抑制S1PR2蛋白表达对卵巢上皮性癌SKOV3细胞增殖能力的影响

目的探讨抑制1-磷酸鞘氨醇受体2（S1PR2）对卵巢上皮性癌（卵巢癌）细胞增殖能力的影响及其作用机制。方法（1）设计针对S1PR2基因的小分子干扰RNA（siRNA，命名为si-S1PR2），以及与S1PR2基因无关的siRNA（作为阴性对照）；以卵巢癌细胞系SKOV3细胞作为研究对象，实验分为3组，分别为si-S1PR2转染组、阴性对照组和空白对照组，采用蛋白印迹（western blot）法检测3组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达。（2）体外实验：分组同前，采用活细胞计数（CCK-8）法检测转染后不同时间点（分别为24、48、72 h）3组SKOV3细胞增殖的抑制率；流式细胞仪检测转染后3组SKOV3细胞的细胞周期比例；western blot法检测转染后3组SKOV3细胞中磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2（p-ERK1/2）蛋白的表达水平。（3）体内实验：将SKOV3细胞接种于裸鼠腹腔，构建卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。实验分为两组，分别为S1PR2抑制剂组和对照组（每组8只裸鼠），两组裸鼠在腹腔接种SKOV3细胞后7 d开始腹腔给药，分别给予S1PR2抑制剂——JTE-013和磷酸盐缓冲液（PBS），每周2次共8次。28 d后处死并解剖两组裸鼠，观察腹腔移植瘤的生长情况。结果（1）western blot法检测显示，si-S1PR2转染组SKOV3细胞中S1PR2蛋白的表达水平为0.24±0.04，与阴性对照组（1.07±0.13）、空白对照组（1.10±0.14）分别比较，差异均有统计学意义（P均〈0.01）。（2）CCK-8法检测显示，转染24、48、72 h后，si-S1PR2转染组SKOV3细胞增殖的抑制率[分别为（26.6±3.3）%、（35.0±3.4）%、（34.0±2.8）%]明显高于阴性对照组[分别为（1.7±0.9）%、（2.5±0.5）%、（2.4±1.1）%；P均〈0.01]及空白对照组（均为0；P均〈0.01）。流式细胞仪检测显示，转染48 h后，si-S1PR2转染组细胞的G0/G1期比例为（70.9±2.8）%，明显高于空白对照组及阴性对照组[分别为（61.7±2.4）%、（62.1±3.3）%；P均〈0.01]。western blot法检测显示，转染48 h后，si-S1PR2转染组细胞中p-ERK1/2蛋白的表达水平为0.11±0.03，明显低于阴性对照组和空白对照组（分别为0.68±0.09、0.62±0.09；P均〈0.01）。（3）28 d后处死并解剖裸鼠，S1PR2抑制剂组、对照组裸鼠腹腔内的移植瘤数分别为（8.2±3.7）、（15.4±4.3）个，移植瘤质量分别为（0.21±0.07）、（0.45±0.12）g，两组分别比较，差异均有统计学意义（P均〈0.01）。结论在体内、外抑制S1PR2蛋白表达后均能降低卵巢癌SKOV3细胞的增殖能力，其机制之一可能是通过下调细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）通路的磷酸化水平，阻止卵巢癌细胞从G1期到S期的转化。

鞘氨醇激酶1的生物学功能及其与卵巢上皮性癌关系的研究进展

细胞内鞘脂代谢平衡对维持细胞稳态至关重要。鞘氨醇激酶（sphingosine kinase，SphK）1是一种鞘氨醇代谢酶，是鞘脂代谢平衡的限速酶。近年来的研究表明，SphK1是一种致癌酶，与细胞的增殖、转化和肿瘤细胞的存活、侵袭、迁移密切相关。本文就SphK1的生物学功能及其与卵巢上皮性癌（卵巢癌）关系的研究进展进行综述。