干细胞与消化系疾病研究进展

在第六届上海国际胃肠病学会议期间,除对一些常规的消化道疾病进行了专题演讲和深入探讨外,还邀请了干细胞研究方面的学者,就胃癌细胞的起源、将肝细胞核因子4α(HNF4α)转染肝癌细胞株HepG2和Hep3B诱导其分化为肝细胞、肝癌诱导分化治疗、干细胞与肝再生、干细胞生存和死亡生物特性、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)与细胞凋亡等进行了广泛和深入的探讨,为如何将干细胞与消化系疾病研究相结合提出了新的思路。

第六届上海国际胃肠病学大会会议纪要(二)

三、消化系肿瘤 1．胃癌：德国Peter Malfertheiner教授在分析胃腺癌预防的可行性时指出，H．pylori是胃癌发生的主要危险因素之一。目前的一个关键命题是关于“不可逆点”，即在胃黏膜已经发生癌前病变的情况下，即使根除了H.pylori，病变也不会逆转，甚至继续进展。所以即使根除H．pylori也无法通过现有指标确定患者是否有罹患胃癌的风险。部分萎缩性胃炎和肠化生患者病变有进展可能，目前需要一项或一系列指标对常规组织学检测进行补充以评估和预测病变进展情况。对有“进展”倾向的胃炎患者（萎缩、肠化生），

第六届上海国际胃肠病学大会会议纪要(一)

由上海交通大学医学院附属仁济医院、上海市消化疾病研究所和美国JohnsHopkins大学医院消化科主办、欧洲胃肠病学与内镜学会（EAGE）、美国胃肠病学院（ACG）、国际消化肿瘤联盟（IDCA）、国际食管炎分类工作组（IWGCO）、亚太胃肠病学会（APAGE）协办的“第六届上海国际胃肠病学会议”于2009年7月1～4日在上海国际会议中心举行。上海市消化疾病研究所名誉所长萧树东教授担任大会主席，相应协办方的几位外籍著名学者和刘文忠教授担任共同主席，房静远教授担任执行主席。本次会议对胃肠道疾病、慢性肝病和胃肠肿瘤以及消化内镜等多个领域的热点问题进行了讨论。参加会议的国内外专家达500余人，其中国外专家70余名，近三任世界胃肠病学会主席MeinhardClasseft教授、GuidoNTytgat教授和EamonnQuigley教授出席大会并做了专题报告。

2010年美国消化疾病周重点内容纪要

2010年5月1～5日，美国消化疾病周（DDW）在新奥尔良Moriat会议中心举行，由美国胃肠病学会（AGA）、美国肝病研究学会（AASLD）、美国消化内镜学会（ASGE）和美国消化外科学会（SSAT）共同举办。作为国际消化病领域规模最大的学术会议．

消化性溃疡发病相关因素演变的统计分析

背景:近几十年来,消化性溃疡的流行病学特征在世界范围内发生了一些变化,但其在国人中的演变有待进一步了解。目的:研究消化性溃疡发病相关因素的演变情况。方法:对1987年1月～2003年12月在仁济医院接受胃镜检查而被诊断为消化性溃疡者的年龄、溃疡类型、幽门螺杆菌(H.pylori)感染等情况进行统计分析。将整个观察期分为1987～1990年、1991～1994年、1995～1999年和2000～2003年4个时间段作进一步分析。结果:在4个时间段中,十二指肠溃疡(DU)和胃溃疡(GU)的平均发病年龄均呈上升趋势(P<0.01),DU患者的平均年龄依次为42.5岁、43.6岁、44.6岁和47.4岁,GU依次为48.9岁、50.1岁、49.5岁和52.6岁。DU患者的平均年龄较GU年轻近6岁。DU与GU的总体发病人数之比介于1.84和2.99之间。男性的DU和GU检出率均高于女性,DU男女之比为1.45∶1～2.59∶1,GU为2.08∶1～4.27∶1。1997年,全体接受胃镜检查者、DU患者和GU患者的H.pylori阳性率分别为51.5%、78.5%和71.9%,至2003年则分别为31.0%、63.5%和58.0%。各组前后差异均有显著性(P<0.01)。结论:近年来消化性溃疡,包括DU和GU的平均患病年龄有逐渐上升的趋势,患者仍以男性为主。胃镜检查者和消化性溃疡患者的H.pylori阳性率均有逐年下降的趋势。

凝血和纤溶状态的变化对炎症性肠病疾病活动性的影响

目的评价炎症性肠病患者及正常对照者之间凝血和纤溶状态的差异及其和疾病活动性的关系。方法队列研究271例炎症性肠病患者和正常对照者的凝血和纤溶状态,性别分层分析凝血和纤溶状态的改变和炎症活动性的关系。结果炎症性肠病患者血小板、血小板分布宽度、凝血酶原时间、纤维蛋白原和活化部分凝血活酶时间显著高于正常对照者(P<0.05),但平均血小板体积显著低于正常对照组(P<0.05)。多元回归分析显示纤维蛋白原是男性溃疡性结肠炎患者ESR(β=1.316,P=0.000)和CRP(β=1.233,P=0.015)的线性相关因子;血小板(β=0.436,P=0.037)和凝血酶原时间(β=0.810,P=0.000)是女性克罗恩病患者克罗恩病活动指数的线性相关因子。结论炎症性肠病患者凝血和纤溶状态异常和疾病活动性相关,纤维蛋白原、血小板和凝血酶原时间是炎症活动性的预测因素。

甘草酸在肝脏疾病治疗中的应用

甘草酸为甘草的主要成分,因其具有明显的抗炎、免疫调节、抗病毒、解毒以及调节酶活性等作用,现已被广泛应用于肝脏疾病的治疗。近来的研究显示它还具有抗纤维化、抗氧化和抗肿瘤等功效。现已研制出第四代甘草酸制剂——异甘草酸镁,其具有更强的抗炎、抗氧化、解毒和稳定细胞膜、抗肝纤维化功能,显示出良好的应用前景。

质子泵抑制剂对非甾体抗炎药相关胃肠疾病的疗效:荟萃分析

质子泵抑制剂(PPI)广泛应用于非甾体抗炎药(NSAIDs)相关胃肠疾病的治疗,但其疗效缺乏相关循证医学资料证实。目的:评价PPI治疗NSAIDs相关胃肠疾病的疗效。方法:通过Medline和中国生物医学文献数据库检索1979～2005年10月发表的有关PPI治疗NSAIDs相关胃肠疾病的单中心或多中心随机对照临床试验。根据入选标准,共有6项临床试验纳入本研究。由2名作者各自独立地对入选研究中的试验设计、研究对象特征、研究结果等内容进行摘录。应用RevMan4.2软件,以随机效应模型进行荟萃分析。结果:6项随机临床试验中共2280例患者满足纳入标准。荟萃分析结果显示:PPI与安慰剂相比,RR为1.33,95%CI为1.00～1.76,P=0.05;PPI与胶体铋相比,RR为0.99,95%CI为0.85～1.17,P=0.95;PPI与H2受体拮抗剂(H2RA)相比,RR为1.26,95%CI为1.08～1.46,P=0.002。但PPI与安慰剂相比和PPI与胶体铋相比均存在异质性。结论:PPI在不停用NSAIDs的情况下仍能有效缓解NSAIDs引起的胃肠道损害,其疗效优于H2RA,但与胶体铋相比并无明显优势。

MSC体外诱导分化为心肌样细胞的鉴定及Nesprin蛋白表达研究

目的体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化并进行相关鉴定,观察分化过程中细胞Nesprin蛋白表达的变化。方法大鼠MSC经Ficoll密度梯度离心法分离获得后贴壁传代培养,流式细胞术鉴定第2代MSC表面抗原表达。以10μmol/L 5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导第2代MSC向心肌细胞分化,观察细胞形态学改变;RT-PCR、免疫组织化学法和免疫荧光细胞化学染色鉴定心肌细胞相关蛋白Desmin、α-sarcomeric actin、cardiac TroponinⅠ(cTnⅠ)mRNA和蛋白表达;Westernblotting检测MSC分化前后Nesprin蛋白表达。结果经5-Aza诱导分化后的MSC细胞及细胞核增大,形态渐趋一致,大部分呈长梭形;细胞Desmin、α-sarcomeric actin、cTnⅠmRNA和蛋白呈阳性表达。免疫荧光细胞化学染色显示Nesprin蛋白定位于核膜,Western blotting分析发现诱导分化后细胞Nesprin蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论成功诱导大鼠MSC向心肌细胞分化;Nesprin蛋白在分化后细胞中的表达明显增加,提示Nesprin可能参与MSC向心肌细胞样变化的过程。

克罗恩病合并肛门周围疾病的诊治

在克罗恩病的并发症中,肛门周围疾病较为常见,其诊断除用儿童常规体格检查和麻醉下肛瘘探查术外,盆腔磁共振显像无创伤且准确性较好。评估肛瘘活动性采用肛周疾病活动指数,肛瘘分类临床上以单纯性和复杂性分类应用最多。治疗上单纯肛瘘以内科治疗为主,常用甲硝唑/环丙沙星、硫唑嘌呤/6-巯基嘌呤、infliximab,或上述两种药物联合应用;复杂肛瘘应内外科联合治疗,肛周脓肿应及时切开引流。

骨髓干细胞治疗炎症性肠病的研究进展

炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种侵及胃肠道的特发的炎症反应,包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(Crohn’s disease,CD),在中国的发病率逐年上升,其可能与现代生活方式、基因遗传、肠道菌群的免疫耐受缺失、免疫反应激活等因素有关。目前的治疗在于控制活动性炎症和调节免疫紊乱,包括抗炎药物、激素、免疫抑制剂、生物治疗等多种治疗手段,但无一具有长期疗效且副作用颇多。而近年来干细胞再生、营养、免疫调节等方面的研究给IBD的治疗带来了新的希望。本文讨论了骨髓间充质干细胞及造血干细胞在IBD治疗中的新发现,回顾了干细胞在IBD治疗中可能的作用机制。

非酒精性脂肪性肝病对肠道菌群多样性影响的初步研究

目的通过高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型,观察NAFLD对肠道菌群多样性及群落组成的影响。方法建立NAFLD大鼠模型,通过大鼠肝脏病理切片HE染色验证NAFLD模型的成立,利用16sRNA测序技术对粪便肠道微生物进行检测分析,探讨NAFLD对肠道菌群多样性及群落组成的影响。结果肝脏组织学检查显示NAFLD组大鼠肝脏脂肪变明显,提示NAFLD动物模型建立成功。对照组Shannon多样性指数显著高于NAFLD组(P<0.05)。提示对照组的肠道微生物多样性显著丰富于NAFLD组。在门水平的变化情况提示,与对照组相比,NAFLD组中厚壁菌门和变形菌门的相对丰度较高(均P<0.05),而拟杆菌门的相对丰度则较低(P<0.05)。在科水平的变化情况提示,正常对照组以毛螺菌科、瘤胃球菌科、拟杆菌科_S24-7为优势菌科,而NAFLD组则以毛螺菌科、瘤胃球菌科为优势菌科。与对照组相比,NAFLD组中的毛螺菌科、拟杆菌科、脱硫弧菌科、氨基酸球菌科、Christensenellaceae菌科等相对含量较高(均P<0.05),而拟杆菌科_S24-7、普雷沃氏菌科、乳杆菌科等相对含量较低(均P<0.05)。结论 NAFLD可降低肠道菌群的多样性,并且显著改变肠道菌群的组成和含量。

表没食子儿茶素没食子酸酯对乙酸诱导的大鼠结肠炎抗炎作用机制的研究

背景:表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)具有抗氧化作用,能抑制炎症信号通路,如抑制可诱导促炎因子表达的核因子(NF)-κB。目的:探讨EGCG对乙酸诱导的大鼠结肠炎的抗炎作用机制。方法:60只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型安慰剂组(n=20)、EGCG治疗组(n=15)和柳氮磺吡啶(SASP)治疗组(n=15)。正常对照组常规饲养;以8%乙酸制备结肠炎模型后,模型安慰剂组、EGCG治疗组和SASP治疗组每日分别予0.9%NaCl溶液2ml、EGCG50mg/kg、SASP0.25g/kg灌胃治疗7d,第8d处死大鼠。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和干扰素(IFN)-γ含量,免疫组化SP法测定结肠组织NF-κBp65表达。结果:与模型安慰剂组和SASP治疗组相比,EGCG治疗组大鼠血清TNF-α和IFN-γ以及结肠组织NF-κBp65水平显著降低(P<0.01)。结论:EGCG可通过调节免疫因子表达而达到抗炎的治疗作用,使结肠炎症反应减轻,其疗效优于传统药物SASP。

调控量子点对小鼠胚胎干细胞活性影响的研究

目的:探讨调控量子点对小鼠胚胎干细胞活性的影响。方法:通过微波合成法制备荧光性能优越的量子点,并在体外对小鼠胚胎干细胞进行标记,采用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察分析量子点对小鼠胚胎干细胞标记率、活力、增殖等方面的影响,并通过ROCK抑制剂Y-27632调控小鼠胚胎干细胞的活力和增殖能力。结果:用20 nmol.L-1的量子点标记小鼠胚胎干细胞培养24 h后,小鼠胚胎干细胞的标记率达到92.5%,存活率只有40.7%;使用10μmol.L-1Y-27632调控量子点标记的小鼠胚胎干细胞培养24 h后,小鼠胚胎干细胞的存活率提高20%。结论:量子点的浓度越大,小鼠胚胎干细胞的标记率越高,成活率越低,添加Y-27632可以阻止量子点标记的胚胎干细胞的凋亡,明显增加胚胎干细胞的生物活性。

消化道上皮内瘤变和黏膜瘤变的概念和临床应用

对重度异型增生和早期癌的鉴别,日本和欧美有不同观点,活检诊断的一致率很低。近十年来国际上病理学家达成了一些共识,对异型增生提出了新的分类方案:Padova分类、Vienna分类和世界卫生组织(WHO)专家工作组意见,共同点是均采用了两级分类法,分为低级别和高级别,但分类术语的命名法和内涵不同。WHO建议对异型增生采用上皮内瘤变的术语,高级别上皮内瘤变包括重度异型增生和原位癌,而Vienna分类的黏膜高级别瘤变包括重度异型增生/腺瘤、非浸润癌(原位癌)、疑浸润癌和黏膜内癌。本文评述新分类的异同点和临床应用注意点。

组蛋白磷酸化的机制及其作用研究进展

组蛋白磷酸化是组蛋白修饰方式之一,属表观遗传修饰的一种。各种不同亚型的组蛋白磷酸化分别参与了基因转录、DNA修复、细胞凋亡及染色体浓缩等过程,与组蛋白的乙酰化等其他修饰方式一起在细胞的生长、分裂等一系列生命活动中起调控作用。

贝伐单抗靶向治疗结直肠癌的临床研究进展

分子靶向治疗已成为结直肠癌治疗的有效策略。最近，血管生成抑制疗法日益成熟，针对血管内皮生长因子（VEGF）的重组人源化单克隆抗体贝伐单抗（bevacizumab，商品名：Avastin，阿瓦斯丁^TM）成为结直肠癌治疗研究的热点。美国食品药品管理局（FDA）于2004年批准贝伐单抗为晚期结直肠癌的一线用药，

EGCG和叶酸对MNNG诱导的大鼠消化道肿瘤的化学预防作用

背景：表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）和叶酸对消化道肿瘤均具有化学预防作用。目的：研究EGCG和叶酸对N-甲基-N＇-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）诱导的大鼠消化道肿瘤的化学预防作用及其作用机制。方法：159只健康雄性Wistar大鼠分为肿瘤模型组（M组,MNNG100mg/L自由饮用）、EGCG对照组（E组,EGCG12.5mg/d）、叶酸对照组（F组,叶酸1mg/d）、EGCG干预组（ME组,MNNG＋EGCG）、叶酸干预组（MF组,MNNG＋叶酸）、EGCG＋叶酸干预组（MEF组,MNNG＋EGCG＋叶酸）和正常对照组（C组）。第29周停止MNNG和药物干预,第44周终止实验,处死各组大鼠,比较各组消化道肿瘤发生情况,行肿瘤组织Ki-67和原位凋亡检测。结果：与M组相比,MEF组肿瘤发生率显著降低（P=0.011）;ME组和MEF组肿瘤组织Ki-67阳性率显著降低（P=0.038和P=0.009）;ME组、MF组和MEF组肿瘤组织细胞凋亡率显著增高（P=0.000、P=0.003和P=0.000）。各干预组间上述指标差异均无统计学意义。结论：EGCG与叶酸联合应用对MNNG诱导的大鼠消化道肿瘤具有化学预防作用,但并不比两者单用更为有效;两者联用对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响亦与单用无明显差异。

能谱CT在鉴别克罗恩病肠道与正常肠道的诊断价值研究

目的分析能谱CT在鉴别病变累及回肠的克罗恩病肠道与正常肠道的价值。方法回顾性分析2011年1月～2012年1月经肠镜、胶囊内镜及病理检查确诊为克罗恩病的患者20例（研究组），所有患者病变均位于回肠，其中男性16例.女性4例，平均年龄35岁；收集11例由内镜或手术排除消化系统病变的患者作为对照（对照组），其中男性5例，女性6例.平均年龄34.55岁。所有患者均行能谱CT检查.测量两组患者肠壁及同层面血管的碘浓度、水浓度及单能量CT值（40～140ke V,间隔10keV）.并计算能谱曲线斜率，应用GraphPadPrism5统计软件分析两组间差异。结果研究组碘浓度值、水浓度值及单能量CT值显著高于对照组（t=2.09。5.16；P〈0.05）。两组间能谱曲线斜率比较，差异有统计学意义（t=3.16.P=0.004）。研究组与对照组血管的碘浓度值、水浓度值及单能量CT值比较，差异无统计学意义（t=0.30～1.20，P〉0.05）。结论能谱CT对于鉴别克罗恩病肠道及正常肠道患者具有诊断价值。