上海市猪博卡病毒感染情况调查

根据GenBank公布的猪博卡病毒(Porcine Bocavirus,PBoV)序列,在VP1/2基因区域设计引物和TaqMan探针建立实时荧光定量PCR检测方法,对上海市10个区(县)规模场2006～2011年间采集的1800份猪血清、2010年种猪场不同月份采集的45份猪粪便、2010年9个规模场采集的27份猪鼻棉拭以及门诊采集的9份高热病死猪内脏进行检测,阳性率依次为24%、30%、0%、67%。6份PBoV阳性病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPV)检测,阳性率依次为83%、100%、0%、0%。检测结果表明,PBoV感染在上海市普遍存在,猪内脏中检出率较高,且春秋两季高发,仔猪比较易感,并与PRRSV、PCV2存在混合感染。

对集约化生态循环养猪模式关键技术的探讨

根据我国目前养猪业现状及发展趋势,对集约化生态循环养猪模式关键技术进行了分析,并提出自己的一些思考和建议。

猪博卡病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

根据GenBank公布的猪博卡病毒(PBoV)序列,通过VP1/2基因设计引物和Taq Man探针建立实时荧光定量PCR检测方法。建立的方法与PPV、PRRSV及PCV均无交叉反应,具有较高特异性,在107 copies/mL～101 copies/mL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.997,最低可检测到101copies/mL的阳性质粒。说明所建立的PBoV实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性好和精确性高等优点。

国内部分猪场猪流感检测情况分析

采用ELISA试验对上海市及部分外省市24个猪场的365份猪血清样品进行了猪流感病毒H1、H3亚型抗体的检测。结果:在被调查的24个猪场中,H1N1猪流感型抗体阳性率为30.96%,H3N2猪流感抗体阳性率为14.79%;在育肥猪和种猪的检测中,H1N1猪流感型抗体阳性率为36.6%,H3N2猪流感抗体阳性率为17.6%。表明在所调查的猪场中,猪流感病毒的感染较为普遍,大部分猪场都曾被H1、H3亚型感染,其中育肥猪和种猪的感染占主要地位。

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)结构蛋白的研究

应用SDS -PAGE对病毒的结构蛋白研究结果显示 :T株病毒与M4 1和H52 的结构蛋白存在一定的相似性 ,均具有分子量为 90KD、84KD、6 7KD和 4 3KD的蛋白带 ,但T株病毒还具有一条分子量为 6 1KD的条带 ,而且它相对含量很高 ,肾型传支上海地区野毒株与T株相似 ,也主要具有这条 6 1KD的条带 ,应用兔抗IBV -T血清转印 ,显示 6 1KD结构蛋白均具较强的免疫反应性 。

对集约化猪场疫病净化关键措施的探讨

根据目前我国动物疫病防控及流行态势,笔者对养猪场疫病净化的几个关键措施进行了分析探讨,并提出自己的一些思考和建议。

集约化养猪场疫病防控中几个容易被忽视的环节

对目前一些集约化养猪场疫病防控方面容易被忽视的环节及普遍存在的问题进行了简要的剖析,并提出了相应的对策。

对国内建设无规定动物疫病区几个关键环节的思考

2012年5月国务院通过的《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020）》（以下简称《规划》）中提出，加大建设无规定动物疫病区（以下简称“无疫区”）力度，加强重大动物疫病和重点人畜共患病防治，推进重点病种从有效控制到净化消灭的战略目标^[1]。这无疑对全面提升兽医公共服务和社会化服务水平，全面提高动物疫病综合防治能力具有重要意义。

鸡肾型传染性支气管炎(IB)疫苗的研制

用鸡传染性支气管炎病毒X株接种 10日龄鸡胚尿囊腔 ,收集尿囊液 ,经甲醛灭活后 ,按一定的比例 ,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活苗 ,免疫鸡 30d后 ,保护率达 10 0 % ,并呈现良好的体液免疫应答 ,血凝抑制抗体效价达 2 11,病毒中和效价达 1∶10 6 ,疫苗在 4℃保存 7个月后用来免疫鸡 ,其对同源毒株的攻击仍呈现较好的保护作用 ,保护率达 95%。该疫苗安全、可靠 ,稳定性高 ,4℃放置 1年不分层 。

水泡性口炎病毒与Monocyte及MoDC的互作研究

为了探究水泡性口炎病毒（ Vesicular stomatitis virus, VSV）与天然宿主免疫细胞的互作关系,实验用M蛋白第51位甲硫氨酸残基缺失后的重组病毒（ VSVAM 51-GFP ）和第51位甲硫氨酸敲除、第 221位缬氨酸突变为 苯丙氨酸、第226位丝基酸突变为精氨酸的重组病毒（ VSV-MT-GFP ）以及野生型重组病毒（VSV-GFP）感染猪单核 细胞（ Monocyte）和单核细胞诱导的树突状细胞（ Monocyte-dcriveddendritic cell, MoDC）,通过空斑实验制作病毒生 长曲线,用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测细胞的感染状况, E LISA 检测细胞培养上清中的细胞因子表达变 化.结果表明, VSV、 VSVAM 51、 VSV-MT 均可感染 Monocyte和 MoDC,且 Monocyte的感染率仅为8.38%.3 种病 毒在 MoDC中可以大量复制,但无法在 Monocyte中扩增.且与野生型VSV相比, VSViM51、VSV-MT 细胞致病性 依次减弱.VSV能有效激活TNF -α、 IL-8、 FN-α 相关免疫细胞因子在MoDC中的表达,且 M 蛋白突变程度越大,病毒激活能力越强.