组织血液灌注与微循环的病理生理(2)——氧化应激与疾病

哺乳动物的呼吸系统从大气摄人的氧气中80％～90％用于体内线粒体的能量代谢过程，在三羧酸循环中，以4次脱氢的方式为后续的氧化磷酸化提供还原当量（H^＋和e），脱下的氢3次由烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD^＋）接受，1次由黄素腺苷二核苷酸（FAD^＋）接受，然后H^＋及e经呼吸链（电子传递链）和ATP合成酶进行氧化磷酸化，最后氧接受H^＋和e还原成H2O，并产生ATP。如果各种病理因素使呼吸链传递e的效能下降，氧化磷酸化过程减弱，ATP生成减少，机体正常的还原／氧化平衡状态被破坏。可造成机体的代谢、功能紊乱。

组织血液灌注与微循环的病理生理(1)——氧的利用障碍

2．细胞钙稳态紊乱：静息状态下，细胞胞浆Ca^2＋浓度约为10^-7mol／L，而细胞外液Ca^2＋浓度约为10-3mol/L，细胞内外Ca^2＋浓度相差10000倍左右。细胞内Ca^2＋浓度的变动可作为细胞内信使影响多种钙依赖性酶的活性而改变细胞的功能状态。细胞一系列的Ca^2＋运转机制失调使细胞内Ca^2＋浓度出现非控制性增高时，则出现细胞钙稳态紊乱。从理论上判断这种钙稳态紊乱是由于①Ca^2＋ -Mg^2＋ -ATP酶（钙泵）活性降低，或Na^2＋／Ca^2＋交换、H^＋／Ca^2＋交换逆转，以致胞内Ca^2＋外流减少；

组织血液灌注与微循环的病理生理(1)——氧的利用障碍

氧对机体的生命活动十分重要。细胞内氧的利用发生障碍时，维持生命正常活动所必需的ATP产量不足,将导致机体的器官系统的代谢和形态的改变及其功能紊乱。 细胞内氧的利用障碍可分为广义和狭义。广义的细胞内氧的利用障碍又可分为低氧性、高氧性和正氧性3种类型。

用于高通量测序的基因组靶序列捕获方法的建立

文章旨在建立一种基因组目标靶序列捕捉文库的方法,并结合第二代测序技术,以实现候选基因区段的深度测序。利用Agilent公司的eArray在线平台,对1250个基因的11824个外显子共2414977bp的基因组序列进行120个碱基长度的捕捉探针(钓饵)设计,并制备成SureSelect液相靶序列捕获试剂。选用2例人基因组DNA,超声打断后末端补平并磷酸化,连接SOLiD接头,回收150bp～200bp的DNA片段,与靶序列探针杂交捕获目标序列,油包水微乳滴PCR扩增后,磁珠分离富集,上SOLiD测序系统通过工作流程分析(WFA)进行文库质量的评价,或正式测序反应。结果显示对所包含的11147个基因外显子片段设计出并合成了46509个捕捉探针,制备成SureSelect试剂盒。探针可有效地捕捉并富集基因组DNA的目标靶片段,定量PCR显示富集效率可达29倍。WFA分析表明文库可以在SOLiD仪器进行正式测序。测序结果显示靶序列区域的测序数占有效总测序数的比例达到70%,覆盖率均在200×以上。结果表明本研究所建立的SureSelect基因组靶序列捕捉、富集建立测序文库的技术路线可行,可直接用于SOLiD测序仪的测序。

药物干预对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠心肌病变的影响

目的探讨1型糖尿病大鼠心肌病理改变及阿司匹林、培哚普利、泼尼松对其心肌病变的影响。方法30只SD大鼠随机分为糖尿病模型组（n=20）和正常对照组（n=10），糖尿病模型组一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）60mg／kg加枸橼酸钠溶液，正常对照组腹腔注射枸橼酸钠溶液。8周后观察2组大鼠的体重和平均血糖浓度。将建模的20只糖尿病大鼠随机分为4组（n=5），第4天起，分别给予生理盐水溶解的阿司匹林、培哚普利、泼尼松灌胃各5只，余5只和正常对照组每日以等体积生理盐水灌胃，共持续8周。8周后取各组大鼠心肌组织，HE染色，光镜和电镜下进行观察和比较。结果大鼠以STZ注射后3d血糖浓度≥16．7mmol／L为造模成功，模型组20只大鼠全部成活，成模后大鼠出现明显多饮、多食、多尿和体重下降，HE染色显示糖尿病大鼠心肌细胞肿胀肥大、变性，核明显增大，心肌纤维断裂、溶解，收缩呈波浪状，排列紊乱，并有炎性细胞的浸润。电镜下可见糖尿病大鼠心肌肌纤维排列不规则，断裂溶解，肌纤维问糖原聚集，线粒体肿胀，线粒体大部分嵴不清晰，细胞间盘增宽。与糖尿病组相比，各药物干预组上述病理改变均有所减轻，而以培哚普利组最为明显。结论STZ诱导的1型糖尿病大鼠模型制作方法成功率高，血糖值稳定，8周后出现明显的心肌病变，阿司匹林、培哚普利、泼尼松均能使糖尿病大鼠心肌病变有所减轻，以培哚普利最为有效。