骨保护素(Opg)基因敲除小鼠发生高转换型骨质疏松和动脉钙化(英文)

骨质疏松以及动脉钙化均是危害极大的临床常见病变,骨保护素(OPG)可能是联系两者的分子之一.构建替换型载体pXpPNT-OPG,利用同源重组,将编码前3个蛋白质结构域的小鼠Opg基因组第二外显子序列剔除掉.通过胚胎干细胞(ES)基因打靶获得了正确重组的ES细胞克隆,ES细胞显微注射后获得嵌合体小鼠,交配传代获得杂合子和纯合子小鼠.RT-PCR和蛋白质印迹实验结果显示,纯合子小鼠没有Opg基因的表达.纯合子小鼠骨量丢失明显,骨生物力学指标明显下降,发生严重的骨质疏松,此外,还有50%以上的纯合子小鼠在早期出现动脉中层钙化.小鼠破骨功能亢进,与此同时,成熟成骨细胞数量增加,矿化功能强于野生型.Opg基因缺失小鼠骨中钙和磷大量流失,而血清中水平没有变化,这提示钙磷代谢异常不是OPG缺失导致动脉钙化的原因.对建立的Opg基因敲除小鼠模型进一步深入的研究,将有助于说明动脉钙化和骨质疏松症相互联系的分子机制,为防治骨质疏松症和动脉钙化的并发提供理论基础支持.

基因捕获技术

基因捕获技术是一种产生大规模基因突变的便利手段,对于揭示大量基因序列所对应的基因功能具有重要应用价值。本文综述了基因捕获技术的基本原理和研究方法、发展现状及远景。

ERK通路抑制剂苯乙酸钠对转基因小鼠唾液腺肿瘤的作用

目的:将ERK/MAPK信号通路抑制剂苯乙酸钠(NaPA)作用于PLAG1转基因小鼠唾液腺肿瘤,观察其对肿瘤生长的影响。方法:将30只肿瘤小鼠随机分为3组,分别给予NaPA最大非致死剂量、一半最大剂量及同体积生理盐水。给药结束后,收集肿瘤组织,观察其病理学特征并通过转录和翻译水平检测MAPK相关基因ERK1/2、ph-ERK1/2、cyclin D1的表达量,利用SPSS 19.0软件包对3组结果进行单因素方差分析。结果:NaPA处理过的小鼠肿瘤生长明显受到抑制,且细胞无异常核分裂像,性质趋于良性。MAPK相关基因磷酸化ERK1/2、cyclin D1蛋白水平表达量较对照组减少,差异有显著性(P<0.05),但非磷酸化ERK1/2的RNA和蛋白水平表达均无显著差异(P>0.05)。结论:NaPA可以通过抑制ERK/MAPK通路阻碍唾液腺肿瘤的生长,使细胞增殖减少,有望用于唾液腺肿瘤的药物治疗。

性反转综合征46,XY女性一例

患者社会性别女性，34岁，因原发闭经，生殖器畸形30余年就诊。查体：患者阴部见小阴茎，尿道下裂，无阴道，未扪及睾丸。B超检查示盆腔内无子宫及卵巢。父母非近亲结婚。

雷洛昔芬对骨保护蛋白基因缺失小鼠的抗骨质疏松作用

目的利用骨保护蛋白（osteoprotegerin，OPG）基因剔除小鼠模型研究选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬对雌鼠和雄鼠的抗骨质疏松作用。方法取二月龄OPG基因剔除（OPG^-/-）的雌鼠和雄鼠各20只。随机分为雷洛昔芬组（3mg·kg^-1·d^-1）和安慰剂组，另取野生型雌鼠10只作为对照组，1个月后杀鼠取材。测量骨密度、骨生物力学、骨形态计量学，并进行骨组织病理学检查及破骨细胞染色，评价雷洛昔芬的疗效。结果OPG^-/-小鼠呈现明显的骨质疏松表型。雷洛昔芬组的雌鼠较安慰剂组腰椎、股骨骨密度明显增高（均P〈0．05）；骨生物力学结果显示腰椎和股骨最大载荷（P〈0.05或P〈0．01），弹性模量（P〈0．05或P〈0．01），结构韧性（均P〈0．01）均增高，提示骨折风险性下降；破骨细胞染色示腰椎和股骨破骨细胞面积明显减少（均P〈0．01）；HE染色示骨小梁数目增加，连接性上升；骨形态计量学结果显示骨形成率降低（P〈0．05）。雷洛昔芬组的雄鼠与安慰剂组相比较无上述改变。结论选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬在OPG基因缺失的情况下仍可改善雌鼠骨质疏松，其作用不完全依赖于OPG基因。雷洛昔芬对OPG^-/-雄鼠无效。

p53基因敲除PLAG1转基因小鼠模型构建的研究

目的:建立p53基因敲除plag1转基因小鼠模型。方法:依托plag1转基因多形性腺瘤小鼠。取两只plag1+母鼠与一只p53+/-雄鼠杂交,分别取F1代中基因型为plag1+p53+/-的雌雄小鼠交配,得到基因型分别为plag1+p53-/-,plag1+p53+/-及plag1+p53+/+的三种多形性腺瘤小鼠,分别测量比较三种基因型多形性腺瘤的生长速度。结果:plag1+p53-/-基因型小鼠生长迟缓,寿命短,未能长出肿瘤便已死去。plag1+p53+/-肿瘤生长速度较同龄plag1+p53+/+小鼠相比较快,且有明显的差异(P<0.05)。结论:构建了p53基因敲除plag1转基因小鼠模型,且结果显示p53基因与PLAG1基因的相互作用和多形性腺瘤的生长速度增快有关。

染色体复杂易位46,XXt,(3;9)t,(8;13)一例报告

病例：患者女性,33岁,外表未见明显异常,智力正常,为某企业会计。身高165cm,体重81Kg,空腹血糖5.10 mmol/l,餐后2h血糖9.10mmol/l,空腹胰岛素7.32mmol/l,餐后2h胰岛素46.22pmol/l,糖耐量受损。患者结婚十年,怀孕三次,1997年、1998年分别于怀孕8周左右时因＂胎儿停止发育＂行人工流产术;2005年2月孕二个月时见红,行中药保胎治疗后复诊因＂未见胎心＂再次行流产术。

46，X，t（Y；9）（pll；q12）一例

患者男，30岁，结婚6年，性生活正常，未采取任何避孕措施，至今未孕。双乳房呈正常男性型，外生殖器未见明显异常。一般情况好，外观、表型正常，无面部或肢体的明显不对称，第二性征及外生殖器发育正常。辅助检查：（1）超声检查：右侧睾丸大小39m／n×22m／n×30m／n，体积14．2mL，左侧睾丸39．7m／n×29．3m／n×19．9m／n，体积12．1mL，双侧睾丸大小形态正常，左侧精索静脉轻度曲张。

血小板功能的研究进展

血小板通过其表面的多种受体和释放血小板颗粒发挥功能，参与多种生理病理过程。血小板通过表面受体与受损内皮黏附后，引发血小板进一步活化、聚集，参与止血与血栓形成；通过与白细胞、内皮细胞间的相互作用，参与炎症发生的过程；通过促进肿瘤血管生成、协助肿瘤细胞逃避机体免疫及促进肿瘤细胞对内皮的黏附和侵袭，参与肿瘤发生的进程；通过产生AB40、释放炎症介质、促进血液高凝状态等加重大脑淀粉样血管病（CAA）病变，从而参与阿尔茨海默病（AD）的发生。笔者拟就血小板功能的研究进展进行综述如下。

常染色体显性多囊肾病药物研究进展

多囊肾病（polycystic kidney disease,PKD）是一种遗传性肾囊肿性疾病,是继慢性肾小球肾炎、糖尿病肾病和良性肾小动脉硬化导致肾功能衰竭的第四大病因[1],常累及全身多个系统。PKD包括常染色体显性PKD（autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD）和常染色体隐性PKD（autosomal recessive polycystic kidney disease,ARPKD）。