儿童结核病合并恶性血液病七例临床分析

目的探讨儿童结核病合并恶性血液病的临床特点、诊断、治疗和预后。方法收集2010年4月至2014年9月在上海市公共卫生临床中心诊断的儿童结核病合并恶性血液病7例，包括急性淋巴细胞白血病6例，胸膜恶性淋巴瘤I例；其中男5例，女2例，年龄3～11岁，中位年龄8岁。分析7例患儿的临床特点、诊断方法、治疗和预后。结果7例结核病合并恶性血液病患儿中，2例结核病诊断先于恶性血液病，5例在白血病化疗过程中出现肺结核症状。7例患儿均出现高热、盗汗及肝脾肿大，咳嗽6例，消瘦5例，食欲减退5例，呼吸困难2例，骨关节痛1例（肘关节），浅表淋巴结肿大2例。干扰素释放试验阳性5例。7例结核病患儿均获得病原学确诊并接受个体化治疗方案进行抗结核化疗，其中5例联合抗白血病药物治疗，2例（I例合并急性淋巴细胞白血病，1例合并恶性淋巴瘤）最后放弃血液病化疗。随访发现2例放弃化疗的患儿均死亡，其他5例结核病合并急性淋巴细胞白血病患儿结核病均治愈，其中3例急性淋巴细胞白血病患儿至今均为持续完全缓解状态，1例刚结束白血病维持化疗，另i例患儿仍在维持化疗阶段。结论儿童结核病合并恶性血液病患儿的诊断是难点，积极进行抗结核、白血病联合化疗，儿童结核病合并急性淋巴细胞白血病仍可以取得较好的抗结核病疗效，且不影响血液病化疗。

儿童急性白血病治疗新药氯法拉滨

氯法拉滨是十多年来首个获准专门用于治疗儿童急性白血病的新药,对儿童及成人急性淋巴细胞性白血病和急性髓细胞性白血病均有较好疗效,可用于顽固性和复发性病例,且耐受性良好。本文简要综述其药效学、药物动力学及相关临床研究和不良反应。

儿童白血病中34种ph样ALL基因筛选的临床研究

目的对白血病儿童进行34种ph样ALL基因筛选,明确其在预后评估中的临床意义。方法 2016年2月-2018年10月上海市儿童医院119例初发ALL患儿,男69例,女50例,年龄6个月~17岁,应用实时荧光探针PCR法进行Ph样ALL相关34种基因的筛选,筛选阳性者再进行监测。统计学方法应用SPSS 16. 0进行χ~2检验和生存分析。结果 119例初发ALL患儿,ALL-B109例,ALL-T 10例,ph样ALL基因筛选的阳性率为18. 5%(22/119)。阳性的ph样ALL基因包括:IKZF3-8(IK6) 8例次,CRLF2高表达16例次,EBF1-PDGFRB 1例次。其中3例为2种基因同时存在:IKZF3-8和CRLF2高表达共阳性2例,IKZF3-8和EBF1-PDGFRB共阳性1例。上述119例ALL分为ph样ALL基因阳性组(22例)和ph样ALL基因阴性组(97例)。第19天和第46天的流式MRD监测结果两组差异无显著性。ph样ALL基因阳性组总体生存率低于阴性组(P=0. 037),而无事件生存率无差异(P=1. 0)。结论 ph样ALL基因阳性患儿总体生存率降低,可用于儿童白血病的预后评估。

细胞遗传学技术在儿童急性白血病诊断中的应用价值

急性白血病(acute leukemia,AL)是造血干细胞恶性克隆性疾病,为发病率占首位的小儿临床恶性血液肿瘤疾病。AL可以分为两大类:急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)。主要临床症状为贫血、出血、器官浸润和感染等,严重威胁患儿生命安全[1]。国际上一般通过MICM[综合形态学(morphology)、免疫学(immunology)、细胞遗传学(cytogenetics)、分子生物学(molecule biology)]分型对初诊恶性血液病患者进行准确诊断与规范治疗,以提高患者生存率[2-4]。因此,及时、有效的诊断对于AL患儿的预后和治疗具有十分重要的意义。本研究采用常规染色体核型分析和荧光原位杂交技术对140例AL患儿进行检测,探讨联合检测对提高白血病染色体异常检出率的价值。

儿童急性白血病骨髓活检组织中bcl-2、CD20、CD79a的表达及临床意义

目的探讨儿童急性白血病骨髓活检组织中bcl-2、CD20、CD79a的表达与发病和预后的关系。方法对31例儿童急性白血病及10例对照组病例骨髓活检组织进行bcl-2、CD20、CD79a免疫组化检测。结果bcl-2、CD20、CD79在初发白血病骨髓活检组织中的表达均增高,与对照组差异存在统计学意义(P<0.05)。缓解组骨髓活检组织6例bcl-2阳性表达中2例临床复发(33.3%),4例临床缓解(66.7%),13例bcl-2阴性表达临床均CR(P<0.05)。CD20、CD79a阳性表达与临床复发/CR差异无显著性意义(P>0.05)。结论儿童急性白血病骨髓活检组织中bcl-2的检测可作为协助临床疗效判断、指导治疗的参考依据。

砷剂在血液系统恶性肿瘤中的治疗进展

砷剂作为药物在中国和西方医学中的应用历史悠久。20世纪70年代我国学者首先使用三氧化二砷(ATO)治疗复发性和难治性急性早幼粒细胞性白血病(APL),并取得了52%～92%的完全缓解(CR)。目前其作用逐渐被人们认识,并逐步应用于各种血液系统肿瘤性疾病。

多药耐药蛋白P170在儿童初发急性白血病患者骨髓中的表达及意义

目的检测儿童急性白血病初发时骨髓中多药耐药蛋白P170的表达,分析P170表达与患儿多药耐药的关系及临床意义。方法 66例儿童急性白血病患者中男性40例,女性26例;急性淋巴细胞性白血病(ALL)45例,急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)21例;根据疗效分为初治敏感组(n=40)和难治耐药组(n=26)。采用流式细胞术检测骨髓细胞多药耐药蛋白P170的相对表达率,并分析P170表达阳性率与耐药性和性别间的关系。结果难治耐药组的急性白血病患儿P170表达阳性率显著高于初治敏感组(65.4%和37.5%,P<0.05);但ANLL组与ALL组、男性组与女性组的P170表达阳性率比较差异均无统计学意义(44.4%和57.1%,P>0.05;45.0%和46.2%,P>0.05)。结论儿童急性白血病患者初发时P170表达阳性者易产生多药耐药,预后可能较差;P170在儿童急性白血病的不同分型和性别间的表达无差异。

血液肿瘤患儿中心静脉导管相关血流感染的危险因素分析

目的探讨中心静脉导管(CVC)相关血流感染(CRBSI)在儿童血液肿瘤患者中的相关危险因素,为降低发生率及预防反复CRBSI提供临床指导。方法收集2015年1月1日-2020年12月31日血液科行经外周静脉置入中心静脉置管(PICC)及完全植入式静脉输液港(PORT)植入的血液肿瘤患儿的基本信息,回顾性分析CRBSI病原菌种类及耐药性等数据,探索其危险因素。结果共486例置管患儿被纳入研究,其中49例患儿共发生73例次导管相关血流感染,发生率为0.6/1000导管日,CRBSI事件发生于严重粒细胞缺乏状态(ANC<0.2×10^(12)/L)和夏季多见(57.5%和46.6%);不同原发疾病(P<0.001)、带管日(P=0.034)及留置导管种类(P<0.001)差异有统计学意义。15例患儿出现反复CRBSI(≥2次),PORT植入患儿发生率明显高于PICC(P<0.001)。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析,预测导管感染的带管日为356 d(特异度92.9%,灵敏度36.7%)。病原菌培养显示49例患者共分离出病原菌73株,以耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为主(36株,49.3%),其次为肺炎克雷伯菌(13株,17.8%)、大肠埃希菌(4株,5.5%)、缓症链球菌(4株,5.5%)、溶血链球菌(4株,5.5%)。药敏试验未显示耐万古霉素、利奈唑胺和替考拉宁的革兰阳性细菌;产超广谱β内酰胺酶肠杆菌(ESBL-E)10株,耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)4株,铜绿假单胞菌对临床常用各类抗假单胞菌抗菌药物的耐药率均较低,未检测到难治性耐药铜绿假单胞菌。结论儿童CRBSI的发生与所患血液肿瘤疾病种类、严重粒细胞缺乏和季节有关;长时间留置导管导致CRBSI发生风险增加;导管置入类型是CRBSI反复发生的危险因素。带管日达356 d时对预测CRBSI发生有一定意义。儿童血液肿瘤患者CRBSI的病原菌以革兰阳性菌为主。

儿童急性早幼粒细胞白血病的诊断和治疗

急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)以其起病时出凝血功能紊乱,有 t(15;17)平衡易位/ PML-RARα融合基因等特殊性,被单列为特殊类型的急性髓系白血病[1]。其特别之处还在于,从过去起病极凶险、早期死亡率极高和预后极差,成为今天治愈率最高白血病的典范。尽管如此,早期诊断、正确的治疗以及减少副作用和并发症仍是今后应继续研究和进一步改善预后的三个重点。在此笔者主要从诊断和治疗的进展进行论述。

儿童专科医院门诊“健康教育移动课堂”有效性研究及需求分析

目的分析评价“健康教育移动课堂”在儿科门诊应用的实施效果，深入了解门诊患者及家属对健康教育的需求。方法通过对儿童专科医院门诊患者就诊信息的回顾性分析，确定“健康教育移动课堂”的授课内容、场地、时间段。选拔并培训能胜任授课任务的师资力量，在儿科门诊开展健康教育。同时将培训内容通过手机APP推送给患者家属，扩大教育受众面。对实施前后门诊患者总体满意度及对本项目实施各维度的满意度进行比较分析。结果“健康教育移动课堂”项目实施后患者总体满意度提高3．65％（P=0．001）。受众对此培训模式的总体满意度评分为（3．94±0．25）分，对“培训方式”的满意度评分为（3．94±0．26）分，对培训者的态度和综合能力评价满意度均≥3．80分。结论在儿童专科医院门诊开展“健康教育移动课堂”并进行实时信息推送可提高患者满意度。受众对这一健康教育方式也有较好的接受度。

RFC1基因多态性与大剂量甲氨蝶呤治疗反应的相关性

目的研究RFC1 G80A基因多态性与儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)治疗反应的关系。方法以接受HDMTX(剂量>1 g/m^2)治疗的68例患儿(280例次)作为研究对象。MTX治疗前检测RFC1 G80A基因多态性;定时测定血浆MTX浓度和肝肾功能、血常规,观察MTX相关毒副反应及预后,评估其相关性。结果 RFC1 G80A基因多态性与MTX毒副反应相关,AA基因型发生中重度肝脏损害及骨髓抑制的风险分别是GG型7.28倍和2.8倍(P=0.000,0.005),可以作为预测HDMTX毒副反应的危险指标。RFC1 G80A各基因型MTX排泄延迟发生和预后的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RFC1G80A基因多态性与HDMTX治疗后中重度肝脏损害及骨髓抑制的发生相关,可以作为预测HDMTX毒副反应的危险指标。

43种融合基因筛选在儿童血液系统肿瘤诊断中的意义

目的通过对43种融合基因在儿童白血病中的结果分析，结合形态、免疫分型和细胞遗传学，评估其对白血病诊断及预后判断的意义。方法2015年5月—2017年4月上海市儿童医院176例初发或复发白血病肿瘤患儿，男99例，女77例，年龄4个月～15岁，应用实时荧光探针PCR法进行融合基因检测，融合基因包括ALL和AML常见的如BCR－ABL，AML1－ETO，CBFβ－MYH11，MLL和RaRa相关等43种融合基因。结果176例患儿中最后诊断为ALL－B 110例、ALL－T 11例、AML 46例，其他9例，包括神经母细胞瘤1例、NHL－B 2例、NHL－T 1例、CML转AML1例，MDS 2例，CML 1例，贫血1例。43种融合基因筛选总阳性率为28.4%（50/176），包括：ALL－B （27/110，阳性率24.5%）：TEL－AML1 14例，E2A－PBX1 6例，MLL－A F10 2例，MLL－AF4 2例，MLL－ENL 1例，MLL－AF9 1例，BCR/ABL 1例；ALL－T （3/11，阳性率27.3%）：MLL－ENL 1例，SIL－TAL1 2例；AML（17/46，阳性率37%）：AML－ETO 7例，MLL－AF10 1例，MLL－AF9 1例，PML－RaRa 4例，DCK－CAN 3例，CBFB－MYH11 1例；其他中包括BCR－ABL 2例，E2A－PBX1 1例共3例。结论43种融合基因检测有效补充了白血病的诊断、有助于鉴别诊断，与危险分层和预后评估密切相关。

全自动高效液相色谱分析系统在地中海贫血诊断中的应用

目的探讨全自动高效液相色谱(HPLC)分析检测系统在地中海贫血(地贫)诊断和筛查中的临床应用价值。方法入选100例基因诊断确诊地贫患儿及35例正常儿童,应用HPLC检测系统以及传统碱变性法、醋纤电泳法定量分析HbF和HbA2;并比较不同检测方法与相应β地贫基因诊断结果的符合率、敏感性与特异性。结果β地贫74例,64例单杂合子,10例复合杂合子;α地贫26例,1例单杂合子,25例复合杂合子。在地贫患儿和正常儿童中,HPLC法测定的HbF百分含量均高于碱变性法,差异有统计学意义(P<0.01)。HPLC法测得的HbF在α地贫患儿和正常儿童间的差异亦有统计学意义(P=0.011),对α地贫的分辨力高于碱变性法。α地贫患儿,HPLC法测得的HbA2百分含量高于醋纤电泳法,差异有统计学意义(P=0.010);β地贫患儿,HPLC法和醋纤电泳法测得的单杂合子的HbA2含量均高于复合杂合子,差异有统计学意义(P<0.01)。HPLC方法测定HbF-HbA2(≥4.0%)联合MCV(<80 fl)、MCH(<27 pg),与α或β基因诊断的符合率达99.3%,灵敏度和特异度分别为99.0%和100.0%。结论采用HPLC法检测HbA2和HbF,并结合MCV、MCH,与基因诊断结果的符合率、灵敏度和特异度均高,可成为大规模筛查β地贫的一种理想方法。

再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞基因和microRNA表达谱对照研究

目的拟用干细胞功能分类基因芯片与microRNA(miRNA)芯片对照分析,进一步研究骨髓间充质干细胞(MSCs)在再生障碍性贫血(AA)发病中的作用。方法选取AA患儿(AA组)和无任何骨髓受累的非血液病患儿(对照组)各10例,体外分离、培养骨髓MSCs,并每组各选2例第3代骨髓MSCs。利用干细胞功能分类基因芯片和miRNA芯片检测AA组与对照组的差异表达基因和miRNA。通过差异基因和差异miRNA比对,挑选出人类miRNA miR-107(hsa-miR-107),并行实时荧光定量-聚合酶链反应以进一步验证。结果 AA组与对照组表达相差2倍以上的基因共62个,其中下调基因10个,上调基因52个。基于生物信息学预测的方法,将差异基因与差异miRNA进行比对,AA组MSCs中hsa-miR-107的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论人成纤维细胞生长因子2(FGF2)及其对应的miRNA hsa-miR-107表达异常的骨髓MSCs可能在AA患儿的发病中起重要作用。

RAC2基因遗传多态性与柔红霉素引起心肌损伤的相关性研究

目的通过研究急性白血病(AL)患儿还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶亚基RAC2基因的遗传多态性,探讨其与柔红霉素引起心肌损伤的关系。方法选取42例接受正规化疗的AL患儿(AL组)和25名健康儿童(正常对照组),采集所有儿童的外周静脉血并抽提DNA,采用PCR技术扩增RAC2基因单核苷酸多态性(SNP)位点的上、下游片段,基因测序法检测rs13058338位点的RAC2基因遗传多态性,比较各组间RAC2基因遗传多态性的分布频率。结果 67名被研究者出现RAC2基因遗传多态性的总体阳性率为19.4%,AL组和正常对照组的分布频率基本一致(P=0.531)。AL组中,氨基未端脑利钠肽(NT-proBNP)(>125pg/mL)升高组和NT-proBNP(0～125pg/mL)正常组的RAC2基因遗传多态性频率分别为25.9%(7/27)和0(0/15),差异有统计学意义(P=0.035);柔红霉素累积剂量为60～120mg/m2组和>120mg/m2组的分布频率分别为20.0%(5/25)和11.8%(2/17),差异无统计学意义(P=0.681)。NT-proBNP升高组中,7例出现AT等位基因患儿的NT-proBNP水平为(276.08±158.60)pg/mL,20例TT等位基因患儿的NT-proBNP水平为(289.64±209.47)pg/mL,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RAC2基因遗传多态性具有个体差异;RAC2基因遗传多态性可能是柔红霉素导致心脏毒性的原因之一。

血管滤泡性淋巴组织增生症1例报告

临床资料患儿,男,6岁.因持续发热14个月伴间歇性腹痛,面色苍黄2个月于2001年6月入院.入院前当地医院曾先后予以抗感染和驱虫治疗,曾拟诊"儿童类风湿病"予以阿司匹林和泼尼松,均无明显疗效.病程中患儿精神不佳,纳减,消瘦.

下一代测序技术诊断白血病淋巴瘤2例报道

目前,下一代测序(next generation sequencing,NGS)技术发展突飞猛进,该技术对于血液系统恶性疾病的诊断、鉴别诊断、发病机制研究、疗效评估、预后判断、微小残留病变监测等方面具有重要意义,促进了精准化和个体化治疗的发展与进步。

柔红霉素诱导急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡的作用因素研究

目的探讨柔红霉素(DNR)致急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡的作用因素。方法不同浓度(0、0.05、0.1、0.5、1μg/mL)DNR及N-乙酰半胱氨酸(NAC)预处理组作用于Jurkat细胞株,采用MTT法检测细胞活力,Hoechst/PI双染法观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)浓度及凋亡,RT-PCR法检测bax、survivin、bcl-2和bcl-xl基因的表达。结果DNR可明显抑制Jurkat细胞株的活性,0、0.05、0.1、0.5、1μg/mL的DNR及NAC预处理组分别作用于Jurkat细胞株24 h后,ROS水平分别为(7.98±0.55)%、(8.88±0.86)%、(9.46±0.98)%、(17.48±2.98)%、(24.46±2.43)%和(11.59±1.29)%,加入NAC后ROS生成受到抑制(P<0.01);细胞凋亡率分别为(11.41±1.44)%、(34.96±3.32)%、(45.58±3.12)%、(84.19±2.65)%、(87.93±1.74)%和(80.47±0.63)%,NAC预处理组与0.5μg/mL DNR组比较,细胞凋亡率变化无统计学意义(P>0.05)。NAC抑制bax基因mRNA表达,上调survivin、bcl-2和bcl-xl表达(均P<0.05)。结论DNR能够诱导Jurkat细胞株凋亡; ROS参与了DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡;凋亡相关基因bax、bcl-2、bcl-xl及survivin能够与ROS相互作用,调节DNR诱导的Jurkat细胞株凋亡。

柔红霉素细胞毒作用对急性淋巴细胞白血病细胞内活性氧水平的影响

目的探讨柔红霉素(DNR)细胞毒作用对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞内活性氧(ROS)水平的影响。方法用Ficoll液从11例ALL患儿骨髓中分离出ALL细胞,用双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)作为ROS捕获剂,经流式细胞术检测细胞的固有ROS水平以及DNR50、100、500ng/mL诱导24h后的ROS水平,每次以U937细胞的ROS值作对照。采用MTT法测定各组诱导48h后的细胞相对活力,流式细胞术和Hoechst33342-PI染色法观察细胞凋亡。结果11例患儿的ALL细胞内固有ROS水平与DNRIC50呈负相关(r=-0.700,P=0.016)。ALL患儿细胞内固有ROS水平存在统计学差异(P<0.05)。对照组固有ROS水平为0.260±0.118,DNR50、100、500ng/mL诱导后细胞内ROS水平为0.291±0.132、0.285±0.125和0.257±0.099,DNR500ng/mL组明显低于DNR100ng/mL组(P<0.05)。各浓度DNR诱导后均见典型的凋亡细胞。结论ALL患儿细胞内固有ROS水平存在差异,与DNR细胞毒性正相关。DNR诱导ALL原代细胞后出现ROS水平改变,可能参与细胞的凋亡。

中西医结合治疗儿童慢性免疫性血小板减少症回顾性研究

目的评价儿童慢性免疫性血小板减少症(chronic immune thrombocytopenia, CITP)的临床疗效。方法回顾性分析2014年1月—2016年12月上海市儿童医院99例CITP气不摄血证患儿临床特点,根据其治疗方法分为糖皮质激素组(22例)、糖皮质激素+中药组(39例)、中药组(38例),分析有效率、复发率及不良反应率。结果激素+中药组整体疗效优于其他两组,差异有统计学意义(P=0.001)。激素组停药后复发率57.1%,高于激素+中药组(18.2%,P=0.008)。激素组不良反应(柯兴氏貌、身长受抑及严重感染)发生率高于其他两组(P<0.01,P<0.05)。结论糖皮质激素联合中药治疗儿童CITP可获得较高的总体治疗有效率,降低停药后复发率及不良反应发生率。