疲乏力、面色晦暗和腹胀的改善率上明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:二术清解方在血清生化学改善、抑制原发性肝癌患者肿瘤生长、不良反应发生率和患者主要症状控制方面有显著疗效,对中医药治疗原发性肝癌有一定借鉴作用。

扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒性感染疗效及对免疫功能的影响

【目的】探究扶正和解方(由黄芩、金银花、藿香、柴胡、苍术、生甘草等组成)治疗儿童呼吸道病毒性感染的疗效及对炎症因子和免疫功能的影响。【方法】将203例呼吸道病毒甲型H1N1感染患儿随机分为观察组101例和对照组102例。2组患儿均给予退热、维持正常水电解质、保障足够睡眠等常规治疗,在此基础上,对照组患儿给予利巴韦林颗粒及布洛芬颗粒治疗,观察组在对照组的基础上给予扶正和解方治疗,疗程为7 d。观察2组患儿治疗前后中医证候积分、免疫学指标和炎症因子水平的变化情况,并比较2组患儿的临床疗效、临床症状消退时间和不良反应发生情况。【结果】(1)脱落情况:研究过程中,观察组脱落1例,对照组脱落2例,最终观察组和对照组各有100例患儿纳入研究。(2)疗效情况:治疗7 d后,观察组的总有效率为93.00%(93/100),对照组为88.00%(88/100),观察组的疗效优于对照组,但组间比较,差异无统计学意义(χ2=1.454,P=0.228)。(3)中医证候积分:治疗后,2组患儿的主症积分、次症积分和总积分均较治疗前降低(P<0.05),且观察组的降低幅度均明显优于对照组(P<0.01)。(4)临床症状消退时间:治疗后,观察组患儿的发热、咳嗽、咳痰、咽痛等临床症状消退时间均较对照组明显缩短(P<0.01)。(5)免疫学指标:治疗后,2组患儿的T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+水平均较治疗前升高(P<0.05),CD8+、B细胞水平均较治疗前降低(P<0.05),且观察组对CD3+、CD4+水平的升高幅度及对CD8+、B细胞水平的降低幅度均明显优于对照组(P<0.01)。(6)炎症因子水平:治疗后,2组患儿的血清淀粉样蛋白(SAA)、C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、可溶性白细胞介素2受体(SIL-2R)、白细胞介素6(IL-6)水平均较治疗前明显降低(P<0.05),白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)水平均较治疗前明显升高(P<0.05),且观察组对血清SAA、CRP、TNF-α、SIL-2R、IL-6水平的降低幅度及对血清IL-2、IFN-γ水平的升高幅度均明显优于对照组(P<0.01)。(7)观察组的不良反应发生率为2.00%(2/100),低于对照组的8.00%(8/100),但组间比较,差异无统计学意义(χ2=3.789,P=0.052)。【结论】扶正和解方治疗儿童呼吸道病毒甲型H1N1感染疗效确切,可有效改善患儿中医证候,调控炎症反应,提高机体免疫功能,加快临床症状缓解并缩短病程。

干扰素-α联合柴胡皂苷对免疫性肝损伤小鼠血清T淋巴细胞亚群和肝组织细胞因子的影响

目的观察干扰素-α联合柴胡皂苷对免疫性肝损伤小鼠血清T淋巴细胞亚群和肝组织细胞因子水平的影响。方法小鼠随机分为正常对照组(正常组)、模型组、干扰素组、柴胡皂苷组、联合组(干扰素+柴胡皂苷)5组,各组分别给药2天并注射ConA后8、24h采集标本,检测外周血淋巴细胞亚群,肝组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、白细胞介素-10(in-terleukin-10,IL-10)水平,血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性和观察肝脏组织病理改变。结果 (1)与正常组比较,模型组肝组织炎症坏死显著,血清ALT、AST明显升高,同时24h外周血CD4+及CD8+T淋巴细胞比例和肝组织IL-10水平明显降低(P<0.01),肝组织IL-18、TNF-α水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。(2)与模型组比较,3个用药组肝组织散见点、片状坏死,血清ALT、AST活性显著降低(P<0.01),同时外周血CD4+及CD8+T淋巴细胞比例和肝组织IL-10水平明显升高(P<0.01,P<0.05),而IL-18、TNF-α水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。(3)联合组24hCD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞比例较干扰素组明显升高,8h和24h的IL-18水平较干扰素组明显降低,24hTNF-α水平较干扰素-α组显著降低(P<0.05)。结论干扰素联合柴胡皂苷能有效发挥抗免疫性肝损伤作用。

桃红四物汤对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠模型的干预作用及其机制

目的探讨桃红四物汤对CCl_(4)诱导肝纤维化小鼠模型的干预作用及其作用机制。方法24只雄性C57/BL6小鼠随机分为对照组、模型组和桃红四物汤组,每组8只。模型组和桃红四物汤组小鼠腹腔注射10%CCl_(4),第3周开始给予桃红四物汤灌胃给药4周,检测肝功能(ALT、AST),观测肝组织病理形态学。实时荧光定量PCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、透明质酸合成酶-2(HAS-2)、Ⅰ型胶原(Col1)mRNA的表达,蛋白免疫印迹法检测α-SMA、Col1及HAS-2蛋白的表达。分离小鼠原代肝星状细胞(HSC),应用siRNA沉默HAS-2,检测其对HSC激活的影响。计量资料两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,组内进一步两两比较采用SNK或LSD-t检验。结果与正常组相比,模型组血清肝功能指标ALT、AST水平显著升高,桃红四物汤组小鼠血清ALT、AST水平均显著下降(P值均<0.01)。病理学染色显示:模型组炎症细胞浸润明显,增生的胶原纤维形成纤维间隔;桃红四物汤组胶原纤维间隔较疏松及炎症细胞浸润减轻。与模型组相比,桃红四物汤组α-SMA、Col1 mRNA和蛋白的表达水平均显著降低(P值均<0.001)。与正常组比较,模型组肝组织中HAS-2 mRNA表达水平显著升高(t=6.14,P<0.05),桃红四物汤组HAS-2蛋白表达水平(0.29±0.10)较模型组(1.00±0.12)明显减少(t=70.73,P<0.001)。siRNA沉默HAS-2,TGFβ处理后(Si HAS-2+TGFβ组)α-SMA、Col1 mRNA表达水平较NC+TGFβ组显著降低(P<0.01)。结论桃红四物汤通过抑制HAS-2对CCl 4致小鼠纤维化有显著治疗作用。

α干扰素联合柴胡颗粒治疗慢性乙肝40例疗效初步观察

目的探讨α干扰素联合柴胡颗粒抗病毒的可行性及其机制。方法用α干扰素联合柴胡颗粒治疗慢性乙型肝炎40例并与单用干扰素组对照,观察两组治疗在保肝、抗病毒、副作用方面的差异。结果联合用药组明显减轻干扰素不良反应(P<0.01)、降低ALT(P<0.05)与干扰素组比较有显著性差异;HBeAg、HBVDNA阴转率及抗-HBe阳转率分别为47%,35%,37%,与干扰素组比较,有差异显著性(P<0.05)。结论干扰素联合柴胡颗粒,能改善肝功能,抑制病毒复制,减轻用药反应,提高整体治疗慢性乙型肝炎的疗效。

慢性肝病患者血清胆碱酯酶水平及其临床意义

目的探讨血清胆碱酯酶(CHE)在慢性肝病中的临床意义。方法选取176例慢性肝病患者进行血清CHE检测,并对其与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白蛋白、总胆红素、胆固醇水平进行相关研究。结果慢性肝炎组、肝硬化和肝癌组的血清CHE明显低于正常对照组,其中肝硬化和肝癌组降低的更为明显(P<0.01);Child-PughC级的肝硬化患者血清CHE水平最低,并与Child-PughA级和B级均有显著差异(P<0.05)。结论CHE可敏感地反映慢性肝病患者肝脏损伤程度,动态观察CHE的变化对判断慢性肝病预后有重要意义。

上海市一区级医院老年患者尿路致病性大肠埃希菌分子分型和耐药性分析

目的：了解上海市普陀区老年患者分离的尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）的分子流行病学特征和耐药特征。方法收集上海中医药大学附属普陀医院2013年1月至2015年3月自泌尿道感染住院老年患者分离的72株 UPEC ，进行多位点序列分型（MLST ），检测β‐内酰胺酶基因和质粒介导的喹诺酮耐药基因（PMQR），检测 gyrA 和 parC 基因喹诺酮耐药决定区（QRDR）基因突变，并进行体外药物敏感试验。均数比较采用 t 检验，率的比较采用χ2检验或 Fisher 确切概率法。结果UPEC 对环丙沙星、头孢噻肟、复方磺胺甲口恶唑的耐药率分别为76．4％、73．6％、65．3％，而对亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、哌拉西林‐他唑巴坦仍保持高度敏感。72株 UPEC 中，55株（76．4％）为超广谱β‐内酰胺酶（ESBL）阳性菌株，其中49株（68．1％）携带 blaCTX‐M 基因。在55株对环丙沙星耐药的菌株中，51株（92．7％）UPEC gyrA 和 parC 基因 QRDR 均有3～4个位点的错义突变，突变热点为 gyrA的83位、87位氨基酸和 parC 的80位、84位氨基酸。72株 UPEC 中最常见 ST 型为 ST131（18／72，25．0％）、ST1193（7／72，9．7％）、ST405（7／72，9．7％）、ST38（5／72，6．9％）和 ST648（3／72，4．2％）。ST131为导致社区获得性泌尿道感染的优势 ST 型。 ST131、ST405、ST38和 ST648表现出多重耐药特性，大多数为产 CTX‐M 型 ESBL 。结论本研究的社区老年患者携带的 UPEC 中存在以 ST131克隆为代表的多重耐药菌株流行，需要加强监测，预防其广泛流行。

阿德福韦酯联合苦味叶下珠片对HBV阳性肝硬化患者IL-7、病毒载量及巨核细胞的影响

目的探讨阿德福韦酯(ADV)联合苦味叶下珠片对乙肝病毒(HBV)阳性肝硬化患者白细胞介素(IL)-7、病毒载量及巨核细胞的影响。方法 100例HBV阳性肝硬化患者按随机数表法分为观察组和对照组,每组50例,观察组采用ADV联合苦味叶下珠片进行治疗,对照组采用ADV进行治疗,两组均治疗12个月,对比两组治疗后血清细胞因子IL-7、病毒载量及巨核细胞的水平。结果治疗后12个月观察组IL-7水平明显高于对照组(P<0.05);观察组3、6、9个月的HBV-DNA含量明显低于对照组(P<0.05);观察组12个月的HBV-DNA阴转率、HBV表面抗原(HBe Ag)阴转率、ALT复常率,均明显高于对照组(P<0.05);治疗后12个月观察组CD41水平明显高于对照组(P<0.05)。结论 HBV阳性肝硬化患者采用ADV联合苦味叶下珠片进行治疗,能有效改善血清细胞因子IL-7水平失衡,帮助患者恢复免疫能力,除此以外,还能抑制病毒的复制,降低患者的病毒载量,防止细胞受损,降低其对巨核细胞的增殖抑制作用。

扶正化瘀胶囊对慢性乙型肝炎血清细胞因子和炎症纤维化指标的影响

目的观察扶正化瘀胶囊对慢性乙型肝炎患者血清相关细胞因子和炎症纤维化指标的影响。方法选择慢性乙型肝炎患者112例,随机分为治疗组和对照组,患者均给予常规保肝治疗及对症处理,治疗组56例患者同时给予扶正化瘀胶囊口服,治疗24w后,采用固相化学发光酶免疫分析法检测患者血清TNF-α、IL-6和IL-2、IL-10水平;Bayer公司ADVIATM1650全自动生化检测仪检测肝功能;放射免疫法检测血清HA、PC-Ⅲ、LN、IV-C水平。结果(1)治疗组炎症纤维化相关细胞因子TNF-α和IL-6较治疗前显著减少(P<0.05),而IL-2和IL-10明显增加(P<0.05),其中TNF-α和对照组相比降低明显(P<0.05),IL-2较对照组升高显著。(2)治疗组ALT、AST、GGT、Tbil等肝功能指标和肝纤维化指标HA、PC-Ⅲ、LN、IV-C均较治疗前明显降低(P<0.05),和对照组相比显著下降(P<0.05),而Alb则较治疗前明显升高(P<0.05)。结论扶正化瘀胶囊对慢性乙型肝炎患者血清相关炎症纤维化细胞因子具有调节作用。同时能改善患者的肝功能、减轻肝纤维化。

丹参酚酸B和山楂黄酮合用对游离脂肪酸诱导的大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用

目的研究丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用及其机制。方法采用肝脏原位胶原酶灌注法分离大鼠原代肝细胞,油酸:棕榈酸=2:1造模。原代肝细胞和HepG2均分为正常对照组、模型组、模型+丹参酚酸B组、模型+山楂黄酮组、模型+丹参酚酸B+山楂黄酮组、模型+SP600125组、丹参酚酸B组、山楂黄酮组、丹参酚酸B+山楂黄酮组、SP600125组、DMSO对照组。游离脂肪酸刺激原代肝细胞的浓度为250μmol/L、刺激HepG2的浓度为500μmol/L;丹参酚酸B的浓度为1μmol/L;山楂黄酮的浓度为5μg/mL;SP600125的浓度为10μmol/L。观察1油红O染色:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内脂滴变化的影响;2ELISA法:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;3高内涵筛选Hoechst33258染色:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响;4Western blot:丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内p-JNK表达的影响。结果 1油红O染色显示:与正常对照组比较,游离脂肪酸作用于原代肝细胞、HepG2细胞24 h后,细胞内脂滴含量显著增加(P均<0.01)。丹参酚酸和山楂黄酮可显著减少游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞内脂滴的含量(P<0.01,P<0.05)。2ELISA检测结果:与正常对照组相比游离脂肪酸组原代肝细胞及HepG2细胞吸光值[Absorbance(A405 nm-A490nm)]显著增高,细胞凋亡明显(P均<0.01);丹参酚酸B和山楂黄酮显著抑制游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞凋亡(P均<0.01)。3高内涵筛选Hoechst33258染色:与正常对照组比较,游离脂肪酸组细胞核平均荧光强度值及凋亡率明显增高(P均<0.01)。丹参酚酸B和山楂黄酮显著降低游离脂肪酸刺激的原代肝细胞细胞核平均荧光强度值及凋亡率(P均<0.01)。HepG2细胞检测结果与原代肝细胞趋势一致。4Western blot结果:与正常对照组比较,游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h时可显著促进p-JNK的表达(P均<0.01)。丹参酚酸B和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h时p-JNK的表达有显著抑制作用(P均<0.01)。HepG2细胞p-JNK结果与原代肝细胞趋势一致。结论 1丹参酚酸B和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内脂滴增加及肝细胞凋亡。2丹参酚酸B和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内JNK的活化。二者是丹参酚酸B和山楂黄酮合用防治非酒精性脂肪性肝炎的重要机制。

彩色超声与慢性肝炎肝纤维化分期的相关性分析

目的探讨超声诊断慢性乙型肝炎(CHB)患者代偿期肝硬化的价值。方法 2010年1月至2015年1月行肝活组织检查的CHB患者226例,收集患者B型超声资料,利用Logistic回归分析与代偿期肝硬化程度相关的指标,采用受试者工作特征曲线下面积(AUROC)评价B型超声诊断代偿期肝硬化的价值。结果超声指标中SWV、门静脉主干内径、胆囊壁厚度、脾脏长径、脾脏厚度、脾脏面积、脾静脉内径、门静脉最大流速共8项指标与肝脏炎症分级和纤维化分期均相关。其中,SWV、门静脉主干内径、脾脏长径、门静脉最大流速、脾静脉内径与组织学代偿期肝硬化独立相关,AUC均>0.7。结论超声的部分影像学指标对预测组织学代偿期肝硬化有潜在的价值。