振动感觉阈值(VPT)在糖尿病周围神经病变(DPN)中的诊断价值

目的探讨以振动感觉阈值(vibrating perception threshold,VPT)检查为主联合糖尿病神经病变症状评分(diabetic neuropathy symptom,DNS)、足外观、温度觉、痛觉及触觉5种简易检查方法在糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)中的诊断价值。方法 217例2型糖尿病患者记录DNS,同时行足外观检查、VPT、温度觉、痛觉、半定量音叉、10g尼龙丝检查和肌电图神经传导速度(nerve conducting velocity,NCV)测定。按神经电生理检查结果,分为不合并周围神经病变组(n=130),合并周围神经病变组(n=87),比较两组的基本情况和代谢指标。计算5种联合检查方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度、Youden指数以及Kappa值(κ值),与NCV检查进行相关性和一致性分析。结果两组间年龄、糖尿病病程、VPT值有显著差异,DPN组明显高于无DPN组(P<0.05)。VPT与正中运动神经传导速度(motor conducting velocity,MCV)、尺神经MCV、腓总神经MCV、腓浅神经感觉性传导速度(sensory conducting velocity,SCV)、胫神经MCV之间均呈负相关(P<0.05)。5种联合检查方法与NCV检查的秩相关分析均呈显著正相关(P<0.01),VPT联合DNS检查与NCV的相关性最好(r=0.799)。VPT联合DNS检查的敏感度、特异度、准确度分别为74.4%、100%、89.9%,与NCV检查高度一致(κ值为0.780)。结论 VPT联合DNS是准确筛查和诊断DPN的适用方法。

2型糖尿病患者蛋白尿程度与振动感觉阈值的关系

目的探讨2型糖尿病患者尿白蛋白/肌酐比值(urinary albumin creatinine ratio,UACR)的影响因素及其与振动感觉阈值(vibration perception threshold,VPT)的相关性。方法测定538例2型糖尿病门诊患者的UACR和VPT,根据UACR分为无蛋白尿组(NA,n=395)、微量蛋白尿组(MA,n=110)和大量蛋白尿组(OA,n=33)。比较3组的基本情况、血糖、肾功能及VPT,分析UACR的影响因素。结果 3组在年龄、糖尿病病程、收缩压、舒张压、糖化血红蛋白(glycolated hemoglobin,HbA1c)、糖化血清白蛋白(glycolated serum albumin,GA)、血尿素氮、血肌酐、UACR和VPT之间的差异有统计学意义。NA、MA、OA组中VPT异常者分别占14.18%、25.45%、48.48%(两两比较,P均<0.05)。UACR与年龄、糖尿病病程、体重指数、收缩压、舒张压、HbA1c、GA、空腹血糖、餐后2 h血糖(2 h postprandial blood glucose,PPG)、血尿素氮、血肌酐和VPT呈正相关(P均<0.05)。多元回归分析显示糖尿病病程(r=0.152,P=0.001)、收缩压(r=0.072,P=0.011)是UACR的独立影响因素。不同糖尿病病程的亚组分析显示UACR、VPT的差异有统计学意义,合并肾病和VPT异常的比例也逐渐升高。结论糖尿病病程、收缩压是UACR的独立影响因素;随着蛋白尿程度加重,合并VPT异常的发生率增加。

小檗碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响

目的观察不同浓度小檗碱对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出的影响,并探讨其可能的作用机制。方法佛波酯(PMA)刺激THP-1细胞分化为巨噬细胞后经乙酰化低密度脂蛋白(AcLDL)诱导泡沫化,建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型。根据小檗碱干预与否及干预浓度将泡沫细胞分为空白对照组和小檗碱(5～20μmol/L)干预组。细胞经分组处理24h后,流式细胞仪检测AcLDL聚集量;酶法检测胆固醇和乙酰甘油含量;闪烁计数法检测各组胆固醇流出率,同时分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制剂GW9662预处理对胆固醇流出率的影响(以吡格列酮作为阳性对照);RT-PCR检测肝X受体α(LXRα)和三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)mRNA表达。结果与空白对照组比较,不同浓度小檗碱干预组泡沫细胞内AcLDL聚集量及胆固醇和乙酰甘油含量均显著减少(P<0.01),而胆固醇流出率上升(P<0.01),并呈现一定的量效关系。GW9662预处理后,不同浓度小檗碱干预组泡沫细胞的胆固醇流出率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。不同浓度小檗碱干预组泡沫细胞LXRα和ABCA1mRNA表达均高于空白对照组。结论小檗碱可增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇的流出量,其作用机制可能与激活PPARγ途径,增加LXRα和ABCA1mRNA表达有关。

线粒体的功能及检测方法

对线粒体进行检测有助于线粒体疾病的诊断。目前对线粒体功能检测的方法有呼吸控制率、线粒体ATP生成率、离子通道开放状态、线粒体膜电位变化、前臂有氧运动实验等。通过电镜可直接观察线粒体的形态变化。每种方法均有各自的原理和优缺点,临床需根据实际选择合适的方法,且尚需探索更为理想、简单、经济的检测手段。

2型糖尿病患者颈动脉内膜中层厚度及其相关危险因素分析

【目的】探讨2型糖尿病(T2DM)患者颈动脉内膜中层厚度(IMT)的危险因素并进行分析。【方法】超声检测98例T2DM患者颈动脉IMT及粥样斑块形成情况,并予血糖、血脂、血尿酸等生化检查,根据有无粥样斑块形成分为无斑块组与斑块组,并分析各危险因素之间的相关性,进行评估。【结果】T2DM患者中斑块发生率为46.94%,有斑块组糖尿病病程、高血压病程、年龄明显高于无斑块组,比较有显著差异。相关性分析显示IMT与高血压病程、年龄、载脂蛋白B(ApoB)、脂蛋白(a)[Lp(a)]等呈正相关。【结论】T2DM患者颈动脉IMT受多种因素影响,控制血压、脂代谢紊乱有助于延缓动脉粥样硬化发展。

糖尿病肾病患者尿微量蛋白与胰岛素抵抗的关系

【目的】探讨2型糖尿病肾病(DN)患者尿微量蛋白(mALB)与胰岛素抵抗(IR)之间的关系。【方法】检测81例2型DN患者mALB及血糖、胰岛素、血脂等生化指标,分析各指标之间的相关性,并根据尿白蛋白量分为正常蛋白尿组与蛋白尿组进行评估。【结果】mALB与尿转铁蛋白(TRF)、尿免疫球蛋白G(IgG)、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿α1-微球蛋白(α1-MG)呈正相关。蛋白尿组胰岛素敏感指数(ISI)明显低于无蛋白尿组,甘油三酯、空腹胰岛素、2h胰岛素、TRF、尿IgG、尿β2-MG、尿α1-MG均高于无蛋白尿组,且差异有显著性。【结论】mALB、TRF、尿IgG、尿β2-MG、尿α1-MG均可作为早期DN检测的指标,且与IR相关。

伴牙周炎糖尿病患者血清和龈沟液中C反应蛋白的检测及意义

目的:了解龈沟液和血清中C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平与牙周炎症状况、血糖控制情况的关系。方法:检测伴慢性牙周炎2型糖尿病组、慢性牙周炎组、2型糖尿病组和健康人群组血清和龈沟液中CRP浓度、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbAlc)水平,记录牙周探诊深度(probing depth,PD)和龈沟出血指数(sulcus bleeding index,SBI)。采用SPSS10.0软件包进行独立样本t检验和Spearman相关分析。结果:伴慢性牙周炎2型糖尿病组、慢性牙周炎组、2型糖尿病组血清CRP均比正常对照组显著升高(P<0.01),且伴慢性牙周炎2型糖尿病组血清CRP水平最高,显著高于慢性牙周炎组(P<0.01)和2型糖尿病组(P<0.05);4组的龈沟液CRP水平均远低于血清水平,且4组间无显著差异(P>0.05);血清CRP与龈沟液CRP无相关性(P>0.05);血清CRP与PD、SBI和HbAlc显著相关(P<0.01)。结论:CRP可能参与了牙周炎和2型糖尿病之间的互相影响;龈沟液CRP水平不能反映牙周病炎症程度和糖尿病病情。

线粒体基因突变糖尿病的基因诊断与治疗进展

线粒体基因突变糖尿病是糖尿病的一种特殊类型，是因线粒体基因突变所引起的非胰岛素依赖性糖尿病，属于B细胞遗传缺陷疾病。1992年荷兰Vanden Ouweland等首次报道了一例线粒体tR—NALeu（UUR）3243A—G突变引起的母系遗传糖尿病伴神经性耳聋的家系。此后近20年来，大量的实验研究证明线粒体基因突变是导致家族性糖尿病的重要原因之一。

糖尿病动脉粥样硬化中巨噬细胞凋亡的研究进展

糖尿病是对人类健康有严重威胁,对社会发展有重大影响的疾病。大多数糖尿病患者死亡与致残的原因为大血管动脉粥样硬化并发症。在动脉粥样硬化性病变的进展过程中,一个关键的步骤就是易损斑块的形成。巨噬细胞凋亡与易损斑块形成密切相关。在晚期动脉粥样硬化病变处,多种信号途径诱导巨噬细胞凋亡,其中内质网应激(ERS)起重要作用。在高血糖、胰岛素抵抗状态下,ERS诱导的巨噬细胞凋亡增加,促进易损斑块的形成,加速动脉粥样硬化性血管疾病的进程。

生长激素受体及其亚型与糖尿病及其并发症的关系

在糖尿病患者及糖尿病动物模型中均存在生长激素受体的异常。作为哺乳动物体内生长激素的主要受体,可活化信号转导、促前脂肪细胞分化等,生长激素受体活性和(或)数量的变化对生长激素的功能产生明显的影响。现对生长激素受体的分子结构、组织分布和功能,以及生长激素受体及其亚型与糖尿病及其并发症之间的相互影响进行综述。

人骨生成诱导因子基因慢病毒载体构建及在人主动脉平滑肌细胞中稳定过表达

目的:构建人骨生成诱导因子基因(osteoinductive factor,OIF)慢病毒载体,并在人主动脉平滑肌细胞(human aorticsmooth muscle cell,HASMC)中稳定过表达OIF。方法:PCR扩增OIF-3FLAG,并克隆到慢病毒载体pMSCV PIG中,构建慢病毒表达载体pMSCV PIG-OIF-3FLAG,并测序鉴定。应用脂质体将pMSCV PIG-OIF-3FLAG或pMSCV PIG与VSVG、GAG-POL共转染293T细胞,48 h后收集细胞上清,感染HASMC,48 h后加入嘌呤霉素4 d,即筛选出稳定过表达pMSCV PIG-OIF-3FLAG的HASMC细胞株,采用real-time PCR和Western blot检测OIF mRNA和蛋白表达。结果:构建OIF基因慢病毒表达载体pMSCV PIG-OIF-3FLAG,经酶切及测序后证实目的基因的插入位点和读码框正确;包装病毒感染HASMC,经real-time PCR和Western blot检测证实OIF mRNA和蛋白水平在该细胞株中高表达。结论:成功构建人OIF基因的慢病毒载体,并获得稳定过表达该基因的HASMC。

巨噬细胞亚群与胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素抵抗是2型糖尿病发病的关键因素之一。在2型糖尿病胰岛素抵抗的发生、发展中,巨噬细胞起到了非常关键的作用。巨噬细胞是具有可塑性和多能性的细胞群体,在体内外不同微环境诱导下可极化为功能截然不同的细胞亚型。根据活化状态和功能不同,目前主要分为M1型和M2型,M1型主要发挥促炎性作用,M2型主要发挥抗炎性作用,两者在肥胖诱导胰岛素抵抗的发生、发展中分别起到促进和抑制的作用。

葡萄糖抑制THP-1巨噬细胞载脂蛋白E的表达

目的:观察葡萄糖对人单核细胞性白血病细胞株(human monocytic leukemia cell line,THP-1)巨噬细胞的载脂蛋白E(Apo E)表达的影响。方法:用佛波脂诱导THP-1细胞使其分化成巨噬细胞。再用含不同浓度葡萄糖的RPMI 1640培养基培养巨噬细胞72 h后,RT-PCR和Western Blot分别检测巨噬细胞Apo E的mRNA和蛋白的表达,同时用MTT法检测各组细胞活力。结果:葡萄糖呈剂量依赖性(20~30 mmol/L),明显抑制THP-1巨噬细胞Apo E的表达。结论:葡萄糖抑制THP-1巨噬细胞Apo E的表达,其可能是导致动脉粥样硬化的机制之一。

细胞间粘附分子-1及甲状腺自身抗体测定的临床意义

目的探讨自身免疫性甲状腺功能亢进症患者,在病程中细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、甲状腺功能(FT3、FT4、TSH)、甲状腺自身抗体(TG-Ab、TPO-Ab)的变化及相互之间的关系。方法根据疾病的不同阶段进行分组,比较各组间sICAM-1、甲状腺自身抗体的水平及sICAM-1与甲状腺功能、甲状腺自身抗体之间的相关性。结果甲亢患者病程中sICAM-1均明显升高,但在病程的不同阶段其水平具有波动性,甲亢初发、复发的病人sICAM-1水平较甲亢已治疗组明显升高;甲亢转为甲减的病人,其sICAM-1、TG-Ab、TPO-Ab的水平较其他各组病人明显升高。结论sICAM-1结合甲状腺自身抗体的测定,可能是反映甲状腺炎性活动程度的免疫指标,可作为临床判断疗程、愈后、协助鉴别诊断等观察指标。

内质网应激对巨噬细胞类泛素折叠修饰蛋白Ufm1表达的影响

目的探讨内质网应激(ERS)对巨噬细胞类泛素折叠修饰蛋白(Ufm1)表达的影响。方法制备糖尿病模型小鼠(db/db鼠,糖尿病组,n=6)和同窝野生型(WT)C57小鼠(对照组,n=6)的原代腹腔巨噬细胞,采用Real-Time PCR技术检测ERS相关分子(GRP78、XBP1)及Ufm1 mRNA的表达。分别用8μg/mL衣霉素(TM)、0.5μmol毒胡萝卜素(TG)和0.8μmol TG诱导小鼠-单核巨噬细胞系RAW264.7,采用Real-Time PCR技术检测GRP78、XBP1和Ufm1 mRNA的表达,采用Western blotting法检测ERS相关因子(p-eIf2α、eIf2α、CHOP)及Ufm1蛋白的表达。结果糖尿病组小鼠腹腔巨噬细胞GRP78、XBP1和Ufm1 mRNA的表达量均显著高于对照组(均P<0.001)。经TM或TG诱导的RAW264.7细胞中Ufm1 mRNA和蛋白的表达量均明显高于阴性对照细胞(P<0.05)。结论糖尿病小鼠腹腔巨噬细胞中ERS相关因子及Ufm1的表达同时升高。体外诱导巨噬细胞株ERS能导致Ufm1的表达升高;提示Ufm1可能部分通过ERS途径影响巨噬细胞功能而参与糖尿病动脉粥样硬化过程。

泛素折叠修饰因子1作用的研究进展

泛素折叠修饰因子1(Ufm1)是最近发现的一种类泛素蛋白,其三级结构与泛素十分类似,但其氨基酸序列与泛素只有16%的相似性。Ufm1及其修饰系统广泛、稳定地存在于多细胞生物中。Ufm1结合到靶蛋白需要通过一系列的酶级联反应,首先Ufm1被Uab5激活,然后转移给Ufc1及Ufl1,最后Ufm1与靶蛋白结合,并对其进行加工、修饰。Ufm1及其修饰系统参与了内质网应激及其诱导的凋亡,同时也参与了细胞周期、细胞存活、脂肪酸β氧化等生物过程的调控,为进一步研究Ufm1的功能提供了新的方向。

肠促胰岛素的功能研究进展

研究表明，大约e／3的饮食所引起的胰岛素分泌都与肠道内分泌激素有关。其中，胃肠道分泌的肠促胰岛素是最主要的激素之一，其主要包括葡萄糖依赖性促胰岛素多肽（GIP）及胰高糖素样肽-1（GLP-1）。

过表达mimecan对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的作用初探

目的应用反转录病毒载体技术构建稳定过表达mimecan的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),并观察过表达mimecan后HUVEC增殖及凋亡的变化。方法应用反转录病毒载体构建稳定过表达mimecan的HUVEC细胞株,real-time PCR和Western blot法检测mRNA和蛋白水平的表达。应用CCK-8方法检测过表达mimecan后HUVEC增殖的变化,应用AnnexinⅤ-PE染色观察过表达mimecan后HUVEC凋亡的变化。结果构建了稳定过表达mimecan的HUVEC细胞株。过表达mimecan后,HUVEC增殖能力降低,凋亡率增加。结论过表达mimecan抑制HUVEC的增殖,促进其凋亡。

外被体蛋白Ⅰ结构与功能的研究进展

外被体蛋白Ⅰ(COPⅠ)是一个七聚体复合物,在酵母及真核细胞生物体中广泛表达并发挥着不可或缺的作用。COPⅠ参与形成逆向转运囊泡(即COPⅠ囊泡),介导囊泡的逆向转运功能,将细胞中含双赖氨酸基序的蛋白、高尔基体糖基转移酶类、KDEL蛋白等逆向运输到细胞内的特定区域,在保持内质网和高尔基体的完整性、调节细胞内脂质代谢、维持细胞稳态及机体的生长发育中发挥重要作用。COPⅠ功能缺陷会导致脂质代谢异常、肿瘤以及神经系统疾病的发生。

血清可溶性人基质裂解素水平与2型糖尿病患者心血管风险因素的相关性

目的探讨血清可溶性人基质裂解素(sST2)水平与T2DM患者患心血管疾病风险的相关性。方法根据Framingham十年心血管风险评分将239例研究对象分为4组,收集临床资料,并检测血脂、FPG、2hPG、HbA1c及纤维蛋白原(FIB)等。ELISA检测sST2水平。结果随心血管风险的升高,血清sST2水平呈升高趋势,4组浓度比较,差异有统计学意义(P<0.01)。除第2组和第3组比较差异无统计学意义,其余各组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清sST2水平与年龄、血浆FIB呈正相关(r=0.372、0.201,P=0.000、0.009)。血清sST2水平在既往有无血压异常的患者间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清sST2水平与T2DM患者心血管风险因素年龄、血浆FIB、Framingham十年心血管风险分层呈正相关。