腺苷酸琥珀酸合成酶2对肝癌细胞迁移作用的研究

目的探讨腺苷酸琥珀酸合成酶2(adenylosuccinate synthetase isozyme 2,ADSS)在肝癌发生、发展中的作用。方法使用公共数据库及肝癌细胞对ADSS在肝癌中的表达及其对肝癌患者5年生存率的影响进行分析;在HepG 2及LM3细胞中沉默ADSS基因;使用细胞划痕实验及Transwell实验研究ADSS对肝癌细胞的迁移的影响;使用蛋白印迹法检测ADSS沉默细胞中上皮间质转化标志物的表达;检测LM3-Sh-ADSS2基因及代谢产物回补后上皮间质转化标志物及迁移能力改变。结果ADSS在肝癌中表达上调且与患者5年生存率呈负相关;ADSS促进肝癌细胞的迁移;ADSS参与了肝癌细胞的上皮间质转化过程。结论ADSS基因在肝癌中表达量增高并且可能通过参与上皮间质转化过程促进肝癌细胞的转移。

群海绵Agelas sp.的化学成分研究

目的研究海绵Agelas sp.的化学成分。方法运用乙醇提取、硅胶、Sephadex-LH20色谱柱、HPLC等多种方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果分离得到9个化合物,经结构鉴定分别为4,5-二溴吡咯-2-甲酰胺(1)、4,5-二溴吡咯-2-甲酸(2)、4,5-二溴吡咯-2-甲酸甲酯(3)、N-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰基)甘氨酸甲酯(4)、1-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰胺基)丙酸甲酯(5)、1-(4,5-二溴-2-吡咯甲酰胺基)丙酸乙酯(6)、异吲哚-1,3-二酮(7)、2(3 H)-苯并噻唑酮(8)和manzacidin C(9)。结论化合物4~9为首次从该属海绵中分离得到,其中化合物4~6为新天然产物。

超高效液相-四级杆-飞行时间质谱在复杂成分快速筛选和鉴定方面的应用

超高效液相-四级杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)联用技术因其高分辨率、全扫描范围灵敏度高、可提供碎片离子精确分子质量信息、质量范围宽等优势,已广泛应用于复杂成分的筛选和鉴定。综述近几年UPLC-QTOF/MS技术在中药复杂成分分析、药品保健品非法成分检测、食品农残检测及药物体内代谢、疾病代谢等体内、体外复杂基质方面的应用。

肝干细胞和精原干细胞在肝脏疾病治疗中的应用

供体肝脏和肝细胞的严重短缺是限制其治疗肝脏疾病的最大难题。肝外组织来源的干细胞可作为肝细胞的重要来源,为肝病的治疗带来新的希望。该文根据国内外研究动态,并结合自己的研究综述了肝干细胞、精原干细胞及其他干细胞在肝脏疾病治疗中的研究进展,并展望了其未来的研究方向。

苦木中3个二聚β-卡巴林生物碱及其生物活性研究

目的研究苦木科植物苦木Picrasma quassioides茎的化学成分。方法运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱以及反相HPLC等多种色谱分离手段进行分离纯化,根据理化性质和现代波谱学方法鉴定化合物的结构。通过MTT法和MIC法分别评价化合物的细胞毒和抗菌活性。结果从苦木茎95%乙醇提取物中分离得到了3个β-卡巴林生物碱成分,分别鉴定为picrasidine F（1）、picrasidine G（2）和picrasidine S（3）。化合物1对人宫颈癌He La细胞有显著的细胞毒活性,且选择性较强;化合物2和3对人宫颈癌He La细胞、胃癌MKN-28细胞和小鼠黑色素瘤B-16细胞具有显著的细胞毒活性。化合物1~3对2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和2株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌（MSSA）有显著的抑菌活性。结论首次对化合物1的核磁数据进行了全归属。3个化合物表现出显著的细胞毒活性和抗菌活性。

睾丸微环境对精子发生及其异常的调控作用

男性不育已经成为影响人类生殖健康的重大疾病。精子发生是精原干细胞自我更新和分化为精子的复杂过程。这个过程受睾丸微环境的精细调控。将讨论精子发生与睾丸微环境的关系,简要介绍睾丸微环境的国内外研究动态,展望睾丸微环境的研究热点和前沿。这将为阐释精子发生的机制提供新的调控机理,对治疗男性不育,预防子代出生缺陷,研发新型男性避孕方法等都具有重要意义。

1株蓝藻来源真菌Aspergillus sp.的次生代谢产物研究

目的对1株采自中国三亚蓝藻(Lyngbyamajuscula)来源的真菌Aspergillus sp.的次生代谢产物的分离纯化、结构鉴定及其生物活性评价进行研究。方法利用硅胶色谱、HPLC等色谱学分离方法对真菌As-pergillus sp.的次生代谢产物进行分离纯化,结合NMR、MS等波谱学方法对分离得到的化合物进行结构鉴定;并采用CCK8法,用人肺癌细胞株A549和人乳腺癌细胞株MCF7评价了这6个化合物的细胞毒活性。结果从真菌Aspergillus sp.的代谢产物中分离得到6个化合物:methyl asterric acid(1),methyl 3-chloroaste-rric acid(2),methyl 3,5-dichloroasterric acid(3),dihydrogeodin(4),benzomalvinB(5)和benzomalvinE(6)。结论化合物5和6为首次从Aspergillus属真菌中获得,化合物1～6在40μmol/L浓度下没有显著的细胞毒活性。

单细胞分析微环境与髓母细胞瘤预后的关系

目的:利用单细胞测序数据分析微环境与髓母细胞瘤预后的关系,探讨微环境细胞对髓母细胞瘤发生和发展的影响。方法:收集Patched^(+/-)转基因小鼠髓母细胞瘤肿瘤组织和正常小鼠的小脑组织进行单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq);从基因表达综合(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中下载M-Smo基因髓母细胞瘤小鼠模型的单细胞RNA数据。对所有单细胞RNA数据中的微环境细胞进行整合分析,并使用特异性标志基因识别细胞类型。采用χ^(2)检验比较正常小鼠和肿瘤小鼠,以及肿瘤小鼠维莫德吉(vismodegib)治疗组和对照组(vector)之间的微环境细胞数量差异。通过对微环境细胞群进行差异表达基因分析(differential gene expression analysis,DEG)获取细胞类型的相关基因集,对GEO数据库中髓母细胞瘤患者的RNA表达数据进行基因集变异分析(gene set variation analysis,GSVA),获取微环境细胞相关基因的GSVA得分,以GSVA得分表示微环境细胞相关基因的表达水平和微环境细胞的富集程度。基于微环境细胞相关基因得分,采用Kaplan-Meier法分析微环境细胞相关基因表达水平与髓母细胞瘤患者预后的关系,随后采用热图聚类分析探讨患者微环境细胞富集程度与临床特征的关系。最后采用多因素COX比例风险模型分析可能成为患者总生存期影响因素的微环境细胞类型,从而探讨微环境细胞对髓母细胞瘤发生和发展的影响。结果:髓母细胞瘤小鼠模型中共检测到6种微环境细胞类型:T细胞、成纤维细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞、星形胶质细胞和内皮细胞。其中,T细胞和内皮细胞只在髓母细胞瘤小鼠模型中出现。与正常小鼠相比,髓母细胞瘤小鼠模型中少突胶质细胞和小胶质细胞所占百分比更高(P均<0.001),而星型胶质细胞所占百分比更低(P<0.001);髓母细胞瘤小鼠模型的vismodegib治疗组与对照组相比,T细胞、成纤维细胞和小胶质细胞所占百分比更高(P均<0.001),而内皮细胞和少突胶质细胞所占百分比更低(P均<0.001)。生存分析结果显示,成纤维细胞和小胶质细胞相关基因的高表达与患者的总生存时间呈现明显的负相关性(P均<0.05),而少突胶质细胞相关基因的高表达与患者的总生存时间呈现明显的正相关性(P=0.003)。结合生存分析结果同时基于GSVA得分,分析患者临床特征后发现富集成纤维细胞和小胶质细胞组患者预后较好(P=0.004),而富集少突胶质细胞组患者预后较差(P=0.004);COX多因素风险回归模型分析结果显示,少突胶质细胞的富集和患者出现转移都是影响总生存时间的独立危险因素[风险比(hazard ratio,HR)值均>1,P均<0.05],而成纤维细胞的富集和患者不出现转移是影响总生存时间的保护因素(HR值均<1,P均<0.05)。结论:肿瘤微环境中小胶质细胞和成纤维细胞的存在可改善患者的预后,可能发挥抑制髓母细胞瘤发生和发展的作用,而少突胶质细胞的存在可使患者的预后较差,可能发挥促进髓母细胞瘤发生和发展的作用,提示靶向干预这3类微环境细胞对肿瘤细胞的调控机制可能对治疗髓母细胞瘤具有重要意义。