相位对比磁共振成像诊断小儿继发孔型房间隔缺损

目的探讨相位对比磁共振成像(PC-MRI)在诊断小儿继发孔型房间隔缺损(ASD)中的应用价值。方法42例经胸超声心动图证实为继发孔型ASD患儿,年龄9个月～15岁。采用PC-MRI采集通过ASD的左向右分流束的图像,以及缺损边缘与上下腔静脉及二尖瓣、右上肺静脉连线的PC-MRI图像。结果42例PC-MRI测量的ASD直径、缺损边缘与上腔静脉、下腔静脉、房室瓣及右上肺静脉间的距离均与经胸超声心动图的结果有很好的相关性(P<0.001)。26例PC-MRI测量结果与外科手术结果高度相关(P<0.001),不同流速编码中,流速编码50～70cm/s时PC-MRI测量到的缺损直径与外科手术结果相对最为一致。结论PC-MRI可直观显示房间隔缺损的位置、数目、大小和与周围心内结构的空间关系,同时可进行准确的定量分析,为心脏解剖畸形诊断提供了一种新的检测方法和思路。

小鼠精原细胞分选方法改良的研究

目的:通过特异抗体结合的磁珠分选,改进小鼠未分化和分化中两类精原细胞分选方法。方法:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术,分别将出生后7 d雄性小鼠睾丸中的Thy1^+细胞和c-Kit^+细胞分别做为未分化和分化中的精原细胞分选出来,利用免疫荧光技术和流式细胞术,检测两种精原细胞的纯度,利用实时荧光定量PCR检测两种精原细胞中Gfrα1、Plzf、c-kit和sohlh2 mRNA的表达差异来鉴定两种精原细胞,并将Thy1^+细胞进行原代细胞培养。结果:Thy1^+细胞和c-Kit^+细胞的分选纯度分别达到(85.6±8.35)%和(89.40±2.77)%(P<0.01)。Thy1^+细胞中Gfrα1和Plzf基因的相对表达量分别可达到c-Kit^+细胞的(9.47±1.29)、(4.40±0.59)倍,而在c-Kit^+细胞中kit和sohlh2基因的相对表达量分别可达到Thy1^+细胞的(7.38±1.07)、(3.88±0.28)倍(P<0.01)。原代培养后,可见细胞状态良好,能够顺利的自我增殖,并具有精原干细胞增殖特征。结论:利用Thy1和c-Kit两个特异抗体结合的磁珠分选技术可以有效地将未分化和分化中的精原细胞分选出来,并将未分化的精原细胞进行体外培养。

分选蛋白SNX4在小鼠睾丸中的表达和定位研究

目的明确分选连接蛋白4(SNX4)在小鼠睾丸中的表达规律及其可能参与的内体分选功能。方法利用荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测小鼠睾丸中SNX家族23个家族成员的mRNA的表达差异。利用Real-time PCR技术检测小鼠肝、脾、肾、脑和睾丸的mRNA的表达差异。利用免疫组织化学和免疫荧光染色的方法,检测SNX4和大鼠肉瘤(Ras)蛋白超家族成员中的Rab家族成员之一Rab5在睾丸及支持细胞中的定位。结果在小鼠的睾丸中SNX4的相对表达量可达到肝脏的约(15.49±4.92)倍(P<0.01);在睾丸中,SNX家族中的23个家族成员中,SNX1和SNX4的相对表达量较高。SNX4在睾丸支持细胞(sertoli cells)表达,并且与早期内体的标志物Rab5具有共定位的特性。结论SNX4在小鼠睾丸sertoli cells高表达并且和Rab5共定位,SNX4的蛋白分布提示其可能参与了sertoli cells中内体的运输和分选过程。