Zinc-ZIP8-MTF1信号通路调控骨性关节炎发生、发展及中医药作用机制的研究进展

综述锌离子-锌离子转运蛋白8-金属调节转录因子1(Zinc-ZIP8-MTF1)信号通路调控骨性关节炎发生发展及中医药作用机制的研究进展。Zn^2+稳态、锌转运蛋白以及锌离子依赖性转录因子与软骨损伤密切相关,Zinc-ZIP8-MTF1信号通路可调控骨性关节炎的发生、发展。目前中医药领域的相关研究局限于对Zn^2+水平的调控,未涉及对ZIP8和MTF1的影响,因此研究中医药对Zinc-ZIP8-MTF1信号通路的影响对治疗骨性关节炎有重要意义。

大鼠颈椎病实验模型的设计与建立

目的：建立一种理想的颈椎病实验模型。方法：３０只大鼠随机分为实验模型组与对照组，每组１５只。实验模型组借助手术方法直接切除大鼠颈背部伸肌群，对照组行伪手术。造模术后２月、４月、６月选择实验模型组、对照组大鼠各５只，取其颈椎（Ｃ３～７）作组织形态学观察，并相互比较。结果：实验模型组大鼠颈椎间盘退变较对照组明显加快、加重，出现与人类颈椎病相类似的病理改变。结论：颈部肌肉软组织即动力平衡因素在颈椎病发病机理中意义重大。

益气化瘀方对大鼠腰神经根损伤后花生凝集素结合分子和施万细胞的作用

目的:研究大鼠L5神经根损伤后,益气化瘀方对神经肌肉接头部花生凝集素结合分子(peanutagglutinin-bindingmolecules,PNA-BMs)和施万细胞(Schwann'scell,Sc)的作用。方法:大鼠L5神经根损伤后,给与益气化瘀方治疗。于用药后第10、20、30、60天,采用免疫组织化学和激光共聚焦扫描显微镜技术。观察PNA-BMs及作为Sc标记的S-100在大鼠比目鱼肌中的分布。使用NIH图像分析技术,定量测定PNA-BMs与S-100的重叠面积。结果:被PNA识别的细胞外基质(extra-cellularmatrix,ECM)在Sc延伸过程中起着重要的导向作用。益气化瘀方对Sc在神经肌肉接头部的聚集、出芽、延伸,以及与PNA-BMs的重叠面积均明显优于对照组。结论:益气化瘀方能明显促进ECM和Sc的生长,从而加速神经再生修复进程。

酶消化法体外分离培养的大鼠嗅鞘细胞形态及表型特征

目的:目前国内外研究介绍的嗅鞘细胞培养方法存在繁杂或重复性差的问题,不利于实际应用。为此实验应用酶消化法体外分离培养大鼠嗅鞘细胞,观察其形态学及表型特征。方法:实验于2005-11/2006-03在上海中医药大学附属龙华医院脊柱病研究所完成。①选取新生1周龄雄性SD大鼠1只,浸入体积分数为0.75的乙醇中3min,碘伏消毒。打开前颅,暴露嗅球,完整取下两个嗅球,放入4℃预冷的DMEM抗菌液中清洗2遍,洗掉嗅球表面的血液等杂质,剥下嗅球被膜,将嗅球用眼科剪剪碎,加入质量浓度为2.5g/L的胰酶,在37℃孵育箱磁力搅拌下孵育15min,DMEM终止消化。细胞液过100μm细胞筛,离心去除上清液,用DMEM稀释细胞浓度至1×109L-1,种植于无包被处理的6孔细胞培养板内常规培养。按差速贴壁法在培养18～20h后吸出细胞悬液,重新种植于包被神经生长因子低亲和力受体p75的6孔细胞培养板内。观察细胞生长情况,每2～3d换液1次,培养14d。②将培养不同时间的嗅球成鞘细胞于倒置显微镜、透射电镜下观察其形态变化,并行苏木精-伊红染色。使用免疫组化法检测嗅鞘细胞的特征性标志神经生长因子低亲和力受体p75的表达情况,阳性表达为棕黄色,无着色为阴性。结果:①倒置显微镜形态学观察:差速贴壁培养第2天可见有较多嗅鞘细胞贴壁生长,细胞突起较短,胞体较大,透亮度一般,成团或散在生长,较难辨认细胞的形态。5～6d可见较典型的嗅鞘细胞形状,主要以梭形和多突起细胞为主,细胞立体感强、透亮、杂质细胞较少、本底清楚,亦可见有少量成纤维细胞开始生长。9d时嗅鞘细胞数量明显增加,其生长方向呈较一致的条索状。至14d无论在细胞数量及质量上都呈明显的降低趋势。②苏木精-伊红染色结果:细胞多呈梭形,还可见扁平细胞,核为圆形或椭圆形,有时见双核,胞浆充实无空泡。③透射电镜形态学观察:细胞形态多为双极梭形,少数为3极,核不规则,核膜明显,可见核仁,染色质均匀分布于核中,异染色质可在核膜下形成块状结构,胞体表面有伪足样短突起,胞浆内有丰富的粗面内质网系统及线粒体。胞膜有时可见伪足样突起形成皱褶。④神经生长因子低亲和力受体p75免疫组化检测结果:大鼠嗅鞘细胞神经生长因子低亲和力受体p75免疫反应呈阳性。结论:酶消化法体外分离培养的大鼠嗅鞘细胞表达特征性标志神经生长因子低亲和力受体p75。

益气化瘀方对大鼠腰神经根神经再生修复过程的影响(英文)

目的:探讨大鼠L5神经根受压后,益气化瘀方在神经再生修复过程中对神经肌肉接头部神经元的作用和表现。方法:采用多克隆蛋白基因产物9.5(proteingeneproduct9.5,PGP9.5)作为神经元标记,大鼠L5神经根受压后,给予益气化瘀方灌胃,分别于术后10,20,30和60d取比目鱼肌,用免疫组织化学方法结合激光共聚焦扫描显微技术,观察神经肌肉接头部末梢神经再生修复过程。α-bungarotoxin(α-BTX)荧光结合剂显示运动终板,NIH图像分析技术测定末梢神经与运动终板重叠面积。结果:肌肉失神经支配后,益气化瘀方组的末梢神经在神经肌肉接头部的聚集,出芽及延伸均明显早于对照组。神经再生修复期间,末梢神经与运动终板的重叠速度和范围以及神经肌肉接头的再构筑,益气化瘀方组亦同样明显优于对照组。结论:益气化瘀方能促进神经元的增生及提高其再生功能,加快神经肌肉接头的重建及明显缩短神经再生修复的进程。

葛根汤加减治疗颈椎病102例临床观察

以《伤寒论》葛根汤为基础方加味治疗各型颈椎病102例。结果:总有效率93.1%。提示:以葛根汤为基础加减治疗各型颈椎病能明显改善颈椎病的症状。

痉证及痿证中药方对大鼠脊髓持续性压迫损伤局部ET-3mRNA表达的影响

目的:研究大鼠脊髓持续性压迫后缩血管因素ET-3mRNA的改变,探讨痉、痿证方对大鼠脊髓持续性慢性损伤局部ET-3mRNA表达的影响。方法:将雄性中年大鼠随机分为假手术组、轻压、中压及重压模型组和轻、中、重压的痉证方、痿证方治疗组。采用大鼠颈椎前路螺钉压迫颈脊髓,螺钉留置持续压迫30d以产生慢性损伤,用RT-PCR方法检测受压局部ET-3mRNA表达变化。结果:正常脊髓组织中有ET-3mRNA表达,脊髓受压后ET-3mRNA表达明显增高,模型组与假手术组相比各组均P<0·01;ET-3mRNA表达增高程度与压迫程度有关,与轻压组相比,中、重压组差异具有显著性意义,P<0·01,重压与中压组相比,差异具有显著性意义,P<0·01;痉、痿证方干预后,增高的ET-3mRNA明显降低,与模型组相比,痉、痿证方组有统计学差异,P<0·01。结论:痉、痿证中药方对增高的ET-3mRNA有明显的降低作用。

嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤的治疗一直是医学界的难题。脊髓损伤后神经元轴突再生困难,同时神经胶质瘢痕阻碍再生轴突的通过。嗅鞘细胞是一种特殊的神经胶质细胞,具有中枢神经系统(CNS)星形胶质细胞和外周雪旺氏细胞的特性,许多基础与临床研究发现嗅鞘细胞是神经系统中具有促进神经轴突再生,引导轴突正确生长的独特细胞,取得了一定的成果,为脊髓损伤的修复带来了希望。

腰神经根损伤后神经细胞黏附分子在神经肌肉接头部的表达

目的 研究大鼠腰神经根损伤后 ,神经细胞黏附分子(N CAM )在神经肌肉接头部的表达。方法 采用免疫组织化学方法和激光共聚焦显微扫描技术 (Confocallaserscaningmicroscopy) ,观察了大鼠胚胎期 ,出生后 14d ,成年期以及L5神经根受压后 10、2 0和 30d ,大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部N CAM的分布变化。结果 大鼠胚胎期 ,肌管的表面和神经肌肉接头部N CAM呈强烈着染 ,在发育过程中其浓度逐渐减退 ,至成年肌肉时几乎消失。而当肌肉失神经支配后可导致N CAM重新再现。结论 N CAM在肌肉中的表达是通过神经支配状况调节的。

加味补中益气汤治疗颈性眩晕400例

对用加味补中益气汤治疗的 4 0 0例颈性眩晕患者采用回顾性临床疗效分析。结果 :治疗 4周后治愈 92例 ,显效 2 17例 ,有效 72例 ,无效 19例 ,总有效率达 95 3%

膝骨性关节炎病程与患侧踇外翻的相关性

目的探究膝骨性关节炎患者病程与患侧踇外翻严重程度的相关性。方法将2011年3月至2017年10月在云南省中医医院骨科住院部(35例)及昆明市中医医院骨科住院部(52例)诊断为踇外翻及同侧KOA并符合纳入标准的87例患者纳入研究。依据KOA分期将87例研究对象分为I期组17例、II期组35例、III期22例、IV期13例;根据正常胫股解剖角得膝内翻组患者33例、膝外翻组患者23例;对比不同KOA分期组及内、外翻2组患者间HVA、IMA、PASA及DASA的差异。结果 4个KOA分期组比较:与I期组、II期组比较III期、IV期组HVA较大,P<0.05;IMA:II期组显著大于I期组,P<0.01,与II期组比较,III期组、IV期组IMA较大,P<0.05; PASA:II期组显著大于I期组,P<0.01,II期组、III期组、IV期组无差异;DASA:II期组显著大于I期组,P<0.01,II期组、III期组、IV期组无差异。膝内翻组与膝外翻组比较:膝内翻组HVA(28.7±2.8) vs (33.5±3.5),平均值显著较小,P<0.01, IMA (12.7±2.5) vs (14.3±2.7)、PASA (10.1±2.5)vs (11.6±2.2)、DASA (11.7±2.1 VS 12.9±2.3)较小,P<0.05。与膝内翻组比较,膝外翻组III、IV期KOA患者比例较高(36.3%vs 56.5%),P<0.05。结论踇外翻与膝骨性关节炎两者之间具有一定的正相关性,而对于膝外翻膝骨性关节炎患者来说,这种相关性更为明显。

Genistein、Na_3Vo_4对椎间盘软骨细胞作用效应的研究

目的探讨染料木黄酮(Genistein)和正钒酸钠(sodium orthovanadate,Na3Vo4)对椎间盘软骨终板软骨细胞的作用。方法采用酶消化法培养大鼠椎间盘软骨终板软骨细胞,将不同浓度的Genistein(15μmol/L、35μmol/L、55μmol/L)、Na3Vo(410μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)加入到培养的第Ⅲ代软骨细胞中,培养7d;MTT法检测软骨细胞增殖率,RT-PCR检测Ⅱ型、Ⅸ型胶原和Aggrecan mRNA的表达,定量RT-PCR检测IGFR、PTPn1 mRNA的表达。结果干预7d后,15μmol/L Genistein组各项指标与模型组比较变化不明显(P>0.05);35μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、Ⅱ型胶原及aggrecan mRNA表达显著降低(P<0.01),IGFR mRNA表达较模型组有所降低,但无显著性差异(P>0.05);55μmol/L Genistein组与模型组比较,软骨细胞增殖率、aggrecan基因表达显著下降(P<0.01),Ⅸ型胶原、IGFR mRNA表达较模型组有所降低(P<0.05);Genistein各浓度组PTPn1 mRNA表达无显著变化(P>0.05)。与模型组比较,10μmol/L Na3Vo4组各项检测指标变化不明显(P>0.05);30μmol/L Na3Vo4组Ⅱ、Ⅸ型胶原mRNA表达明显降低(P<0.01);20μmol/L及30μmol/L Na3Vo4组软骨细胞增殖率明显下降(P<0.01),aggrecan及PTPn1 mRNA表达显著降低(P<0.05),IGFR mRNA表达无显著变化(P>0.05)。结论Genistein可特异性抑制PTKs中IGFR基因表达,适当剂量Na3Vo4可抑制PTPs中PTPn1的基因表达,降低软骨细胞生物学功能。

原发性甲状旁腺功能亢进症的运动系统表现(附8例报告)

原发性甲状旁腺功能亢进症是由于甲状旁腺本身病变引起的甲状旁腺素（PTH）生成、分泌过多，从而引起的钙、磷和骨代谢紊乱的一种全身性疾病。该疾病在我国较欧美远为少见，对其在运动系统的表现认识不足，易导致漏诊、误诊。本文分析我科诊治的8例原发性甲状旁腺功能亢进症，并对其在运动系统的表现作一分析。

三痹汤加减治疗髌骨软骨软化症的临床观察

将277例髌骨软骨软化症患者辨证分为4型,在三痹汤的基础上根据不同证型加减用药,分别于服药2周、4周、6周后统计临床疗效。结果:6周后治愈157例,显效97例,有效15例,无效8例,总有效率达97.1%。

脊髓型颈椎病手术治疗的现状

脊髓型颈椎病手术治疗的现状郝永强综述施杞，赵光复审校颈椎的退变过程，可引致脊髓的功能障碍或脊髓病，称做脊髓型颈椎病。它是５５岁以上脊髓功能障碍病人中最常见的病因［１．２］。本病１９５２年Ｂｒａｉｎ［３］等首先报道，其后才开始被充分认识，因其致瘫率较高...

痉、痿证方对大鼠脊髓持续性压迫损伤局部VEGF的影响

目的研究大鼠脊髓持续性压迫后VEGF(血管内皮生长因子)含量变化,探讨痉、痿证方 对大鼠脊髓持续性慢性损伤VEGF的影响。方法采用大鼠颈椎前路螺钉压迫颈脊髓,螺钉持续留 置压迫30天以产生慢性损伤,用免疫组化EnVision法检测局部VEGF表达的变化。结果 与假手 术组相比,轻、重压模型组有非常显著性差异,P<0.01;药物干预后,各组表达进一步增高,治疗组与 模型组以及治疗组之间相比,具有非常显著性差异,P<0.01。结论脊髓慢性损伤能够刺激VEGF表 达增高,痉、痿证方能进一步增强VEGF的表达。

益气化瘀法在骨伤科临床的应用

益气化瘀法在骨伤科临床的应用上海中医药大学附属龙华医院伤骨科叶秀兰，陈俊，施杞（２０００３２）关键词：益气化瘀，骨伤科益气化瘀法在中医骨伤科临床的应用较为广泛，现就近１０年来有关报道作一综述。－、脑外伤后遗症施氏［１］用益气化瘀法治疗慢性硬膜下血肿１...

新生鼠嗅鞘细胞培养的几种纯化方法的比较

目的对文献报道的嗅鞘细胞(OEC)纯化方法进行比较,寻找一种较优化的纯化方法,为细胞移植修复脊髓损伤实验研究提供高纯度的种子细胞。方法实验分别比较了3种纯化方法:差速贴壁法、差速贴壁法联合阿糖胞苷化学纯化法、差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法纯化原代培养的新生SD大鼠的OEC,并对纯化的OEC的形态学和免疫学特性等进行观察。结果与另两种纯化方法相比,差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法得到的OEC不仅纯度高而且细胞活性好。结论该实验找到了一种纯化OEC的较优化方法——差速贴壁法联合NGFRp75抗体纯化法,此法得到的细胞较符合细胞移植的要求,为下一步细胞移植修复脊髓损伤实验研究打下了细胞学基础。

腰神经根损伤后神经细胞粘附分子(N-CAM)在神经肌肉接头部的表达(英文)

目的:研究大鼠腰神经根损伤后,神经细胞黏附分子(N-CAM)在神经肌肉接头部的表达。方法:采用免疫组织化学方法和激光共聚焦显微扫描(confocaliaserscaningmicroscopy)技术,观察了大鼠胚胎期,出生后14d,成年期以及L5神经根受压后10,20,和30d,大鼠比目鱼肌神经肌肉接头部N-CAM的分布变化。结果:大鼠胚胎期,肌管的表面和神经肌肉接头部N-CAM呈强烈着染,在发育过程中其浓度逐渐减退,至成年肌肉时几乎消失。而当肌肉失神经支配后可导致N-CAM重新再现。结论:N-CAM在肌肉中的表达是通过神经支配状况调节的。

蛇床子素和纳米氧化锆强韧化磷酸钙支架对成骨细胞增殖影响的研究

目的 研究蛇床子素与纳米氧化锆强韧化磷酸钙骨支架的相容性 ,以及其在体外对幼兔成骨细胞增殖和成骨作用的影响。方法 酶消化法分离培养幼兔股骨成骨细胞 ,噻唑兰法 (MTT)测量成骨细胞增殖率 ,用碱性磷酸酶试剂盒测定细胞内骨碱性磷酸酶 (ALP)活性。结果 蛇床子素对大鼠新生成骨细胞的增殖和ALP活性具有显著的促进作用 ,与纳米氧化锆强韧化磷酸钙人工骨支架生物相容性良好。结论 纳米氧化锆强韧化磷酸钙人工骨支架复合蛇床子素刺激的成骨细胞 。