旁效应在基因治疗中的作用

目前化疗、放疗等治疗形式在癌症治疗效果上非常有限,而基因治疗是一种非常有前景的方法,旁效应是指部分细胞转入的特定基因片断会发生漂移,进入到没有转基因的细胞中,其在基因治疗中也起着重中之重的作用。本文简单介绍了一些基因转移系统、基因治疗方法,重点阐述旁效应在基因治疗中的作用及其产生机理,从而提高基因治疗的效率。

肿瘤基因治疗的腺病毒策略

腺病毒载体是目前肿瘤临床试验中使用最为广泛的载体之一。在过去的十几年里，随着人们对腺病毒活动周期的逐步了解，已经开发出了一系列专门针对恶性肿瘤细胞的靶向腺病毒载体。这些载体可以在特定的细胞中表达治疗性基因或进行自主复制，显示了其在肿瘤治疗方面的独特优势。但目前对腺病毒进行的各种改进方式都存在不同程度的缺陷，因此仍需进一步研究。文章讨论腺病毒载体用于肿瘤基因治疗方面的一些基本情况及其在临床应用的潜力。

应用可调控Notch1干扰载体诱导HeLa细胞增殖抑制

背景与目的:Notch信号转导途径与细胞增殖与分化的调控密切相关,它的功能失调在肿瘤细胞的增殖分化中发挥着重要的作用。本研究构建了针对Notch1的可调控RNA干扰载体,并从分子水平及细胞水平上研究其对HeLa细胞的影响。方法:利用受CRE重组调控的RNA干扰载体pSico和pSicoR构建针对GAPDH和Notch1的shRNA表达载体,以pBS185-CRE作为CRE蛋白的表达载体,将HeLa细胞分为pSico、pSico/CRE、pSicoR和pSicoR/CRE4组,分别转染相应质粒,RT-PCR和Westernblot法检测干扰效率,CBF-1荧光素酶报告载体检测细胞内活性Notch信号水平,MTS实验检测细胞增殖状态。结果:各组细胞在转染重组质粒pSico(R)-GAPDH和pSico(R)-Notch1后,EGFP的表达均表现出明显的CRE依赖性;RT-PCR和Westernblot实验显示,pSico(R)-Notch1载体能在CRE蛋白的调控下抑制Notch1基因的表达,CBF-1荧光素酶报告载体实验可见,Notch1的干扰作用使细胞内Notch信号水平下降;MTS实验可见Notch1干扰引起的HeLa细胞增殖抑制。结论:由可调控RNA干扰载体介导的CRE依赖性Notch1表达降低能降低细胞内Notch信号水平并抑制HeLa细胞增殖。

E1B缺失腺病毒H101的研究进展

E1B缺失腺病毒H101是采用基因重组技术对人5型腺病毒进行基因重组得到的一种溶瘤腺病毒,它主要是删除了人5型腺病毒的E1B-55×10~3和E3区19×10~3基因片段,具有在肿瘤细胞中特异性复制而最终导致溶瘤的特性。