酶法测定糖化血清白蛋白的多中心临床研究

目的糖化血清白蛋白(GA)是反映近期血糖控制总体水平的血糖对应指标,采用酶法测定上海3所三级甲等医院糖尿病患者的GA水平,观察其在中国上海糖尿病患者群中的临床意义。方法分别在3所医院随机抽取142例2型糖尿病患者,测定空腹血糖(FPG)、餐后2h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA_1c)、GA等。第1个月内每2周强化治疗1次,以后每个月强化治疗1次,至3个月。结果所有患者强化治疗结束后的各项血糖指标较入组前明显改善(P＜0．01)。GA与FPG或2hPG的相关系数(r=0．598和O．585)均高于HbA_1c (0．574和0．555),均呈显著正相关(P＜0．01)。所有受试者中,GA与HbA_1c呈显著正相关(r=0．777,P＜0．01)；而在初诊患者中相关性更好(r=0．835,P＜0．01)。结论GA是一个可反映血糖近期变化的优良且检测方便的指标,采用酶法测定的GA与各项血糖指标及HbA_1c有较好的相关性,在初次诊断的糖尿病患者中更为显著。

环状定点诱变技术在单碱基定点诱变中的应用

目的采用环状定点诱变技术将重组真核表达质粒pcDNA3.1-hTSHR中hTSHR cDNA序列上发生突变的单碱基诱变回正常的序列。方法设计1对含预期突变的完全互补的诱变引物,以环状质粒为模板进行PCR扩增,得到带缺口的突变质粒,酶消化去除模板质粒,将PCR产物转化DH5α感受态细胞进行缺口修复和克隆。结果DNA测序表明,在预期位点已成功发生诱变,且目的基因其他部位的碱基序列均未发生随机突变。结论环状定点诱变技术是一种高效、简便、快捷的诱变方法,通过该方法成功实现了目的碱基的定点诱变,为后续研究奠定了基础。

用CHO—hTSHR细胞检测甲状腺刺激性抗体的研究

目的研究本课题组所构建的表达人重组TSH受体的中国仓鼠卵巢细胞（CHO—hT—SHR）在检测甲状腺刺激性抗体（TSAb）方面的临床应用价值。方法采用正常对照组及Graves病（GD）甲亢组血清的粗提IgG溶液来刺激CHO—hTSHR细胞，测定反应介质中的cAMP产量，计算TSAb活性。以正常对照组TSAb活性的孟＋2s作为正常上限值，根据该阳性判断标准来计算GD甲亢组TSAb的阳性检出率。结果GD甲亢组cAMP的产量及TSAb活性高于正常对照组[（353．65±126．34）pmol／LVS（237．21±77．15）pmol／L，（149．08±53．26）％ vs（100±32．52）％]，差异有统计学意义（P〈0．05）。采用该细胞测定的TSAb活性的正常上限值为165％，GD甲亢组TSAb的阳性检出率为50％（14／28）。结论本课题组所构建的CHO—hTSHR细胞株在检测GD甲亢患者血清中TSAb水平方面具有一定的临床应用价值。