代谢组学在中医药治疗非酒精性脂肪肝研究中的应用

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是常见的慢性肝脏疾病之一,往往与肥胖、糖尿病、高脂血症、高血压病等胰岛素抵抗相关性疾病并存,严重威胁着人类的健康.代谢组学从整个生物学系统的角度理解其功能活动,被认为与中医学的整体思维具有高度一致性,已广泛应用于健康监测、疾病诊断、证候分类、疗效评价等各个方面.本文以NAFLD为例,综述了代谢组学在疾病诊断、发病机制、风险评估、证候分类、药物治疗效果评价等各个方面,旨在推动中医药治疗NAFLD的进展.

氧化应激与非酒精性脂肪性肝病研究进展

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种遗传-环境-代谢应激相关性疾病,其发病机制尚未完全明确,其中氧化应激对于NAFLD的发生发展起着关键作用.本文对NAFLD与氧化应激及其相关影响因素(如线粒体、微粒体、脂质过氧化、解偶联蛋白-2)作一综述.

胆宁片治疗非酒精性脂肪性肝病的多中心随机对照临床研究(英文)

目的:评价胆宁片治疗非酒精性脂肪性肝病的临床疗效。方法:多中心、随机、阳性药物平行对照,盲法评价。胆宁片治疗组102例,熊去氧胆酸(优思弗)对照组33例。分别于治疗前后评价体质量指数、主症改善率、肝功能和血脂、影像学改善及综合疗效等。结果:胆宁片和优思弗均能有效改善非酒精性脂肪性肝病患者体质量指数、肝区不适、乏力、食欲减退、肝功能、血脂及影像学异常表现等,胆宁片对体质量指数、肝区不适的改善作用优于优思弗。组织学证据证实胆宁片对非酒精性脂肪性肝病有较好的治疗效果。结论:胆宁片是治疗非酒精性脂肪性肝病的有效药物,其作用略优于优思弗。

肠上皮屏障与炎症性肠病研究进展

肠上皮屏障损伤是近年炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)细胞和分子发病机制研究的新领域.肠上皮屏障是肠黏膜的重要防线之一,若受损则可引起肠上皮通透性增加,在IBD发病过程中起重要作用.目前研究重点侧重于肠上皮细胞和细胞间紧密连接结构和功能的改变,维持和修复肠上皮屏障可望成为治疗IBD的新策略.

肠道平滑肌动力与炎症性肠病研究进展

肠道平滑肌动力改变与炎症性肠病(IBD)的发病关系得到医学界的重视,并逐渐成为IBD发病机制研究的热点。肠道运动的异常和神经递质的失衡在IBD的发生和进展过程中起了重要作用;白细胞介素能在一定程度上反映肠道运动功能变化。因此,恢复神经递质的失衡并重建肠道动力平衡的策略在IBD治疗过程中有良好的应用前景。

大肠湿热型和脾气虚弱型溃疡性结肠炎患者肺功能损伤的研究

目的：基于传统中医学＂肺与大肠相表里＂的理论,研究大肠湿热型和脾气虚弱型溃疡性结肠炎（UC）患者合并肺功能损伤的临床表现及其特征。方法：纳入91例UC患者,其中大肠湿热组46例,脾气虚弱组45例。调查性别、年龄、吸烟史、病程、用药史等人口学指标,肺部症状评分,疾病活动度指数,检查肠镜,胸部X摄片,检测肺功能指标包括肺活量（VC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）、第1秒的用力呼气量占用力肺活量的百分率（FEV1/FVC）,50%用力肺活量时的呼气流速（FEF50）、75%用力肺活量时呼气流速（FEF75）,残气容积（RV）、肺总量（TLC）、残气容积与肺总量的比（RV/TLC）,一氧化碳弥散量（DLCO）,肺一氧化碳弥散量/肺泡通气量（DLCO/VA）。结果：91例患者中,有咳嗽、气短、胸闷、咳痰等症状中1项或1项以上者68例（74.7%）;其中大肠湿热组比脾气虚弱组更多出现咳嗽、气短、胸闷肺部症状病例。77例出现通气、换气肺功能指标1项或多项异常（84.6%）。大肠湿热组大气道功能指标FEV1和FEV1/VC值低于脾气虚弱组（分别P〈0.05,P〈0.01）;大肠湿热组小气道功能指标FEF50和FEF75明显低于脾气虚弱组（均P〈0.01）;脾气虚弱组残气功能指标RV、TLC和RV/TLC显著高于大肠湿热组（分别P〈0.01、P〈0.01和P〈0.05）。结论：UC具有较高的并发肺部症状、胸部影像学异常和肺功能指标异常发生率,大多数病例存在通气、换气肺功能指标异常。大肠湿热组比脾气虚弱组更多出现肺部症状。大肠湿热组倾向于出现大气道和小气道功能损伤,而脾气虚弱组易于表现为残气功能损伤。

Th17/Treg失衡与炎症性肠病的关系

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的病因和发病机制尚未完全明确,肠道黏膜免疫系统异常反应所导致的炎症过程在发病中起重要作用.辅助性T细胞17(T helper 17cells,Th17)可介导慢性炎症和自身免疫性疾病的发生,调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)有抑制自身免疫的功能,二者存在相互转化的关系.有研究表明Th17/Treg转化平衡是维持肠道免疫稳态的重要因素,这可能是导致人类IBD的原因之一.最近研究表明TGF-β,IL-6和维甲酸(retinoicacid,RA)可能是调控二者平衡关系的重要因素.肠道菌群(intestinal flora)与IBD的发生发展关系密切,益生菌(probiotics)对IBD的治疗作用成为研究的热点.深化对Th17/Treg转化调控关系的研究是当前重要的研究课题.

清肝活血方及其拆方对酒精性肝病大鼠血浆内毒素水平及KC活化状态的影响

目的:探讨清肝活血方及其拆方对酒精性肝病(alcoholic liver d isease,ALD)大鼠血浆内毒素水平及KC活化状态的影响。方法:雄性W istar大鼠100只,SPF级,随机分成空白组、CC l4组各10只,余80只为造模组,采用复合因素复制ALD模型6周。空白组予等量生理盐水对照。CC l4组予微量CC l4腹腔注射2次/周。造模4周后将模型组随机分成4组,清肝活血方及其拆方组各15只,余为模型组。予等效剂量清肝活血方及拆方灌胃2周。检测血清ALT、AST水平;留取肝脏标本进行HE染色;采用偶氮显色法检测血浆内毒素水平;免疫组织化学染色检测肝组织CD68表达。结果采用SPSS12.0统计软件进行单因素方差分析及两两比较。结果:(1)清肝活血方及其拆方均可明显改善ALD大鼠肝脏脂肪变及肝脏炎症程度,清肝活血方>活血方>清肝方,清肝活血方优于清肝方。(2)清肝活血方能显著降低模型大鼠血清ALT水平,清肝方和活血方无明显作用;清肝方、活血方、清肝活血方均可明显降低ALD大鼠血清AST水平,组间比较无显著差异。(3)清肝活血方及其拆方均能降低模型大鼠血浆内毒素水平,组间比较无显著差异。(4)清肝活血方及其拆方均可抑制模型大鼠KC活化,活血方优于清肝活血方,清肝活血方优于清肝方。结论:清肝活血方及其拆方发挥对ALD的防治作用,其作用机理可能与降低血浆内毒素水平和抑制KC的活化有关。

脂细胞分化异常与胰岛素抵抗的关系及其在非酒精性脂肪性肝病中的作用

脂肪细胞是白色脂肪组织的主要组成部分,不仅能够储存能量,还是重要的分泌器官.脂细胞的正常分化维持机体能量代谢的平衡.各种原因引起的脂肪细胞分化异常,包括转录调控因子的改变和脂肪因子的作用,可以干预胰岛素的正常效应,引起胰岛素抵抗(insulin resistance,IR).胰岛素抵抗是非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)发病的关键环节,而脂肪细胞分化异常本身又与NAFLD有直接的联系.本文主要讨论脂肪细胞分化异常与IR的关系,及其对NAFLD的影响.

793例脂肪肝患者证候分布规律

目的:研究脂肪肝的中医证候分布规律。方法:采用以病统证,病证结合的研究模式,建立基于EPidata3.1软件和多中心、大样本临床调查的脂肪肝证候表观数据库,用SPSS13.0软件对证候数据进行二次因子分析和聚类分析。结果:肝肾不足、阴虚火旺、肝郁脾虚、脾虚、脾虚湿阻、轻证湿热内蕴、血瘀、重证湿热内蕴、痰湿内阻是脂肪肝的基本证型。脂肪肝以单个证型和2～4个基本证型组合形式多见,病机较为简单时,脾虚湿阻型最为常见,病机较复杂时,肝肾不足型最为常见。108例(13.6%)患者表现为无症状型,46例(5.8%)患者表现为证候不可分类型,其余患者被聚为脾虚痰瘀互结(91例,11.5%)、肝肾阴虚(147例,18.5%)、脾虚痰湿中阻(254例,32.0%)、脾虚湿热内蕴(81例,10.2%)和肝郁脾虚湿阻(66例,8.3%)等5种证型。结论:多元统计分析方法在一定程度上揭示了脂肪肝的证候分布规律,值得深入研究;本病病位在脾,与肝、肾关系密切;脾虚为本病基本病机,痰、湿、瘀、热、肝郁为本病主要病理要素;肝肾阴虚是本病较为特殊的一个类型。

清肝活血方对酒精性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶的调控作用

目的通过观察清肝活血方及其拆方对酒精性纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2,9)和1型基质金属蛋白酶抑制物(TIMP-1)的调控作用,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制。方法雄性SD大鼠随机分为空白对照组、CCl4组(各10只)和造模组(110只)。造模组用白酒为主的复合因素进行干预。8周后造模组随机分为模型组(25只)、清肝活血方组、清肝方组及活血方组各15只,在实验第4、8、10周各取8只模型大鼠做病理分析以监测模型进展,余大鼠在造模中死亡。各治疗组分别加用相应药物灌胃,分别为4.75、1.50、3.25g/kg。12周末处死大鼠,采用蛋白印迹法、荧光定量PCR、免疫荧光法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达明显升高(1.81±0.28vs.0.53±0.04,1.60±0.16vs.0.45±0.05,1.20±0.02vs.0.35±0.07,P<0.01)。与模型组比较,清肝活血方及其拆方组TIMP-1表达均降低(0.56±0.05、0.67±0.02、0.70±0.02vs.1.20±0.02),MMP-2、MMP-9表达提高(4.18±0.53、2.70±0.40、2.38±0.22vs.1.81±0.28;3.31±0.06、2.56±0.20、1.87±0.05vs.1.60±0.16,P<0.05,P<0.01),全方组调控优于各拆方组(P<0.05,P<0.01)。结论清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制可能与调控MMP-2、9有关。

清肠栓对三硝基苯磺酸诱导结肠炎大鼠结肠黏膜地址素细胞黏附分子-1表达的影响

目的:探讨黏膜地址素细胞黏附分子-1(MAdCAM-1)在三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠结肠炎发病过程中的作用;研究清肠栓是否通过抑制MAdCAM-1在结肠黏膜的表达,而发挥其抗炎愈疡作用.方法:用TNBS制备实验性大鼠结肠炎模型,大鼠随机分为清肠栓高剂量组、清肠栓低剂量组、柳氮磺胺吡啶组(SASP)、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组及正常组.模型Ⅰ组造模3d时,其余5组在给药7d时处死大鼠.取大鼠结肠病变部位标本,进行组织病理学评价,用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测结肠组织中LTB4和TNF-α水平,免疫组化染色法和Western blot分析法检测结肠黏膜MAdCAM-1蛋白表达.结果:造模3d时,模型Ⅰ组大鼠结肠黏膜出现明显组织损伤;经过7d处理后,清肠栓组大鼠黏膜组织损伤减轻.模型组结肠黏膜LTB4和TNF-α水平比正常组上升(436.38±66.56,396.81±69.43vs203.76±42.84;394.78±61.53,413.43±47.39vs233.84±55.24,均P<0.01);与模型Ⅱ组比较,各治疗组LTB4和TNF-α水平均下降,尤以清肠栓高剂量组下降明显(275.74±36.35,282.72±47.94,P<0.01).正常组大鼠结肠黏膜固有层MAdCAM-1可见少量表达,模型Ⅰ组大鼠结肠黏膜阳性染色细胞数明显增多;与模型Ⅱ组比较,清肠栓高剂量组、低剂量组和SASP组MAdCAM-1表达均明显下调,尤其在清肠栓高剂量组下调更为显著.结论:清肠栓通过抑制结肠黏膜促炎症因子LTB4和TNF-α释放,以及下调MAdCAM-1表达,而发挥其抗炎愈疡作用.

内质网应激与肝细胞凋亡

内质网(endoplasmic reticulum,ER)是一种重要的真核细胞器,由于各种原因引起的内质网中出现错误折叠与未折叠蛋白在腔内聚集以及Ca^(2+)平衡紊乱的状态,称为内质网应激(ER stress,ERS).细胞凋亡(apoptosis),又称为程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),是受细胞外微环境和细胞内基因调控的一种细胞主动性死亡方式,他是机体用来去除衰老、有害、无用及异型细胞的一种重要机制,是确保机体正常发育、维持机体正常生理过程所必须的.肝细胞凋亡是造成肝脏损伤和肝脏疾病最基本的中心环节.既往研究认为肝细胞凋亡主要通过两条信号通路介导,即死亡受体通路和线粒体依赖性的细胞凋亡通路.但近来发现ERS亦介导肝细胞发生凋亡,本文主要讨论ERS途径所致肝细胞凋亡的机制.

ICC自噬调控——溃疡性结肠炎肠动力紊乱治疗的新靶点

溃疡性结肠炎(UC)患者存在腹痛、腹泻、里急后重等肠动力紊乱表现。Cajal间质细胞(ICC)是胃肠动力障碍性疾病的治疗靶点之一,而自噬调节是多种疾病潜在的治疗措施。研究UC伴随的肠动力紊乱与ICC自噬之间可能的联系及其药物干预机制,对于控制UC病情、缓解动力紊乱症状、改善患者生活质量具有积极意义。本文对UC肠动力紊乱与ICC自噬间的联系以及通过调控ICC自噬治疗UC肠动力紊乱的可能性作一综述。

瘦素抵抗与胰岛素抵抗

胰岛素抵抗和瘦素抵抗是多种代谢性疾病共同的病理基础,是引起机体能量代谢紊乱的重要因素.多项研究发现两者存在交互影响,但对胰岛素抵抗和瘦素抵抗的探索多是独立进行.本文拟从两者在多个水平,多个环节的相互作用作一综述.

参青方对三硝基苯磺酸诱导结肠炎大鼠结肠SP和VIP表达的影响

目的:探讨三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎大肠道动力学异常的发病机制,研究参青方消炎愈溃,以及调节结肠神经递质P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)的作用机制.方法:用TNBS复制实验性大鼠结肠炎模型,随机分为参青方高剂量组、参青方低剂量组、美沙拉嗪组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组及正常组,每组各10只.其中模型Ⅰ组于造模3d时处死,其余5组均在3d开始给药,每日1次,连续给药7d时处死.取大鼠结肠病变部位标本,检测结肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)及丙二醛(MDA)含量;免疫组化染色法检测SP和VIP的表达.结果:模型Ⅰ组结肠黏膜MPO、MDA含量比正常组增加(2.78±0.26 vs 0.56±0.20,15.14±2.02 vs 7.41±1.19,均P<0.05),SOD含量减少(84.15±6.27 vs 176.33±12.06,P<0.05);与模型Ⅱ组比较,参青方高剂量组、参青方低剂量组和美沙拉嗪组MPO、MDA含量明显减少(1.03±0.23,1.57±0.27,1.59±0.12 vs 2.03±0.33;8.30±1.27,10.09±1.09,10.46±1.37 vs 14.38±1.84,均P<0.05),SOD含量增加(190.17±7.71,178.90±8.59,176.13±9.50 vs 107.09±6.37,均P<0.05).正常组大鼠结肠组织可见VIP、SP阳性表达,与正常组比较,模型Ⅰ组大鼠结肠组织SP、VIP表达减少(42608.00±4823.37 vs 461570.00±18227.7;50801.90±7698.09 vs 607333.90±34166.35,均P<0.05),经治疗后,参青方高剂量组、参青方低剂量组和美沙拉嗪组SP、VIP表达上调(302253.10±11484.92,171014.7±21993.34,158355.10±13855.66 vs 77260.26±9375.49;419171.36±23267.98,279572.17±26645.82,282438.50±13236.13 vs 111838.85±9698.09,均P<0.05).结论:参青方能够上调结肠VIP和SP表达,因而具有调节肠道动力学的作用.

清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物途径的影响

目的:通过观察清肝活血方及其拆方对酒精性肝纤维化大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plas-minogen activator,uPA)和纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)途经的调控作用,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)组和造模组。造模组采用56度二锅头酒、玉米油、吡唑混合物灌胃联合腹腔注射CCl4橄榄油溶液(CCl4∶橄榄油=1∶3)的方法造模。8周后造模组再随机分为模型组、清肝活血方组、清肝方组及活血方组。各治疗组分别加用相应药物(4.75、1.5、3.25g/kg)灌胃,其他各组灌胃等体积生理盐水。12周末处死大鼠,观察大鼠肝功能变化和肝组织病理学改变;采用蛋白印迹法、实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫荧光法检测uPA、PAI-1蛋白和mRNA表达。结果:与空白组比较,CCl4组肝纤维化程度未见明显加重;模型组肝纤维化程度则明显加重(P<0.01),血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和门冬氨基氨转移酶(aspartate aminotransferase,AST)活性明显升高,肝组织uPA和PAI-1表达明显升高,并且PAI-1升高幅度高于uPA。与模型组比较,清肝活血方及其拆方均能不同程度地减轻酒精性肝纤维化大鼠肝纤维化程度(P<0.01),降低血清ALT和AST活性,显著降低PAI-1表达,提高uPA表达。全方对上述环节的调控优于拆方。结论:清肝活血方及其拆方均能改善酒精性肝纤维化大鼠肝功能,减轻纤维化程度,且全方作用优于拆方,其机制可能与调控uPA/PAI-1纤溶途径有关。

参青粉对溃疡性结肠炎大鼠HIF-1、VEGF表达的影响

目的观察参青粉(参三七、青黛)对三硝基苯磺酸(TNBs)诱导的溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜低氧诱导因子-1(HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨其作用机制。方法将60只SD大鼠,分为正常组、模型组、SASP组和参青高、中、低剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组采用三硝基苯磺酸(TNBs)诱导溃疡性结肠炎模型。造模后第3天开始各组给予相应的干预措施,连续干预7天后处死大鼠。采用免疫组化及Real time-PCR的方法测定各组大鼠结肠黏膜HIF-1及VEGF含量。结果与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜HIF-1和VEGF免疫组化指数、相对mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,参青高、中、低剂量组大鼠结肠黏膜HIF-1和VEGF免疫组化指数、相对mRNA表达均下降,差异有统计学意义(P<0.01)。参青各剂量组间比较,高剂量组HIF-1免疫组化指数较中低剂量组升高,差异有统计学意义(P<0.05),而高、中剂量组VEGF免疫组化指数与低剂量组差异有统计学意义(P<0.05);参青高、中剂量组HIF-1和VEGF相对mRNA表达,与低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参青粉能有效下调溃疡性结肠炎HIF-1及VEGF的表达,改善肠道缺氧环境,修复肠道屏障,达到缓解大鼠溃疡性结肠炎的效应。

基于传统文化“和”的思想防治溃疡性结肠炎理论与实践的探讨

"中和"思想是中国是中国传统文化的一种理念,"中和"思想也体现在祖国医学中。理解"和"的思想,把握"和法"的内涵,从遣方用药,疾病与饮食、心理、自然关系、社会关系的相对和谐入手,对防治溃疡性结肠炎有着重要的指导意义,值得深入研究。

清肠栓对大鼠溃疡性结肠炎淋巴细胞凋亡调控蛋白Bcl-2及Bax表达的影响

目的:探讨清肠栓治疗溃疡性结肠炎的作用机制。方法:SD大鼠48只随机分为正常组、模型组(空白组)、西药组(SASP组)、中药组(清肠栓组)共4组,正常组6只,其余每组14只。用5%2,4,6三硝基苯璜酸100mg.kg-1灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型,第3天开始,除正常组外,各组分别给予生理盐水、柳氮磺胺吡啶、清肠栓处理,至7天后处死动物。运用电镜、TUNEL染色法、Bcl-2及Bax蛋白免疫组化染色,分别检测溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Bcl-2及Bax蛋白的表达。结果:与各对照组相比,模型组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢;其结肠黏膜固有层淋巴细胞上Bcl-2的表达率增加,而Bax的表达率下降(P<0.01)。结论:清肠栓可能通过调节Bcl-2及Bax二者之间的比例变化,诱导淋巴细胞凋亡,发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。