武汉地区耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因突变分析

目的探讨武汉地区结核分枝杆菌(MTB)利福平耐药株rpoB基因的突变特征。方法对76例MTB临床分离株包括rpoB核心区域81 bp碱基在内的428 bp碱基进行PCR测定,并进行DNA序列分析。结果 76例临床分离MTB中利福平耐药株56例,敏感株20例。耐药株中92.9%(52/56)存在突变,共涉及10个密码子的18种突变类型。531、526为常见突变位点,其突变率分别为57.7%(30/52)、19.2%(10/52);联合突变率为13.5%(7/52);同时发现了509位(AGC→AGA)新的突变类型和国内少见的517位CAG缺失类型。结论 rpoB基因突变在武汉地区利福平耐药MTB中广泛存在,并存在新的突变位点。

XTT/mPMS组合显色系统用于抗分枝杆菌药物筛选的性能评估

目的评估一种用于抗分枝杆菌药物高通量筛选的XTT/mPMS组合显色系统。方法评估XTT/mPMS系统的检测限、稳定性、细胞毒性、培养基组分干扰作用以及药物筛选试验的信噪比、Z'因子等性能指标,进行常用抗分枝杆菌药物最低抑菌浓度(MIC)测定,与刃天青显色法(resazurin microtitre assay,REMA)结果比较。结果 XTT/mPMS对分枝杆菌的检测下限为2.4×107CFU/mL,检测上限不同菌种在1.8×108～7.5×108CFU/mL之间。XTT/mPMS和7H9培养基37℃恒温共培养时至少在7 d内保持相对稳定。XTT/mPMS能与7H9-S培养基组分的营养添加剂(OADC)发生非细胞还原反应;其工作浓度(XTT 0.2 mmol/L,mPMS 0.04 mmol/L)对分枝杆菌具有低细胞毒性;XTT/mPMS检测的Z'因子均大于0.8,信噪比较低;分枝杆菌7H9-S液体培养MIC检测5～7 d(快生菌36～48 h)即可获得结果;MIC结果除M.tuberculosis的乙胺丁醇(EMB)有差异外基本与REMA法一致。结论 XTT/mPMS组合显色系统反应快速、稳定、低毒,适合于抗分枝杆菌药物高通量快速筛选。

RD区编码蛋白在结核病免疫诊断中的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌引起的威胁人类的重大传染性疾病之一。目前常用诊断方法其灵敏度差和检测周期长难以满足早期诊断的需要,免疫诊断作为其防控的早期诊断技术之一,近年来得到更加广泛的关注。而结核分枝杆菌RD区编码蛋白的发现,促进了结核病免疫诊断的迅速发展。本文对目前RD区编码蛋白在结核病诊断中的研究进展进行了概述。