RGS5和ATP1B1基因与原发性高血压的相关性研究

目的探讨中国汉族人群中G蛋白信号调节因子5(RGS5)和ATP1B1基因功能区标签单核苷酸多态性(SNP)与原发性高血压的相关性及变异位点间的交互作用。方法选择启动子、外显子和3’UTR区符合最小等位基因频率在中国北京汉族人群中>5%、R2≥0.80的SNP。对906例原发性高血压患者(EH组)进行SNP位点的基因分型,以性别和年龄与EH组匹配的894名血压正常者作为正常对照组。观察不同基因型和等位基因频率在EH组和对照组中的分布,并采用MDR软件分析各位点之间的交互作用。结果最终3个标签SNP入选。EH组与对照组SNP位点基因型分布和等位基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05);由2个基因SNP位点组成的单倍型,在EH组和对照组的分布比较差异也无统计学意义(P>0.05)。交互作用分析显示,2个或3个位点模型比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论3个标签SNP与EH无明显相关性,并且可能不存在交互作用。

脂联素基因3224C/T多态性与男性高血压患者发生糖代谢异常相关性研究

目的:探讨脂联素基因3’非编码区(UTR)3224C/T多态性与中国上海地区男性高血压患者发生糖代谢异常的关系。方法:研究对象共729例,其中男性高血压伴糖耐量异常(IGT)患者359例,男性高血压伴糖耐量正常(NGT)患者370例。采用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱(MALDI-TOF)检测技术鉴定脂联素基因3224C/T多态性。同步进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放实验。结果:脂联素基因3224C/T多态等位基因频率和基因型分布,在IGT和NGT2组间分布有显著差异(均P<0.05);T等位基因携带者IGT患病率显著高于C等位基因携带者(OR=1.35,95%CI:1.06～1.71);TT基因型个体OGTT30min血糖、β细胞分泌功能1相和2相均明显高于CC和CT基因型个体(均P<0.05)。结论:脂联素基因3’UTR区3224C/T多态性可能与男性高血压患者发生糖代谢异常相关。

Apelin基因与原发性高血压的相关性

目的探讨apelin基因多态性及单倍型与原发性高血压的相关关系。方法选取上海地区汉族人群原发性高血压家系248家共1 042人为研究样本,应用TaqMan(MGB荧光探针定量PCR技术,检测各样本apelin基因启动子区T-1860C和rs3761581基因多态性分型。应用FBAT软件预测该两个多态性位点可能组成的单倍型,并对多态位点及单倍型与原发性高血压的关系进行分析。结果所选位点基因型频率在研究人群中的分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。应用FBAT统计分析结果显示T-1860C、rs3761581及其组成的单倍型A-T与原发性高血压相关。其中T-1860C的T等位基因(Z=1.991,P=0.046)和rs3761581的A等位基因(Z=2.119,P=0.034)可以由亲代下传给患病子代。结论位于apelin基因启动子区的多态性位点与上海地区汉族人群原发性高血压存在相关关系,单倍型A-T可能参与高血压的发病。

血管外膜肌成纤维细胞分化相关蛋白研究

为寻找涉及血管紧张素II(AngⅡ)和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的血管肌成纤维细胞(MF)分化的蛋白,本研究采用双向电泳和质谱从整体水平检测了MF分化前后蛋白表达谱的变化,共找到41个差异表达的蛋白点,表达水平和/或蛋白位置在AngII和TGF-β1刺激后都发生明显变化的蛋白点14个,4个蛋白上调,6个蛋白下调,2个蛋白位置发生明显变化,2个蛋白表达上调,位置也发生变化;只在AngII诱导的MF中表达发生变化的蛋白20个,只在TGF-β1诱导的MF中表达发生变化的蛋白7个.选取AngII和TGF-β1共同调节的14个蛋白进行质谱鉴定,结果除骨架蛋白外,首次发现MF分化同泛素蛋白酶体系统和嘌呤合成有关;septin2的下调可能是成纤维细胞分化的标志.本研究运用蛋白质组学技术发现了新的参与MF分化的蛋白质,为进一步研究和干预细胞表型转化提供了新的思路和靶点.

磷酸二酯酶在鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用

目的观察磷酸二酯酶（PDE）1和PDE3亚型在大鼠胸主动脉中的表达及其对血管张力的调节作用。方法采用RT-PCR检测PDE1和PDE3亚型mRNA的表达。将大鼠胸主动脉制备成2—3mm的血管环，苯肾上腺素（PE）诱导血管环收缩后，分别用特异性PDE1抑制剂IC86340和PDE3抑制剂milrinone处理去除内皮组和保留内皮组的血管环，测定两组舒张血管的作用。结果①PDE1A、PDE1B、PDE1C、PDE3A和PDE3B亚型mRNA在大鼠胸主动脉均有表达。②在保留内皮组和去除内皮组，IC86340均舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）；并且对去除内皮组的舒张作用小于保留内皮组（P〈0．01）。③在保留内皮和去除内皮组，milrinone均可舒张PE诱发的血管收缩（P〈0．01）；但milrinone在低浓度时（1×10^-6.5～1×10^-6mol／L），去除内皮组舒张血管的作用大于保留内皮组（P〈0．05），而高浓度（1×10^-5.5 ～1×10^-5mol／L）时两组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PDE1和PDE3亚型mRNA在大鼠胸主动脉表达并参与血管张力的调节。PDE1部分通过血管内皮依赖的机制调节血管张力，PDE3则通过内皮非依赖的途径调节血管张力。

大鼠骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化潜能的研究

目的体外研究大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs)分化为血管内皮细胞的潜能。方法采用密度梯度离心法分离rMSCs,体外扩增并进行鉴定。在内皮细胞生长培养基(EGM-2)中以血管内皮细胞生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)定向诱导rMSCs向血管内皮细胞分化,观察细胞形态学变化。采用免疫细胞化学法和Dil荧光标记法,分别检测诱导后rMSCs的内皮细胞表型表达及对乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)的摄取能力。结果形态学观察显示,诱导后的rMSCs可见类似内皮细胞样改变,并表达血管内皮细胞特异的表面标志vWF和CD31,但仅少数细胞具有摄取Dil-Ac-LDL的能力。结论VEGF和bFGF在体外能够诱导rMSCs出现内皮细胞表型,但尚不完全具备成熟内皮细胞的功能特性。rMSCs具有向血管内皮细胞分化的潜能。

犬尿氨酸代谢与血压调节

色氨酸犬尿氨酸代谢通路涉及一系列酶促反应,生成多种具有生物活性的化合物,参与许多病理生理过程。近年来发现其代谢途径中犬尿氨酸酶、犬尿氨酸氨基转移酶的催化反应产物可能与血压的调节有关。本文就目前色氨酸犬尿氨酸代谢通路与血压调节关系的相关研究进行论述。

痰湿质高血压患者胰岛素抵抗与脂联素基因相关性

目的探讨按中医体质分类的痰湿体质高血压患者胰岛素抵抗是否存在异常以及与脂联素基因多态性的关系。方法分析436例(痰湿质组228例,非痰湿质组208例)高血压患者胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与6个脂联素基因单核苷酸(SNP)多态性的相关性。结果①痰湿质组和非痰湿质组高血压患者ISI分别为-1.89±0.29和-1.87±0.29(P=0.007),HOMA-IR分别为0.53±0.29和0.52±0.29(P=0.007);②男性脂联素基因rs266729的CC型、rs1501299的CA型和rs182052的GG型中痰湿质组比非痰湿质组高血压患者胰岛素敏感性降低,胰岛素抵抗性增高,女性脂联素基因rs1063537的CC型、rs1063539的GG型和rs224176的TT型痰湿质组高血压患者的结果则相反。结论①痰湿质组高血压患者比非痰湿质组高血压患者存在胰岛素的敏感性降低,胰岛素抵抗性增高的现象,男性之间的差别显著,女性差异不显著;②脂联素基因多个位点可能是痰湿质高血压患者胰岛素抵抗的遗传标志之一,且存在性别上的差异。

法舒地尔对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响

目的观察特异性Rho激酶抑制剂法舒地尔对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块进展的影响,并探讨其可能的作用机制。方法8周龄ApoE-/-小鼠高脂饲料喂养12周后给予法舒地尔干预,12周后结束实验。将ApoE-/-小鼠随机分为三组(n=10):对照组(饮用水)、法舒地尔低剂量组(30mg·kg-1.d-1)和法舒地尔高剂量组(100mg·kg-1.d-1)。在实验结束时,测量小鼠体质量、血压及血脂水平;对头臂干动脉粥样硬化病变进行病理学检查;化学发光法及组织荧光法检测小鼠胸主动脉超氧阴离子和活性氧(ROS)。结果法舒地尔干预对ApoE-/-小鼠体质量、收缩压及血脂水平均无明显影响。与对照组相比,法舒地尔高剂量组头臂干动脉粥样硬化斑块面积和动脉内-中膜厚度(IMT)分别减少54%(P<0.01)和42%(P<0.05)。法舒地尔干预使ApoE-/-小鼠胸主动脉原位ROS的生成较对照组明显减少(P<0.01);法舒地尔高剂量组胸主动脉的超氧阴离子产量低于对照组(P<0.05)。结论阻断Rho激酶可抑制ApoE-/-小鼠头臂干动脉粥样硬化斑块的进展,其作用独立于血压和血脂水平,可能与抗氧化应激有关。

高效液相色谱法测定SHR尿液中犬尿喹啉酸含量的变化

目的建立高效液相色谱荧光法测定尿液中犬尿喹啉酸（KYNA）含量的方法,观察不同周龄自发性高血压大鼠（SHR）及其正常对照大鼠（WKY）的尿KYNA含量变化。方法高效液相色谱荧光法采用的色谱柱为ODS色谱柱,流动相为10 mmol/L醋酸钠缓冲液（pH4.5）和乙腈（体积95∶5）,激发波344 nm,发射波398 nm。选择4周龄WKY大鼠和SHR各4只、16周龄WKY大鼠和SHR各6只检测24 h尿液中的KYNA含量,并进行统计学分析。结果KYNA浓度检测的线性范围0.220-33.000nmol/mL（R^2=0.999 1）,回收率为（90.37±8.47）%,日内差异为4.70%-9.40%,日间差异为5.20%-7.50%。4周龄WKY组24 h尿KYNA含量为（41.251±22.663）μg/24 h尿,SHR组为（35.387±10.814）μg/24 h尿,两组间无统计学差异（P〈0.05）;16周龄SHR尿KYNA含量为（39.511±15.985）μg/24 h尿,较WKY组（90.690±42.189）μg/24 h尿明显降低（P〈0.05）。结论高效液相色谱荧光方法具有灵敏、稳定、特异性高等特点,可用于临床检测尿KYNA。成年SHR尿KYNA含量较WKY大鼠减少,提示可能与高血压的发生发展有关。

新型肾上腺素β受体阻滞药奈必洛尔在心血管疾病中的应用进展

奈必洛尔是一种新型的第三代肾上腺素β受体阻滞药,对β_1受体具有高选择性,可通过内皮L-精氨酸/一氧化氮途径扩张血管,清除自由基,改善内皮功能,还具有不干扰糖脂代谢、抗血小板聚集等优点。本文综述了奈必洛尔的结构特点、药动学、作用机制和临床研究进展。