应用b-FGF刺激的软骨细胞构建自体组织工程化软骨的研究

目的 探索碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)对体外软骨细胞增殖和体内组织工程化软骨构建的影响。 方法 细胞取自猪耳软骨 ,用Ham′sF 12培养液体外培养 ,实验分两组 :培养液含b FGF组 (b FGF组 ) ,培养液无b FGF组 (对照组 )。培养过程中观察细胞形态 ,于 (12 75± 1 2 6 )d后分别收集 2组第 2代细胞 ,进行细胞增殖倍数比较 ,并按 5 0× 10 6 cell ml浓度与聚环氧乙烯 (Plu ronic)混合 ,制成细胞 生物材料复合物 ,按每一样本 0 5ml注射到猪自体皮下 ,8周后取材 ,从重量、体积、GAG含量和组织学等方面进行分析。结果 b FGF组细胞贴壁呈类成纤维细胞样 ,对照组细胞贴壁呈多角形 ;各组第 2代细胞数和原代细胞数相比 ,b FGF组扩增 70倍 ,对照组为 5 4倍 ,b FGF组是对照组的 12 7倍 ;8周后取材 ,b FGF组形成的组织工程化软骨的平均重量和体积为 0 371g 0 370cm3,约是对照组的 2倍 ;GAG含量和组织学上 ,两者均非常接近正常猪耳软骨。结论 培养液中应用b FGF ,原代软骨细胞能在 2周内大量扩增 ,并能在体内构建良好的软骨 ,这有助于解决软骨组织工程种子细胞缺乏问题。

应用碱性成纤维细胞生长因子体外扩增猪耳软骨细胞老化的规律

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）体外扩增软骨细胞的老化规律。方法细胞取自猪耳弹性软骨，实验分两组：培养液含10ug/L b-FGF组（简称bFGF组），培养液无bF-GF组（简称对照组），分别收集两组多代细胞，按5×10^7个／ml浓度与30％Pluronic F-127／Ham’s F-12混合，按每一样本0．5ml注射到猪自体皮下，8周后取材，从大体观察、称重及组织学染色，对再生的软骨组织进行评价。结果bFGF组和对照组从第3代开始均未能形成软骨组织，bFGF组第2代软骨细胞和原代比较，在两周内扩增70倍，是对照组的12．7倍，且体内能形成很好的软骨。结论应用bFGF体外扩增的软骨细胞在第3代开始老化，失去成软骨能力，种子细胞应取第2代，可兼顾适量细胞数与具备成软骨能力。