成人间活体肝移植供体行改良扩大右半肝切除的安全性

目的:探讨成人间活体肝移植(A-ALDLT)供体接受带肝中静脉(MHV)的改良扩大右半肝切除术的安全性。方法:2006年6月至2008年1月,23例成人间活体肝移植的供体作了右半肝切除,其中15例为不含MHV的右半肝移植物(第1组,n=15),8例为含MHV的右半肝移植物(第2组,n=8)。选择供体作含MHV的改良扩大右半肝切除术,需满足以下条件:供体残留肝脏>35%,且脂肪肝<10%;移植物不足受体标准肝体积(SLV)的60%;供体MHV右侧有2支以上粗大的V5、V8分支需保留。结果:两组供体在年龄、脂肪肝比例和肝脏残留比例等方面都没有显著差异,手术时间和出血量也没有明显差别。第1组供体的体重和全肝体积要大于第2组,这可能是因为随着我们手术经验的增加,在供体体重小于受体或供肝相对不够大时,会更倾向于使用含MHV的移植物有关。这使得第2组的移植物重量(GW)与第1组的差不多大小,且两组间的GW/SLV、GWRW也无显著差异。而两组供体的术后恢复情况均令人满意,两组残肝的增生比例并没有很大差异。由于第2组术前肝脏体积较小,因此与原肝脏大小比较时,第2组残肝恢复的比例要明显大于第1组。结论:供体行含MHV的改良扩大右半肝切除术,较容易得到更大的移植物,而第4段的少量淤血,可能会增加残肝的增生速度。对于无明显脂肪肝且残留肝脏超过35%的健康供体,切取含MHV的右半肝移植物仍然是安全的。

受体细胞因子TGF-β1和TNF-α的基因多态性与肝移植急性生物学排斥的关系

目的:研究受体肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的基因调节区或启动子区基因多态性分布与肝移植急性生物学排斥的关系。方法:取63例肝移植病人和60例正常人外周静脉血2mL,加入400μL5%EDTA抗凝,用QIAamp DNA Blood Midi Kit抽提DNA。应用美国One-Lambda公司提供的细胞因子基因型检测盒,采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)法,行细胞因子基因调节区或启动子区多态性分析。结果:病人年龄、性别、Child分级、手术方式、肝脏原发疾病、血型不配对与急性生物学排斥无明显关系。TNF-α高表达型与低表达型的比例在排斥组中明显高于非排斥组(10/15vs5/33,P=0.016),排斥组中受体TNF-α高表达/受体TGF-β1高表达组合对其他表达形式的比例(9/16)显著高于非排斥组(4/34),P=0.015。结论:受体TNF-α高表达/受体TGF-β1高表达可能是急性生物学排斥反应的危险因素。

老年供体肝移植的临床经验

目的:供肝来源的短缺日益成为肝移植的突出问题,本文旨意在探讨老年供体肝移植的疗效。方法:收集2004年3月至9月德国汉诺威医学院施行的69例肝移植的临床资料。供体年龄>60岁的肝移植有11例,占同期肝移植总数的15.9%,其中包括急诊肝移植2例,再移植1例,供体的平均年龄为66.7岁,年龄最大者为75岁。而供体年龄≤60岁的肝移植共58例,供体平均年龄为36.3岁,年龄最小者为10岁。结果:老年供体组病人肝移植的总体效果令人满意,两组病人的1年生存率分别为81.8%(9/11)和87.9%(51/58),移植肝1年存活率为72.7%(8/11)和82.7%(48/58),两组间无显著差异。结论:在审慎的选择下,老年供体的肝脏是能够安全运用的,供体年龄并非是影响肝移植预后的因素。

成人间活体肝移植肝中静脉的取与舍

1993年．日本的Makuuchi等成功完成了世界上第一例成人间活体肝移植（A-ALDLT）；1996年香港的Fan等成功完成了世界上第一例成人间使用扩大右半肝的活体肝移植。活体肝移植有诸多优点：活体供肝来源相对较多，可尽早手术从而潜在地挽救了生命；尽管体积可能偏小，但移植物的质量事先就可得以保证；有着与尸肝移植同样令人满意的长期生存率。但也要看到活体肝移植需牺牲另一正常人的健康．甚至可能存在生命危险，全世界有报道的供体死亡率在0．5‰～1．0‰.

结肠直肠癌肝转移外科治疗进展

结肠直肠癌是常见恶性肿瘤，年发病率在欧美地区占消化道肿瘤首位及全部恶性肿瘤第3位．在我国占消化道肿瘤第2位及全部恶性肿瘤第4位。流行病学统计表明．其发病率还在上升。结肠直肠癌如能早发现、早诊断及早手术，则预后较好，然而约40％～75％的病人确诊时已有结肠直肠外转移，其中肝转移占15％～35％，接受根治性结肠直肠癌切除术的病人最终有25％～50％出现肝转移。

肝移植治疗终末期肝病合并门静脉高压症预后影响因素分析

目的:肝脏移植手术已成为终末期肝病门静脉高压症的主要治疗手段,本文旨在研究分析肝脏移植手术治疗终末期肝病合并门静脉高压症病人的预后影响因素。方法:回顾性统计65例接受肝脏移植治疗的终末期肝病合并门静脉高压症病人的临床资料,包括年龄、原发疾病、术前门静脉高压症手术史、门静脉高压曲张静脉破裂出血、Child-Pugh分级、供体脂肪变性,及术后急性排异、重要脏器严重出血、感染、移植肝胆道血管并发症、原发疾病复发等。通过Logistic回归模型筛选出可能影响预后的危险因素。结果:供体脂肪变性(P=0.001)和重要脏器严重出血(P=0.009)是导致门静脉高压症病人肝脏移植术后死亡的主要危险因素。结论:在非紧急情况下避免使用边缘型供体,并积极防治术后严重出血,将能降低接受肝脏移植手术治疗的门静脉高压症病人的死亡率。

胰腺实性假乳头肿瘤组织起源分析

目的:总结胰腺实性假乳头肿瘤(solid-pseudopapillary tumor,SPT)的组织病理学特点,并分析该肿瘤组织细胞的起源。方法:回顾性分析我院43例SPT的组织病理学特点,其中30例标本经与代表不同组织来源的抗体进行免疫组化反应,由SPSS11.5软件进行数据分析。结果:SPT肿瘤的组织病理特点为假乳头结构形成和区域性坏死,无腺泡结构。SPT细胞对神经内分泌细胞来源的神经元特异性烯醇化酶蛋白(NSE)、CD56和CD10的阳性高表达率甚高,均超过90%,但对SYN的高表达率仅为16.7%;SPT细胞对神经干细胞来源的神经巢蛋白(NES)和波形蛋白(VIM)的阳性高表达率分别为70%和90%;对神经软组织来源的S-100蛋白的高表达率为86.7%;对间叶组织细胞来源的α1抗糜蛋白酶(α1-AT)、α1抗胰蛋白酶(α1-ACT)和溶菌酶(LYS)的高表达率达80.0%～86.7%;而SPT细胞对上皮细胞来源的抗体标记物很少呈阳性反应,多为低表达。结论:SPT可能起源于胰腺干细胞及与其发育密切相关的胚胎神经嵴的神经前体细胞,在干细胞发育过程中发生分化不成熟所致。

胰腺双部位实性假乳头肿瘤1例

目的:总结1例胰腺双部位实性假乳头肿瘤(SPT)的临床病理特点,探讨其可能起源.方法:手术行标准胰十二指肠切除术和胰体尾及脾切除术,分析该病例SPT的临床病理特点,并行多个抗体的免疫组织化学检查.结果:患者术后血糖5.5-8.9mmol/L,第5天开始恢复饮食,未发生胰漏、胆漏及腹腔感染等并发症.大体形态的囊实性比例不尽相同,但镜下肿瘤细胞形态学一致,均确诊为SPT,对各个免疫表型的表达具有异质性,其中VIM、S100、AAT、CyclinD1、PR及Nestin均呈阳性.结论:SPT可能起源于胰腺干细胞及与其发育密切相关的胚胎神经嵴的神经前体细胞,由干细胞发育过程中分化不成熟所致.

胰腺实性假乳头肿瘤伴肝转移一例报告

胰腺实性假乳头状瘤（solid pseudopapillary tumor,SPT）是少见的胰腺肿瘤,多见于年轻女性,发生肝转移的报道并不多。日前,瑞金医院第三批援滇医疗队在援助云南省怒江州人民医院时接诊了1例胰腺SPT伴肝转移病人,现报告如下。

RNA干扰抑制大鼠T淋巴细胞CD28基因表达的实验研究

目的:探讨RNA干扰(RNAi)后对大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28基因的表达及其对细胞功能的影响。方法:设计针对目标基因的小干扰RNA(siRNA),转染大鼠T淋巴细胞。以FCAS检测CD28水平,MTT检测转染后T淋巴细胞对异体淋巴细胞增殖能力的影响,Realtime-PCR及ELISA法检测细胞因子水平。结果:siRNA转染大鼠T淋巴细胞后可抑制CD28的表达,T细胞增殖能力、IL-2、IFN-γ水平明显低于空白对照组(P<0.05)。结论:siRNA可特异性抑制大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28的表达,降低大鼠T细胞的增殖能力,抑制IL-2、IFN-γ细胞因子的基因水平表达和分泌水平,从而产生免疫耐受效应,为器官移植免疫研究提供实验依据。

小体积肝移植和辅助性原位小体积肝移植治疗猪急性肝功能衰竭的近期疗效观察

目的观察小体积肝移植和辅助性原位小体积肝移植治疗猪急性肝功能衰竭的近期疗效。方法急性肝功能衰竭猪随机分为3组接受肝移植治疗:A组行全肝移植(n=5);B组行小体积肝移植(n=5);C组行辅助性原位小体积肝移植(n=5)。各组动物开腹后即刻、切脾后即刻和再灌注后30 min分别监测门静脉压力,并观察术后生化指标变化、病理改变和1周生存率。结果A、B和C三组的移植肝重量与受体体重之比分别为(2．44±0．30)％、(0．76±0．02)％和(0．75±0．03)％。再灌注后30 min,B组移植肝门静脉压力显著高于其它两组(A:B:C=13．3:17．5:12．2 cmH2O, P<0．01),C组原肝门静脉压力显著高于移植肝门静脉压力(14．3:12．2 cmH2O,P<0．05)。A组和C组术后第2天起血清天冬氨酸转氨酶、总胆红素、凝血酶原时间、乳酸和血氨水平明显下降,术后第7天基本恢复至正常水平。B组术后上述生化指标一直维持在较高的水平,术后第2～4天明显高于其它两组(P<0．01)。A组、B组和C组1周生存率分别为100％、20％和80％,B组明显低于其它两组(P<0．05)。结论辅助性原位小体积肝移植治疗急性肝功能衰竭近期疗效优于小体积肝移植,术中不必干预原肝门静脉。

大鼠原位小肠移植手术技巧及常见并发症

目的探讨大鼠原位小肠移植术的手术技巧及常见并发症的处理和预防。方法用改进的三袖套法对120只大鼠进行原位小肠移植术，总结手术技巧，分析常见并发症的发生原因及相应的处理和预防措施。结果术后有99只大鼠（82．5％）生存超过1周。死亡21只。受体术中出血平均少于1ml。导致大鼠死亡的原因为术中吻合121大出血（5只，4．2％）、门静脉血栓形成（2只，1．7％）、门静脉大量空气栓塞（1只，0．8％）、动脉血栓形成（4只，3．3％）、吸人性肺炎（2只，1．7％）、感染（4只，3．3％）、麻醉意外（2只，1．7％）和肠扭转（1只，0．8％）。结论娴熟细致的外科操作、熟悉各种并发症的原因并采取相应的措施可有效提高手术成功率。

成人间活体肝移植供体肝中叶静脉回流类型与移植物的选择

目的分析供体肝中叶静脉回流类型,探讨其对移植物选择的指导意义。方法回顾性分析2005年4月至2009年3月期间,在瑞金医院器官移植中心参加活体肝移植供体筛选的109例潜在供体的CT检查资料,根据Marcos分型和Nakamura分型分别分析供体肝中静脉回流类型和Ⅳb段静脉回流类型。结果本组供体的肝中静脉按其两侧分支的不同可分为3型,其中Ⅰ、Ⅱ型相对较多,分别占44.0%(48/109)、37.6%(41/109),Ⅲ型最少,占18.3%(20/109)。各型供体的全肝体积、左半肝体积、左半肝体积占全肝比例等的差异均无统计学意义(P>0.05)。Ⅳb段静脉则以Ⅰ型最多,占72.5%(79/109),Ⅱ、Ⅲ型较少,分别占12.8%(14/109)及14.7%(16/109)。最终有37例供体捐出右半肝,其中MarcosⅠ、Ⅱ及Ⅲ型供体保留肝中静脉者分别占12/17、8/11及5/9,NakamuraⅠ、Ⅱ及Ⅲ型供体保留肝中静脉者则分别占16/26、4/6及5/5。结论成人间活体肝移植切取右半肝移植物时,Marcos分型和Nakamura分型结果对肝中静脉的取舍可能有重要意义。

RNA干扰树突细胞主要组织相容性复合物1表达后诱导抑制性T细胞对小肠移植耐受的影响

目的探讨RNA干扰树突细胞（Dc）组织相容性复合物1（MHC-1）表达后获得的CD8＋CD28-抑制性T细胞（Ts）对小肠移植免疫耐受的的影响。方法通过siRNA干扰DC MHC—I表达后，诱导获得CD8^＋CD28^-Ts。建立由Wistar大鼠移植到SD大鼠的小肠移植模型36例，随机分为A组（转染实验组）、B组（未转染组，注射普通T细胞）和C组（移植对照组，注射生理盐水）。术后14d，每组各随机挑选6例，取移植大鼠小肠和血液标本行移植小肠组织病理学检查．并检测移植大鼠血清TGF-β、IFN-γ水平及回肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性，观察移植大鼠的存活时间。结果术后第14天，A组移植大鼠血清中TGF—β和IFN-γ表达水平高于B、C组（P〈0．05）。A组大鼠肠黏膜Na^＋-K^＋-ATP酶活性为（6．3±1．0）kU／g，明显高于B组的（3．6±0．9）kU／g和C组的（2．9±1．3）kU／g（P〈0．05）。A组移植小肠病理Parks评分分级明显低于B组和C组（P〈0．05）。A、B和C组移植后大鼠中位生存时间分别为32．0、17．5和21．0d，A组存活时间明显优于B组和C组（P〈0．05）。结论将RNA干扰DCMHC—I表达所获得的CD8^＋CD28^-Ts过继小肠移植大鼠．可以减轻移植大鼠的损伤程度．抑制免疫排斥反应．

肝移植术后细菌感染的非培养快速诊断方法

目的通过对拟诊感染的患者外周血标本行细菌PCR检测和内毒素鲎试验，确立细菌感染的诊断，并分类检出革兰阴、阳性菌，从而指导临床用药。方法以2005年10月至2007年10月在我院移植中心接受肝脏移植的50例患者为研究对象，分别抽取术前或手术当日（DO）、术后第1天（D1）、I）7、D144个时段的外周血标本。样本处理后，行细菌PCR检测、细菌内毒素鲎试验。结果细菌PCR检测的敏感度为66．7％，特异度为95．0％，诊断符合度为78．0％；内毒素鲎试验敏感度为84．2％，特异度为83．9％，诊断符合度为84．0％。两试验平均总耗时为3h。结论PCR试验阳性，内毒素鲎试验阴性，提示阳性菌感染；PCR试验阳性，内毒素鲎试验阳性，提示阴性菌感染或混和感染；PCR试验阴性，提示无严重感染。两试验诊断速度明显快于传统的培养方法，可以作为早期诊断的指标。

利用RNA干扰诱导产生的CD8^＋CD28^-抑制性T淋巴细胞的免疫学特性

目的探讨通过RNA干扰技术诱导产生的CD8^＋CD28^-抑制性T淋巴细胞（Ts细胞）的免疫学特性。方法取SD大鼠骨髓，培养分离树突状细胞（DC），设计、合成主要组织相容性复合物（MHC）I类小片段干扰RNA（siRNA），以MHCIsiRNA转染DC。先以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液刺激转染MHCIsiRNA的IX2，然后将DC与从SD大鼠脾脏分离得到的CD8^＋T淋巴细胞共同培养，通过磁珠法分离出Ts细胞。分别在由SD大鼠脾脏淋巴细胞（反应细胞）和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞（刺激细胞）组成的混合淋巴细胞培养体系中加入数量不等的Ts细胞，检测反应细胞增殖情况；分别以Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞和卵白蛋白（OVA）刺激SD大鼠脾脏淋巴细胞，然后再按不同比例加入Ts细胞，检测各组脾脏淋巴细胞的增殖情况；在由SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入可溶性重组白细胞介素2（rrIL-2），观察IL-2对Ts细胞功能的影响；采用实时定量聚合酶链反应（PCR）测定Ts细胞中转化生长因子／3（TGF-β）和7干扰素（IFN-γ）mRNA的表达，流式细胞仪和实时PCR检测Ts细胞上CD25分子的表达。结果Ts细胞对SD大鼠脾脏淋巴细胞和Wistar大鼠肠系膜淋巴组织细胞之间的混合淋巴细胞反应（MLR）具有抑制作用，但对于SD大鼠脾脏淋巴细胞和OVA之间的MLR则无抑制作用。在SD大鼠脾脏淋巴细胞、Wistar大鼠肠系膜淋巴组织液和Ts细胞组成的混合淋巴细胞培养体系中加入rrIL-2后，SD大鼠脾脏细胞的增殖并无明显增加（P〉0．05）。与CD8^＋ CD28^＋T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞比较，Ts细胞的TGF-β和IFN-γmRNA的表达量明显升高（P〈0．01，P〈0．05），而CD25的表达量明显降低（P〈0．05）。结论采用经MHCIsiRNA干扰的DC能够诱导CD8^＋T淋巴细胞产生CD8^＋CD28^-Ts细胞；Ts细胞在体外具有免疫抑制特性，其免疫抑制作用不被外源性IL-2所逆转，且其免疫调节作用具有抗原特异性。

胰腺实性假乳头状肿瘤的组织病理特征分析

目的分析总结胰腺实性假乳头状肿瘤（SPT）的组织病理特点。方法回顾性分析51例SPT患者的临床资料，通过免疫组化法检测其中39例SPT组织蜡块中神经特异性烯醇化酶（HSE）、突触素（SYN）、神经细胞黏附分子1（CD56）、神经内肽酶（CD10）、巢蛋白（Nestin）、波形蛋白（Vim）、S100收集组织蛋白（S100）、α1抗糜蛋白酶（α1-ACT）、α1抗胰蛋白酶（α1-AT）、上皮膜抗原（EMA）、抗广谱细胞角蛋白单抗（AE1／AE3）、角蛋白多肽（CK19）的表达。结果SPT组织病理特征为假乳头结构形成和区域性坏死，无腺泡结构。39例SPT中，NSE表达率达97．4％，CD56和CD10的表达率均为84．6％，Nestin和Vim表达率分别为64．0％和87．0％，S100的表达率为79．5％，α-ACT和α1-AT的表达率分别为82．1％和79．5％，而SYN的表达率仅12．8％，EMA、AE1／AE3和CK19等表达很少，呈弱阳性反应。结论SPT典型病理特征是由于肿瘤组织不同区域相对缺血、缺氧所造成的退行性变的结果，SPT表达多种组织来源的抗原，反映其可能来源于胰腺干细胞及与其发育密切相关的胚胎神经嵴的神经前体细胞，且在发育过程中发生分化不成熟的结果。

RNAi对大鼠T淋巴细胞CD28和OX40基因表达的联合抑制作用

目的通过RNAi技术干扰T细胞CD28、CD134基因表达后，诱导获得抑制性T细胞（Ts）；探讨Ts免疫学特性。方法设计针对目标基因的siRNA，转染大鼠T淋巴细胞，FCM检测CD28、CD134水平，混合淋巴细胞反应（MLR）检测转染后的T淋巴细胞对异体淋巴细胞的增殖能力的影响，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）及酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞因子水平。结果siRNA转染大鼠T淋巴细胞后，抑制CD28、CD134分子的表达，siRNA转染24h后，siRNA组CD28、CD134表达受到抑制[转染后及转染前表达分别为（22．35±4．37）％及（34．76±3．51）％（P〈0．05）]，T淋巴细胞分泌细胞因子IL-10水平增高，转染组及未转染组表达分别为（77．15±12．60）ng／L及（37．56±5．93）ng／L（P〈0．01）。而转染组及未转染组的IL-2表达分别为（2．79±0．51）及（4．35±1．11）ng／L（P〈0．05）；干扰素（IFN）-γ表达分别为（277．15±14．8）、（682．7±53．5）ng／L（P〈0．05）。结论siRNA可以特异性抑制大鼠T淋巴细胞共刺激分子CD28、CD134基因表达，抑制了IL-2、IFN-γ的表达，提高了IL-10细胞因子表达水平，从而产生了免疫耐受效应。Ts细胞具有抗原特异性，而且在外源性rrIL-2存在时，不能逆转Ts细胞的功能。

腹膜后巨大复杂肿瘤诊治的讨论

1临床资料 患者男，19岁。因右腰背部酸胀2个月，上腹饱胀不适2周于2007年6月到我院就诊，体格检查无异常。术前肿瘤标志物检查指标正常，儿茶酚胺、皮质醇等内分泌指标检测均正常。双肾肾小球滤过率检查：左肾正常（有代偿），右肾中重度下降。B超检查：腹膜后巨大实质性肿块，肿块段下腔静脉显示不清，肿块下方可能有下腔静脉栓子形成。