用模拟经期内膜组织建立子宫内膜异位症小鼠模型及其生殖能力的研究

目的建立子宫内膜异位症(EM)模型小鼠,观察EM模型小鼠的生殖能力,探讨影响其生殖能力的可能原因。方法将51只8周龄雌性C57BL/6小鼠作为受体,并随机分为模型组(n=21)、假手术组(n=15)和空白组(n=15)。用模拟小鼠经期内膜组织腹腔注射的方法建立EM模型;将同等剂量的供体腹腔脂肪组织碎片注入假手术组小鼠的腹腔中;空白组不进行腹腔注射。观察3组小鼠的动情周期,于动情间期采血。将3组小鼠合笼至出现阴栓,统计各组小鼠的胚胎种植数、妊娠率、吸收胎率等。运用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测各组小鼠血清FSH、LH、糖类抗原125(CA125)浓度及腹腔液中白介素-2(IL-2)水平,比较各组间的水平差异。结果成功建立EM小鼠模型,模型组小鼠动情周期规律。模型组小鼠的妊娠率显著低于假手术组、空白组(P<0.05);3组小鼠的吸收胎率、畸胎率、胚胎重量、顶臀径等比较无显著性差异(P>0.05)。模型组不孕鼠的血清FSH浓度、腹腔液IL-2浓度显著高于妊娠实验前的模型组、假手术组和空白组(P<0.01);血清LH、CA125浓度在各组间无显著性差异(P>0.05)。结论用模拟经期内膜组织腹腔注射的方法可以成功建立EM模型,模型组不孕鼠的卵巢功能、腹腔免疫微环境受到了影响,可能是造成生殖能力下降的重要原因。

子宫内膜异位症患者卵泡液阻碍小鼠卵母细胞体外成熟及内异方药物血清的干预作用

目的探讨子宫内膜异位症(EM)患者卵泡液阻碍小鼠卵母细胞发育的机制及中药内异方药物血清对此的干预作用。方法临床获取EM不孕患者、输卵管因素导致不孕患者(对照组)卵泡液各10例样本,对小鼠行中药内异方灌胃获得药物血清,分别制备4组培养基:A组(空白对照)、B组(对照患者卵泡液)、C组(EM患者卵泡液)、D组(EM患者卵泡液+内异方药物血清)。将小鼠生发泡(GV)期卵母细胞分别放入各组培养基中进行体外成熟(IVM)培养。观察并统计各组卵母细胞的成熟情况,通过荧光染色对细胞内活性氧(ROS)的水平进行分析比较。结果C组卵母细胞的成熟率(42.5%)相较A组(81.7%)、B组(56.3%)、D组(51.0%)低(P<0.05)。C组卵母细胞平均荧光强度(0.056 8±0.025 1)高于A组(0.014 8±0.005 1,P<0.05)和B组(0.037 1±0.010 2,P<0.05);D组卵母细胞平均荧光强度(0.050 4±0.007 0)低于C组,但差异无统计学意义。结论 EM患者卵泡液能够阻碍小鼠卵母细胞成熟,其机制可能与EM卵泡液产生过多ROS而增强了卵母细胞内的氧化应激有关。内异方药物血清可改善EM患者卵泡液对小鼠卵母细胞发育的阻碍作用。