微小RNA(microRNA)与雄性生殖

作为非编码RNA家族的一类重要成员,目前越来越多的证据显示microRNA(miRNA)分子广泛参与细胞增殖、分化、凋亡、信号转导、器官形成、脂肪代谢、造血、胚胎发育、病毒复制,甚至肿瘤发生等多种细胞生命活动进程的调控。对人与鼠睾丸组织的小RNA克隆文库测序发现了大量表达的miRNA分子,研究显示这些睾丸高丰度或特异表达的miRNAs可能发挥极其重要的对生殖细胞性别决定、自我更新、精原细胞有丝分裂增殖、精母细胞减数分裂以及圆形精子细胞变态等过程的调控作用。

加德纳菌感染对大鼠睾丸生精小管的影响

目的:观察加德纳菌感染对大鼠睾丸生精小管的影响。方法:18只雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,实验组膀胱内注射1mL加德纳菌液,对照组膀胱内注射相应的无菌液体培养基1mL,感染21d后,光镜和电镜观察睾丸生精小管的结构变化,流式细胞术检测生精细胞凋亡情况。结果:在实验组检测到大量凋亡的生精细胞及形态改变的支持细胞,部分生精小管出现生精细胞脱落。结论:加德纳菌感染可引起生精细胞大量凋亡、脱落,支持细胞形态改变,这些变化可能是加德纳菌感染影响睾丸结构和功能的机制之一。

溶脲脲原体蛋白UreG抗体对小鼠体外受精的影响

目的:探索与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体对小鼠体外受精的影响。方法:提取溶脲脲原体总DNA,用自行设计的引物扩增UreG全序列,PCR产物经TA克隆后,用BamHⅠ和HindⅢ双酶切,克隆到表达载体pET-28a(+)中。在E.coliBL21中,异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达His融合蛋白。用亲和层析纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,获取多克隆抗体。观察该抗体对小鼠体外受精的影响。结果:对表达重组蛋白的质粒进行DNA测序以及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,证实获取了目的蛋白。ELISA检测证实,免疫小鼠产生了高效价的抗体。该抗体能够抑制小鼠精卵的融合。结论:与人精子膜存在交叉反应的溶脲脲原体蛋白UreG抗体,可导致小鼠精卵结合率降低。

加德纳菌研究进展

加德纳菌是细菌性阴道病的主要病原菌之一,可经性接触传播,并可引起输卵管妊娠、胎膜早破和新生儿早产等不良妊娠结局,与男性泌尿生殖道感染也有关。现就Gv的分类命名、生物学特征、生物学分型、流行病学、致病机制、诊断标准、检测方法、治疗方法及临床意义作一综述。

精子膜蛋白研究进展

精子膜表面的蛋白是精子发生、成熟和精卵相互作用的重要分子,对其深入研究有助于揭示精子发生、成熟以及受精的分子机制。近年来,各种现代分子生物学技术以及生物信息学方法在生殖生物学领域的广泛应用,不仅使以前发现的一些精子膜蛋白相继得到克隆和测序,同时新的精子膜相关蛋白也不断被发现,为从基因和蛋白质水平研究其生物学功能、揭示生物生殖的分子机制并进而为避孕疫苗的开发等奠定了基础。本文就近年来精子膜蛋白的研究进展作一综述。

哺乳动物输卵管液蛋白的功能研究进展

哺乳动物输卵管不仅是配子运行的通道和受精场所,并且对精子活动力、精子顶体反应、精卵黏附和识别、穿卵及早期胚胎的发育等都有极为重要的作用。由于这些作用主要通过输卵管液这个媒介进行,因此,输卵管液中丰富的蛋白成分无疑在这些过程中扮演了关键的角色。阐述哺乳动物输卵管液蛋白的成分及其对精子功能、受精和早期胚胎的作用,这对全面了解受精过程和机制、对某些不育症的诊治以及最终对生殖过程的干预,如新型避孕疫苗的研制等都具有重要的理论和实践意义。

男性泌尿生殖系感染的相关病原生物研究进展

男性生殖健康已日益受到人们的关注。许多病原生物与男性生殖系统感染、男性不育以及一些性传播疾病都密切相关。本文介绍4种重要的病原生物：支原体、沙眼衣原体、大肠杆菌和阴道毛滴虫。支原体中主要是溶脲脲原体（Uu），它是引起非淋菌性尿道炎（NGu）的病原体之一，并可引起附睾炎、前列腺炎：沙眼衣原体（Ct）除了可引起附睾炎、前列腺炎外，同时也是引起NGU和性病淋巴肉芽肿的主要病原体：大肠杆菌（Ecoil）则可引起多种男性生殖系统炎症，如睾丸炎、附睾炎、精索炎、输精管炎、前列腺炎等阴道毛滴虫是引起男性滴虫病的病原体，也可引起非淋菌性尿道炎。值得一提的是这4种病原生物都可以黏附于生殖道上皮细胞，与男性不育有关。

小鼠胚胎睾丸的分化机制

睾丸的分化机制一直是发育生物学与生殖生物学中的一个热点问题。由于睾丸的形成过程复杂，涉及的因素多，大部分文献只就其中的某一部分加以研究，所以有必要将众多的研究成果系统地作一归纳，使我们对睾丸的形成过程有一个较为完整而详细的了解。本文主要以小鼠为例，对近十多年胚胎睾丸分化机制的研究进展作一综述。

大鼠ERp57基因的原核表达及在精卵中的鉴定和定位

目的克隆大鼠ERp57基因、原核表达蛋白并进行纯化,最终在大鼠精子和卵细胞中进行鉴定及定位。方法运用RT-PCR从SD大鼠睾丸组织的总RNA中克隆大鼠ERp57 cDNA,构建ERp57原核表达质粒[pET-28a(+)/ERp57]并转化E.coli的BL21菌株,IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂亲和层析得到纯化的ERp57蛋白。随后,通过SDS-PAGE、Western blot和酶联免疫吸附等实验对重组蛋白进行鉴定,并利用获得的蛋白免疫家兔制备多抗。最后,利用Western blot和间接免疫荧光定位的方法研究ERp57在精子和卵细胞中的定性和定位。结果成功获得纯化后重组的大鼠ERp57蛋白,并证实大鼠成熟精子和卵细胞都存在ERp57蛋白。ERp57主要定位于附睾尾部精子头的内侧,顶体反应后定位于精子头的赤道区;卵母细胞则定位在细胞表面。结论通过对大鼠ERp57基因的原核表达和抗体的制备可为后续进一步研究该蛋白在受精过程中作用奠定实验基础,而ERp57在精卵细胞中鉴定和定位的结果表明它可能与精卵融合过程相关。