大鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中巨噬细胞浸润及表型研究

目的研究大鼠全层皮肤缺损创面愈合过程巾臣噬细胞的浸润及表型变化。方法取30只继康S19大鼠，按随机数字表法分为损伤组24只、对照组6只。损伤组大鼠于脊柱两侧用自制环钻及手术剪制成2个直径为11mm的全层皮肤缺损创面，致伤后即刻测量创面面积，每日碘伏消毒；对照组大鼠仪行麻醉脱毛处理。伤后1、3、7、13d，分刖取损伤组6只大鼠测量创面面积（计算创面愈合率）后处死。沿创缘切取创面组织达健康筋膜层，HE染色观察组织学表现，免疫组织化学染色观察纰织巾巨噬细胞表面标志物CD68表达，免疫荧光染色分别观察组织中CD68与诱导型一氧化氮合酶（iNOS）双阳性（I型曩噬细胞）、CD68与精氨酸酶1（Arg-1）双阳性（1／型巨噬细胞）表达情况，双抗体夹心ELISA法检测创面组织巾叮十扰素、TNF-α、IL4、IL-13、IL-10和IL-12的水平并计算IL-10／IL-12比值。对照组大鼠在与损伤组相同部位切取直径为11mm的全层正常皮肤组织，同前行组够5学及细胞因子检测。对数据行单因素方差分析或LSD-t检验。结果损伤组大鼠伤后创面逐渐缩小，伤后各时棚点创面愈合率总体比较差异有统计学意义（F=358．55，P〈0．01）。对照组大鼠皮肤组织形念未见异常：损伤组大鼠伤后1、3d，创面组织中炎性细胞明显浸润；伤后7、13d，可见明显血管腔结构、新乍胶原。对照组大鼠正常组织和损伤组大鼠伤后l、3、7、13d创面组织每200倍视野下的CD68阳性细胞数分别为（2．7±1．5）、（31．8±3．5）、（40．8±4．7）、（20．8±2．8）、（3．2±2．4）个（F=180．55，P〈0．01）。损伤组大鼠伤后1、3、7dCD68阳性细胞数明显高于对照组（，值分圳为18．8l、18．79、14．05，P值均小于0．01）。对照组大鼠正常组织巾未见CD68与iNOS双阳性或者CD68与Arg-1双阳性细胞。损伤组大鼠伤后1、3、7、13dCD68与iNOS双阳性细胞百分比分别为（12．2±2．8）％、（16．5±2．9）％、（4．2±2．3）％、（O．7±0．8）％（F=72．50，P〈0．01），CD68与Arg-1双阳性细胞百分比分别为0、（8．2±1．9）％、（21．5±3．4）％、（4．7±2．0）％（F=120．93，P〈0．01）。损伤组大鼠伤后3dCD68与iNOS双阳性细胞百分比屦著高于组内其他时相点（t值分别为2．65、8．17、12．95，P值均小于0．05），伤后7dCD68与Arg-1双阳性细胞百分比显著高于组内其他时相点（t俩分别为15．27、8．25、10．38，P值均小于0．01）。CD68与iNOS双阳性细胞百分比于伤后1、3d显著高于CD68与Arg-1双阳性细胞百分比（t值分别为10．7l、5．88，P值均小于0．01），伤后7、13d则显著低于CD68与Arg-1双阳性细胞百分比（t值分别为10．24、4．60，P值均小于0．01）。对照组大鼠正常组织及损伤组大鼠伤后各时相点创面组织中1干扰素、TNF-α、IL-4、IL-13水平及IL-10／1L-12比值总体比较，差蚌均有统计学意义（，值为14．08～631．03，P值均小于0．01）。与对照组比较，损伤组大鼠伤后各时相点创面组织中1干扰素、TNF-α、IL-4和IL-13水平均显著增高（1值为4．58～9．17，P值均小于0．05），伤后1、3、7 d IL-10／IL-12比值明显增高（t值分别为27．70、30．51、9．49，P值均小于0．05）。损伤组大鼠伤后1d1干扰素水平[（61±5）pg／mL]及伤后3d IL-10／IL-12比值（1．647±0．098），显著高于对照组及损伤组其余时相点[1干扰素水平依次为（32±4）、（54±6）、（46±7）、（47±4）pg／mL，IL-10／IL-12比值依次为0．328±0，045、0．960±0．034、0．530±0．028、0．289±0．040，t值分别为3．19～8．20、16．59～31．84，P值均小于0．05]。结论大鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中臣噬细胞浸润明娃增加并呈现不同表型，其中I型巨噬细胞出现在炎症期，而增殖期以Ⅱ型眄噬细胞为主。

糖尿病皮肤组织“隐性损害”机制研究进展

糖尿病皮肤损伤由自发性或外源性创面引起，其中糖尿病足的皮肤损伤发生率较高，其难愈性以及带来的截趾（肢）风险，至今仍是临床面临的重大难题，需从糖尿病创面的发病机制来探寻较为有效的治疗方法。在病程较长的糖尿病皮肤创面中存在高糖和晚期糖基化终末产物（AGE）的蓄积，

利用同步辐射X线成像技术进行大鼠正常真皮及瘢痕真皮组织的三维结构研究

目的 观察比较大鼠正常真皮与瘢痕真皮组织形态学差异并探寻其结构性规律.方法 切取SD大鼠全层皮肤和创面愈合后3周的瘢痕组织,制备样本进行适当处理,结合同步光源辐射技术、显微CT及相位衬度成像技术进行断层成像,用三维软件进行图像重建. 结果 利用同步辐射光源产生的X射线,使显微CT成为可能；在处理过程中结合相位成像技术,能够清晰地呈现真皮组织结构.正常真皮组织以众多胶原纤维为主,相互盘绕形成橄榄状,并以此为基本单元,按某种形式错落组成.瘢痕真皮组织胶原纤维呈平行排列,部分纤维弯曲,排列混乱. 结论 正常大鼠真皮组织具有稳定的三维结构,其基本框架和组合规律与瘢痕真皮之间存在明显差异.

预防糖尿病足部溃疡专用袜研究

糖尿病足的发生与多种因素有关，目前的研究多集中于糖尿病足的发病机制及治疗方法，实际上糖尿病足最根本的治疗应该是预防。对于治愈的患者是预防复发，对高危人群是诊断并教育患者如何自查和预防足部损伤。有效预防可明显降低糖尿病足的发生率和截肢率，明显提高患者的生活质量。在各种糖尿病健康教育中，都会有关于如何选购袜子的建议，如提倡穿棉线袜，要柔软合脚，袜端不要过紧，

加强创面修复专科的内涵建设

创面疾病是指皮肤组织损伤或缺损的一大类疾病。据不完全统计，我国包括烧伤在内的各类创伤在现今人口死因构成中列第4位。随着社会经济的发展和人口老龄化的加速，疾病谱显著改变。最新的流行病学调查显示，我国住院患者中慢性创面的发生率显著升高，其中糖尿病创面、创伤后慢性创面、压迫性溃疡分列慢性创面的前3位。

对创面修复关键问题的思考

创面修复是一个既古老又现代的医学问题。说它古老，因为创面修复行为是机体的本能，甚至早于人类，大猩猩用舌头舔伤口就是一个佐证；说它现代，是因为人类对创面愈合的认识自20世纪80年代末到90年代初才从组织学和细胞功能学水平上升至对生长因子的认识，才逐渐认识到创面愈合过程是由一个复杂的网络在调控。

真皮内脂肪组织的研究进展

真皮内脂肪组织是毛囊相关研究不断深入的结果,二者在结构上密不可分,在功能上相互影响。真皮内脂肪对人类脂肪相关的疾病如创面愈合、肥胖、脂肪代谢障碍、脱发、硬皮病等的深入研究具有借鉴意义。本文就真皮内脂肪的研究进展以及生物特性作一综述。

迁延不愈创面患者的治疗

历经20多年的理论积累和10多年的临床探索，我国的创面修复专科建设正处于综合能力的提升阶段。近年来，我国创面修复专家团队通过多方合作，成功开展了对疑似与细菌武器有关、病程长达70余年下肢慢性创面患者的诊治。他们在实践经验基础上，总结了对于老年患者长期不愈合创面进行创面纤维板组织切除和以头皮作为供皮区的手术方案，同时探索了基于互联网技术的将慢性创面诊治工作推广至偏远地区的运行模式，具有较好的有效性和便利性。

创面信息管理系统：一种标准化的创面信息采集、存储和处理方案

目的利用新型创面信息管理系统，探讨客观、标准化和便利的创面信息管理方案。方法 选热择他面信息采集终端，确定创面信息采集内容，制作相关软件，建立创面信息数据库和创面信息管理系统。在临床应用 中评价其效能。结查 由第3代手机和操作软件共同构成标准化创面信息采集系统，借助终端手机可以从数据库中获取相关信息，包括创面的文字描述、图像及治疗方案等。使用4个月，共录入就诊信息232例次，已自动生成38例患者的完整资料。结论 该系统能够将创面信息采集标准化并输储存，适用于医院特别是基层卫生机构，为未来大样本的流行病学调查提供了良好的数据平台。

群体烧/创伤应急救治杭州预案（2016版）

1群体烧／创伤概念 群体烧／创伤是指一次烧／创伤中患者的数量达10例及以上，与成批烧伤相似但伤情更为严重，对社会的影响更大。我国群体烧／创伤的原因主要有：（1）工业事故，如瓦斯爆炸、火药燃爆、液氨燃爆、金属粉尘爆炸等。近年来影响较大的事故包括2013年6月3日吉林省德惠市某公司液氨爆炸，导致61人当场死亡；2014年8月2日江苏省昆山市某公司粉尘爆炸（以下简称昆山粉尘爆炸事故），导致75人当场死亡、185人受伤。（2）自然灾害，如山林起火、地震引发的火灾等。（3）城市居民火灾，包括民宅（例如2010年11月15日上海静安区高层住宅火灾事故）、剧院、商场火灾等。（4）恐怖袭击、群体性事件引起的火灾等。

严重低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕成纤维细胞功能的影响

目的模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素，探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb（HSF）功能的影响。方法常规培养人HSF，取第3～6代细胞按照随机数字表法分为10．0％氧气＋10．0％小牛血清（FCS）、5．0％氧气＋5．0％FCS、0．5％氧气＋0．5％FCS组，先用不含FCS的DMEM培养液培养24h后，再采用相应体积分数的氧气和FCS培养。采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性（结果以实际细胞数表示），天狼星红染色法检测细胞总胶原含量（结果以吸光度值表示），蛋白质印迹法检测低氧诱导因子1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）、TGF—β1、B淋巴细胞瘤2（Bcl-2）、P53的蛋白表达（结果以灰度值比值表示），原位末端标记法检测细胞凋亡率。以上实验每组样本数均为3。对数据行Kruskal，Wallis检验、Dunnett检验。结果（1）与10．0％氧气＋10．0％FCS组的（11000±1306）个比较，5．0％氧气＋5．0％FCS组细胞增殖活性较高[（13290±1500）个，P〈0．05]，0．5％氧气＋0．5％FCS组细胞增殖活性较低[（6999±765）个，P〈0．05]。（2）与10．0％氧气＋10．0％FCS组（0．0396±0．0042）比较，5．0％氧气＋5．0％FCS组细胞总胶原含量较高（0．0516±0．0051，P〈0．05），0．5％氧气＋0．5％FCS组细胞总胶原含量较低（0．0156±0．0024．P〈0．05）。（3）与10．0％氧气＋10．0％FCS组比较，5．0％氧气＋5．0％FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF—β1、Bcl-2蛋白表达量增高（P值均小于0．05），P53的蛋白表达量差异不明显（P〉0．05）；0．5％氧气＋0．5％FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF—β1、Bel-2蛋白表达量下降（P值均小于0．05），P53蛋白表达量增高（P〈0．05）。（4）与10．0％氧气＋10．0％FCS组[（1．2±0．9）％]比较，5．0％氧气＋5，0％FCS组细胞凋亡率无明显差异[（2．6±0．9）％，P〉0．05]，0．5％氧气＋0．5％FCS组细胞凋产率明显升高[（13．3±4．1）％，P〈0．05]。结论重度低氧低血清蛋白可抑制人HSF的增殖活性、总胶原生成，并诱导细胞凋亡。

猪皮肤脂肪穹隆结构破坏后纤维化情况

目的观察破坏猪皮肤脂肪穹隆结构后其皮肤纤维化的情况。方法取4只雌性杜洛克猪，由具有丰富临床取皮经验的医师用辊轴取皮刀在每只猪背部脊椎两侧共切取4块5cm×5cm大小仅一边带蒂的中厚皮片，设为真皮浅层组；同法继续在创面内切取5cm×5cm大小、厚度约1．5mm的带蒂组织片，设为脂肪穹隆组。切取完成即刻，将2组皮片原位回植。术后7、14、21d，分别按随机数字表法取5个创面，观察术区大体情况。于前述时相点观察大体情况后取相应术区中央深至深筋膜组织，部分行HE染色，观察2组皮片切割处胶原纤维分布并测量纤维化宽度；部分行天狼星红染色，观察2组皮片切割处Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维分布。对数据行两独立样本t检验。结果术后7d创缘有少量结痂，术后14d创面均愈合，术后21d术区可见少量毛发生长。HE染色显示，术后各时相点术区真皮浅层及真皮与脂肪穹隆交界处可见明显切割痕迹，真皮浅层组和脂肪穹隆组皮片切割处均有大量胶原纤维增生且均平行规整排列。术后7、14、21d，真皮浅层组皮片切割处纤维化宽度分别为（251±31）、（240±37）、（342±69）μm，与脂肪穹隆组的（239±36）、（286±61）、（332±28）μm接近（t值分别为0．750、-1．971、0．375，P值均大于0．05）。天狼星红染色显示，术后各时相点真皮浅层组和脂肪穹隆组皮片切割处均可见大量Ⅲ型胶原纤维与少量Ⅰ型胶原纤维平行排列。