琥珀酸亚铁与多糖铁复合物治疗非透析的慢性肾脏病贫血的随机对照单中心研究

目的比较琥珀酸亚铁和多糖铁复合物纠正非透析的慢性肾脏病(CKD)患者贫血的疗效。方法选取上海交通大学医学院附属新华医院肾脏科非透析CKD患者20例,随机分为琥珀酸亚铁组和多糖铁复合物组。在治疗前、治疗后的第1,2,3,4,5,6个月分别检测血常规、铁代谢指标、肝功能、肾功能和超敏C反应蛋白。观察和比较2组达标率和血红蛋白(Hb)较基线值的上升幅度。结果与多糖铁复合物组相比,琥珀酸亚铁组治疗3个月和6个月后的Hb上升幅度更大。尽管治疗后2组的铁蛋白和转铁蛋白饱和度均有上升,但差异不明显。2组治疗6个月后,红细胞和血清铁明显上升。治疗第4、5、6个月时,琥珀酸亚铁组达标率更高,2组达标率差异明显。2组相比,治疗6个月后红细胞、Hb和红细胞分布宽度差异明显。2组在6个月的治疗期间肝功能、C反应蛋白和估算肾小球滤过率的变化无差异。结论口服补充铁剂能有效纠正非透析的CKD患者贫血,琥珀酸亚铁治疗后Hb上升幅度更大,达标率更高,琥珀酸亚铁较多糖铁复合物在纠正贫血的同时可改善红细胞分布宽度。

血液透析对新诊断终末期肾脏疾病患者血清氨基酸的影响

目的探讨血液透析(HD)对新诊断的终末期肾脏疾病(ESRD)患者血清氨基酸水平的影响。方法对30例新诊断且需要HD治疗的ESRD患者采用高压液相色谱法分别测定HD治疗前和治疗后3、6个月的血清氨基酸水平,并进行统计学分析。结果与HD治疗前比较,患者治疗后3个月和6个月的血清组氨酸(His)、苏氨酸(Thr)、脯氨酸(Pro)、酪氨酸(Tyr)、缬氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、异亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)及苯丙氨酸(Phe)水平均明显增加(P<0.05);与治疗前和治疗后3个月比较,治疗后6个月患者的血清谷氨酸(Glu)和半胱氨酸(Cys)水平明显升高(P<0.05);HD治疗后3个月,患者血清天冬氨酸(Asp)、丝氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、精氨酸(Arg)和赖氨酸(Lys)水平较治疗前明显增加(P<0.05);而至治疗后6个月时又呈现下降趋势,其中Asp、Ser、Gly、Ala水平与治疗后3个月比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论及时进行HD治疗可提高新诊断ESRD患者血清氨基酸水平,改善营养状况。

2例木村病并存肾脏疾病患者的护理

对2例木村病并存肾病综合症的患者予肾上腺皮质激素及免疫抑制剂治疗，结果2例患者住院2～3周均好转出院。护理重点包括对木村病的发热、浅表淋巴结肿痛的观察和护理；同时也需根据肾脏疾病的特点加强专科护理；对淋巴结穿刺活检术和肾脏穿刺活检术做好护理配合及术后护理观察；对在治疗过程中所用药物可能带来的不良反应要做好观察和健康教育。

蛋白激酶C及其在肾脏疾病中的作用

虽已知蛋白激酶C（protein kinaseC，PKC）参与信号转导途径、细胞增殖、分化和凋亡。但PKC在肾脏疾病中的作用尚未完全阐明。正常肾组织中可见多种PKC同工酶．肾脏病变时由于部分PKC激活或缺失而发生表达的改变，其中研究较多的2种肾脏疾病是糖尿病肾病和肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）。糖尿病肾病中，1，2-二酯酰甘油（DAG）或PKCβ升高引起肾脏大血管和微血管病变及慢性进行性肾脏疾病。PKC部分同工酶突变、缺失或活性改变与RCC的发生和浸润进展相关。另外，PKC在IgA肾病等其他肾脏疾病的发病中也发挥作用。

BIA法评估维持性血液透析患者水平衡及干体质量

目的采用全身生物电阻抗分析(BIA)法评估维持性血液透析(MHD)患者水平衡动态变化及干体质量。方法选择血液透析龄≥1年且病情稳定的20例MHD患者作为研究对象(MHD组),分别于血液透析前后及透析间期(透析后24 h和48 h)采用BIA法测定细胞外液量(ECW)和细胞内液量(ICW),计算并获得相关指标;分析MHD患者0 h达到干体质量与否及其平均每日尿量对ECW和ICW的影响。以20名健康志愿者作为正常对照组。结果与正常对照组比较,MHD组透析前理想体质量纠正的ECW明显升高(P<0.05)。在MHD组中,血液透析后ECW较透析前明显下降(P<0.05);与透析前和透析间期比较,血液透析后ECW/机体总水量(TBW)降低,ICW/TBW升高,差异均有统计学意义(P<0.05);各时间点ICW和ECW与患者相应体质量显著相关;达到干体质量患者0 h和24 h时间点理想体质量纠正的ICW和ECW均明显高于未达到干体质量患者(P<0.05);尿量<400 mL/d的患者透析前和透析后24 h,ECW和ICW均显著低于尿量≥400 mL/d的患者(P<0.05)。结论BIA法研究提示,MHD患者血液透析前后及透析间期水平衡动态变化以ECW为主,评价指标以ECW/TBW较为敏感;理想体质量纠正的ICW和ECW可能是评判干体质量的敏感指标。

糖化终末产物对内皮细胞氧化应激的影响

目的研究糖化终末产物(AGEs)对猪髂动脉内皮细胞(PIEC)氧化应激的影响。方法不同浓度AGEs干预PIEC一定时间后,MTT比色法检测细胞活力变化。运用活性氧(ROS)捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内二氯荧光黄(DCF)的荧光强度而测得细胞内ROS水平。结果随着AGEs浓度的增加和作用时间的延长,PIEC活力明显下降(P<0.05);细胞活力下降与作用浓度及时间呈显著正相关(r=0.927,P<0.01)。经DCFH-DA孵育后流式细胞仪检测显示,AGEs处理组细胞内DCF平均荧光强度较空白对照组明显升高。结论AGEs抑制内皮细胞活力,使细胞内ROS生成明显增加,直接诱导内皮细胞的氧化应激。

慢性肾功能衰竭的微炎症状态

慢性肾功能衰竭(CRF)患者普遍存在炎症因子轻度升高的微炎症状态。本文就炎症与CRF患者动脉粥样硬化、营养不良、肾性贫血、促红细胞生成素抵抗等并发症的关系及其治疗进行综述。

IgA肾病患者AGT M235T基因多态性分析

目的探讨血管紧张素原(AGT)M235T基因多态性与上海地区IgA肾病(IgAN)遗传易感性及临床病理表现的相关性。方法选取上海地区经肾穿刺病理活检证实为IgAN患者105例和健康对照者120例,采用聚合链式反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)检测AGT M235T基因多态性,并比较不同基因型患者临床病理表现之间的相关性。结果 105例IgAN肾病患者的AGT M235T基因多态性与正常对照相比,基因型分布频率差异无统计学意义;年龄、性别、血压、血清肌酐、24 h尿蛋白定量、初始的估算肾小球滤过率(eGFR)值等临床指标与AGT M235T基因型无相关性;病理资料显示AGT M235T各基因型病理表现无相关性。结论 AGT M235T基因多态性与IgAN患者无显著相关性。

高糖对人腹膜间皮细胞氧化应激的影响

目的研究不同浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)氧化应激的影响。方法HPMC体外培养并行免疫组化鉴定,取第2代细胞用于实验。将不同浓度葡萄糖干预HPMC一定时间后,MTT比色法检测细胞活力;采用活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度而测得细胞内活性氧(ROS)水平。分析不同浓度葡萄糖及不同作用时间对HPMC细胞活力及ROS水平的影响。结果高糖明显抑制HPMC细胞活力(P<0.05),随着葡萄糖浓度增加及作用时间的延长,抑制率呈上升趋势。高糖干预HPMC后,细胞内的平均荧光强度明显升高。结论高糖导致细胞发生氧化应激,其对细胞的损伤作用可能与氧自由基生成过多及ROS蓄积有关。

血浆置换在急诊危重病中的应用

目的:评价急诊危重病患者中血浆置换(PE)的应用及对患者的临床疗效。方法:回顾性分析我院急诊重症监护室(EICU)2009年3月至2012年11月收治的13例行血浆置换治疗的病例,观察和比较生化指标和临床疗效。结果:13例患者平均ICU住院时间为(26.9±18.9)d,脓毒症组ICU住院时间短于非脓毒症组(P<0.01),平均病死率为46%,脓毒症组病死率高于非脓毒症组(P>0.05)。PE治疗后,血生化指标和炎症指标得到改善(P<0.05)。结论:PE可以作为急诊不同病种危重病患者尤其是脓毒症的辅助疗法。

虫草菌液对高糖作用下大鼠腹膜间皮细胞转化生长因子β_1和纤维连接蛋白表达的影响

目的:研究虫草菌液(HS)对高糖作用下体外培养的大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)转化生长因子β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响。方法:将原代培养的第3代RPMCs随机分为6组:对照组、1.5%葡萄糖组、2.5%葡萄糖组、单纯虫草组(10mg/ml)、1.5%葡萄糖+10mg/ml虫草组、2.5%葡萄糖+10mg/ml虫草组。同步培养72h后,以RTPCR法检测各组细胞TGF-β1和FN mRNA表达情况;ELISA法检测细胞上清液中TGF-β1和FN的蛋白质水平。结果:高糖作用下RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05),且增高的程度与葡萄糖浓度呈依赖关系。与相应浓度的高糖组相比,经虫草菌液干预后RPMC的TGF-β1、FN mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:虫草菌液可下调高糖作用下RPMCs的TGF-β1和FN的表达,具有抗腹膜纤维化的作用。

丹参注射液对造影剂所致大鼠肾损害的保护作用

目的:研究丹参注射液对造影剂肾毒性的保护作用及其机制。方法:SD大鼠32只,随机分为正常对照组、甘油对照组、造影剂组、丹参预防组,24 h后处死动物,检测血肌酐、尿素氮、内生肌酐清除率、肾组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)含量,同时检测肾组织病理学改变。结果:与造影剂组相比,丹参组血肌酐、尿素氮明显下降(P<0.01)、肌酐清除率明显上升(P<0.01)、肾组织MDA含量下降(P<0.01)、SOD活性升高(P<0.01)、GSH含量增高(P<0.05)。病理形态学可见丹参组肾组织损害较造影剂组明显减轻。结论:丹参能减轻造影剂肾损害,其作用与其减轻造影剂所致肾脏过氧化损伤有关。

丹参注射液对高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞的过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的研究丹参注射液对高糖作用下的大鼠腹膜间皮细胞过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响。方法体外培养大鼠原代腹膜间皮细胞,第3代细胞经无血清培养基同步培养24 h后分为正常对照组、高糖诱导组(25 mg/mL葡萄糖)、甘露醇对照组(25 mg/mL甘露醇)和丹参干预组(15 mg/mL丹参注射液+25 mg/mL葡萄糖),测定各组细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测各组细胞内E钙黏素和α-SMA的mRNA和蛋白表达。结果与正常对照组比较,高糖诱导组细胞内ROS和MDA含量增高,而SOD活性降低,E钙黏素mRNA和蛋白的表达减少,α-SMA mRNA和蛋白的表达增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与高糖诱导组比较,丹参干预组细胞内ROS和MDA含量减少,SOD活性增强,E钙黏素mRNA和蛋白的表达增加,而α-SMA mRNA和蛋白的表达减少,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹参注射液可明显减轻高糖诱导的腹膜间皮细胞的过氧化损伤,其对细胞内E钙黏素和α-SMA表达的调控作用可能与延缓腹膜纤维化作用有关。

腹膜透析患者的死亡原因及多变量预后分析

目的分析持续性不卧床式腹膜透析（CAPD）患者的死亡原因,探寻死亡预测因素。方法回顾性分析我院2000-03-2007-03收治的85例透龄3个月以上的CAPD患者,其中死亡组31例,存活组54例,记录患者的临床资料;采用多变量COX回归分析方法分析透析前各临床指标对预后的影响。结果死亡组31例患者中,死于严重感染8例（25.8%）,心脑血管事件7例（22.6%）,消化道出血5例（16.1%）,营养不良3例（9.6%）,其他原因8例（25.8%）。与存活组比较,死亡组年龄、血磷水平明显升高（P值均〈0.01）,而血红蛋白、血浆白蛋白和透析前肾小球滤过率明显降低（P值均〈0.01）,死亡组平均动脉压也较高（P〈0.05）;两组性别比、透析龄、尿素氮、血肌酐、尿酸、血钙等比较差异均无统计学意义。经COX回归分析提示,透析前患者年龄、肾小球滤过率和血磷水平为CAPD患者的死亡预测因素。结论多种因素影响CAPD患者的生存,而透析前年龄、肾小球滤过率和血磷水平则是预后的独立危险因素。

冬虫夏草通过诱导血色素加氧酶-1表达抑制肾小管间质纤维化

目的:观察冬虫夏草对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)模型大鼠肾小管间质纤维化进展的保护作用。方法:72只雄性清洁级SD大鼠随机分为4组:假手术组,UUO模型组,UUO加冬虫夏草治疗组,UUO加冬虫夏草和血色素加氧酶抑制剂卟啉锌[(zinc(a)protoporphyrinη,znpp)]治疗组。各组大鼠分别于术后(建模后)第3、7、14天分批处死,留取手术侧(模型组梗阻侧)肾脏组织。采用HE、Masson染色、荧光定量PCR、免疫组织化学染色评价肾小管间质纤维化损伤程度并检测肾脏组织血色素加氧酶-1(hemoglobin oxygenase-1,HO-1),α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle ac-tin,α-SMA)mRNA及蛋白表达变化情况。结果:冬虫夏草治疗组相对于UUO模型组,肾脏病理损伤及进展程度明显减轻且HO-1的表达上调,α-SMA的表达下调(P<0.05),而冬虫夏草加HO-1抑制剂znpp后,以上作用明显减弱。结论:冬虫夏草可以通过诱导血色素加氧酶的表达减轻肾小管间质纤维化程度。

高浓度葡萄糖在内皮细胞氧化应激中的作用

目的探讨高糖对猪髂动脉内皮细胞(PIECs)氧化应激的影响。方法不同浓度高糖干预PIECs一定时间后,应用活性氧(ROS)捕获剂dihydroethidium(DHE)、双氢罗丹明123(DHR123)孵育细胞,通过荧光显微镜观察细胞内DHE染色,流式细胞仪检测细胞内罗丹明123(rh123)的平均荧光强度(MFI)而测得细胞内ROS水平;以二甲基吖啶硝酸盐为化学发光试剂,通过化学发光仪检测加入NADPH后发光值的变化,以反映高糖对PIECs中NADPH氧化酶(NOX)活性的影响。设立正常组和甘露醇组作为对照。结果随着高浓度葡萄糖作用浓度和时间的增加,荧光显微镜下高糖组细胞内DHE荧光增强;流式细胞仪检测显示,高糖组细胞内rh123的MFI较对照组明显升高;化学发光仪检测表明,高糖组细胞NOX活性升高显著。结论高糖导致细胞发生氧化应激,其对细胞的损伤作用可能与氧自由基生成过多、ROS蓄积有关,该效应可能由NOX介导。

丹参注射液对造影剂诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的:研究丹参注射液对造影剂碘海醇诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用并对其作用机制进行探讨。方法:体外培养的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞),分为正常对照组、甘露醇对照组(与碘海醇渗透压相当)、造影剂对照组(碘海醇100mg/ml)、丹参防治组(碘海醇100mg/ml+丹参注射液15mg/ml)。比色法测定细胞培养上清液LDH水平,MTT法测定细胞增殖活力,DCFH-DA荧光探针测定细胞内活性氧(ROS),硫代巴比妥酸法测定细胞内MDA含量,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,RT-PCR测定细胞内血红素加氧酶-1(HO-1)mRNA表达,Westernblot检测细胞内HO-1蛋白表达。结果:碘海醇100mg/ml可明显抑制HK-2细胞增殖、引起培养液中LDH水平上升、促使细胞内ROS和MDA含量增高而细胞内SOD活性下降,同时碘海醇可诱导HO-1mRNA和蛋白表达上调。加入丹参可明显降低培养液中LDH水平,促进细胞增殖,同时抑制细胞内ROS的产生,降低细胞内MDA含量,保护细胞内SOD活性,并使HO-1mRNA和蛋白表达进一步增强。结论:丹参对造影剂碘海醇所致肾小管上皮细胞具有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化能力及诱导HO-1表达有关。

IgA肾病患者肾组织内电压依赖性Ca^(2+)通道和高通透性Ca^(2+)激活钾通道mRNA的表达

目的观察IgA肾病(IgAN)患者肾组织内电压依赖性Ca2+通道(VOCC)和高通透性Ca2+激活钾通道(BKCa)mRNA表达情况,以评价VOCC和BKCa通道mRNA表达与IgAN患者肾脏病理损害的相关性。方法提取对照组(n=11)和IgAN患者(n=25)肾组织总RNA,以RT-PCR方法检测VOCC和BKCa mRNA表达量,同时将IgAN患者肾活检组织的一部分进行病理诊断和病理损害评分,病理损害评分采用Katafuchi半定量法。结果与对照组比较,IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa mRNA的表达均呈显著增高(P<0.05);IgAN患者肾组织内VOCC mRNA表达与病理损害总积分、肾小球系膜细胞增生程度均呈正相关(r=0.6962,P<0.01;r=0.4220,P<0.05),而与肾小球系膜基质增多和肾小球硬化程度无相关性(P>0.05);IgAN患者肾组织内BKCa mRNA表达与病理损害总积分呈正相关(r=0.5582,P<0.05),而与肾小球系膜细胞增生程度、肾小球系膜基质增多以及肾小球硬化程度均无相关性(均P>0.05)。结论IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa mRNA表达异常,两种通道蛋白的mRNA表达异常与肾小球组织病理损害总积分呈一定程度正相关,提示IgAN患者肾组织内VOCC和BKCa的表达情况,可作为IgA肾病进展与否的指标。

白细胞介素17在IgA肾病肾小管间质的表达及意义

目的观察白细胞介素17（IL-17）在IgA肾病患者肾组织的表达，探讨IL-17在IgA肾病中的临床及病理意义。方法选择51例IgA肾病患者肾组织活体检查采用Katafuchi半定量积分标准和免疫组织化学技术进行病理学积分和检测IL-17的表达，同时检测51例IgA肾病患者中30例外周血单个核细胞（PBMCs）中IL-17、转化生长因子β1（TGF-β1）、IL-6、IL-23、IL-βmRNA的表达。结果正常肾组织中未见IL-17表达。51例IgA肾病患者中，21例肾小管上皮细胞胞质IL-17表达阳性，2例肾间质淋巴细胞IL-17表达阳性，总阳性率为45．10％；并且随着肾小管间质病变加重，IL-17的表达逐步增多。IgA肾病患者PBMCs中IL-17、IL-6、IL-23、IL-1βmRNA的表达较正常人显著升高（P〈0．01），TGF-β1mRNA的表达与正常人比较无统计学差异（P〉0．05），IL-17mRNA与TGF-β1、IL-β1mRNA的表达呈正相关（r=0．67、0．71，P〈0．05）。IgA肾病患者肾小管间质IL-17的表达水平与尿位相畸形红细胞计数、肾小管间质病理积分呈正相关（r=0．60、0．67，P〈0．05），IL-17mRNA的表达与血肌酐呈正相关（r=0．66，P〈0．05）。结论IgA肾病患者肾小管间质及外周血中IL-17表达增高，并与临床及病理预后指标密切相关，提示IL-17可能是参与IgA肾病发病及进展的因素之一。

成人微小病变肾病患者外周血CD4^+Foxp3^+调节性T细胞的研究

目的研究CD4+Foxp3+调节性T细胞(CD4+Foxp3+Treg)及亚群在成人微小病变肾病(MCD)患者外周血CD4+T细胞中的分布,探讨CD4+Foxp3+Treg参与MCD发病的可能机制。方法以27例经肾穿刺活检确诊为MCD的初发成人患者作为研究对象,采用Foxp3-FITC/CD45RA-PE/CD3-ECD/CD4-PC7抗体组合经流式细胞仪检测外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+Foxp3+Treg及亚群占CD4+T细胞的百分比。Real-Time PCR检测PBMCs中Foxp3、Th17转录因子RORc以及细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达。设立正常对照。结果流式细胞检测显示CD4+Foxp3+Treg分成3个细胞群体,分别为CD45RA+Foxp3low(Ⅰ区,静息期Treg)、CD45RA-Foxp3high(Ⅱ区,活化Treg)和CD45RA-Foxp3low(Ⅲ区)。MCD组Ⅰ区+Ⅱ区细胞和Ⅱ区细胞占CD4+T细胞的百分比显著低于对照组(P<0.01)。MCD组PBMCs中Foxp3mRNA表达较对照组下调(P<0.05),RORcmRNA表达较对照组上调(P<0.05),IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达均显著高于对照组(P<0.05和P<0.01)。相关性分析显示,MCD组IL-17A mRNA表达与Ⅱ区细胞占CD4+T细胞的百分比呈显著负相关(r=-0.81,P<0.05)。结论成人MCD患者外周血Treg及其活化功能亚群减少,同时伴有Th17转录基因及其相关细胞因子表达的异常升高。提示Treg Foxp3 mRNA表达下调及Treg/Th17细胞比例失衡可能与MCD的发病有关。