实时反馈系统在外科住院医师手术参与量中的作用

目的探讨一款实时反馈医院外科基地住院医师完成手术操作情况的软件系统在外科住院医师手术参与中的作用。方法2021年8月—2023年7月,选取上海交通大学医学院附属第一人民医院2022级外科基地住院医师26名作为试验组,在住院医师规范化培训(以下简称住培)的第1年里使用该实时反馈系统,2021级外科住院医师20名作为对照组,住培的第1年里仍使用自行填报的方式报告完成手术的情况。最终均通过医院手术室管理系统,调取2021级和2022级外科基地住院医师住培第1年的手术情况进行比较分析。同时比较试验组与对照组年度综合考操作考试的成绩。并发放问卷,调查试验组住院医师和带教老师使用该系统后的反馈。结果试验组住院医师平均总手术量为(222.91±79.12)台,作为一助平均手术量为(32.58±17.30)台,作为二助平均手术量为(190.32±79.83)台。对照组住院医师平均总手术量为(134.90±68.20)台,作为一助平均手术量为(32.45±14.79)台,作为二助平均手术量为(102.41±148.94)台。试验组住院医师的总手术量和作为二助参与的手术量均多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。在三级学科手术参与量的比较中,试验组住院医师普外科和泌尿外科手术参与量多于对照组,试验组的年度操作考成绩高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。调查问卷的结果同样反映出该实时反馈系统在住院医师和带教老师方面均获得了肯定的意见。结论手术实时反馈软件的使用有助于提高外科住院医师手术参与,提升住院医师规范化培训的效果。

三镜联合在胆囊结石合并胆总管结石治疗中的应用

目的探讨腹腔镜、十二指肠镜、胆道镜在胆囊结石合并胆总管结石治疗中的作用及最优选择。方法对2003年8月至2006年11月间我院收治的52例胆囊结石合并胆总管结石患者进行腹腔镜、十二指肠镜、胆道镜联合治疗,分析微创手术的疗效及安全性。结果2005年12月以前患者23例,均行腹腔镜胆囊切除+胆总管切开胆道镜取石,均放置T管引流。1例术后1 d T管脱出行腹腔镜T管放置术,另有1例术后3个月拔除T管时出现胆漏而行腹腔引流术。2006年1月以后患者29例,根据术前检查发现胆总管结石大小决定是否术前行十二指肠镜治疗。其中6例胆总管结石≥12 mm者直接行腹腔镜胆囊切除+胆总管切开胆道镜检查取石,2例放置T管引流;23例行术前乳头括约肌切开(endoscopic sphincterotomy,EST),成功取石16例(69.6%),随后行腹腔镜胆囊切除;7例取石失败后行腹腔镜胆囊切除+胆总管切开胆道镜取石,1例放置T管引流;未放置T管引流者共10例均行胆总管一期缝合。术后未出现胆漏、胆管狭窄以及胆总管残余结石等并发症。结论①腹腔镜、十二指肠镜、胆道镜联合是治疗胆囊结石合并胆总管结石的趋势,具有创伤小、恢复快及并发症少的优点。②腹腔镜手术前是否行十二指肠镜取石应按胆总管结石大小来确定,对于胆总管结石超过12 mm或十二指肠镜取石失败的病例选择腹腔镜联合胆道镜治疗。③腹腔镜下胆总管切开一期缝合是安全的,并可避免T管相关并发症。

DNMT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨DNA甲基转移酶1（DNMTl）对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响及可能机制。方法采用实时定量PCR技术检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中DNMTl的mRNA水平。利用慢病毒包装建立稳定表达DNMTl-shRNA的MKN45、SGC7901、MKN28细胞系，同时设未处理的未转染组、加入慢病毒阴性对照的阴性对照组。CCK8法检测各组细胞的增殖情况，Westernblotting检测CDC25B的表达水平，Transwell实验检测DNMTl对胃癌细胞迁移能力的影响。结果52例（86．7％，52／60）患者的胃癌组织中DNMTl的mRNA水平较癌旁组织上调，其中17例（28．3％，17／60）上调2倍以上；有淋巴结转移、有癌旁血管浸润及TNM分期Ⅲ～Ⅳ期者其转录水平明显上调（P〈0．05）。转染DNMTl-shRNA后3d，MKN45、SGC7901以及MKN28细胞生长明显受抑，转染组的3株细胞吸光度值均明显低于未转染组及阴性对照组（P=0．000）。转染组CDC25B蛋白表达降低，迁移力下降（均P〈0．05）。结论DNMTl在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织，其具有促进胃癌细胞增殖和远处转移的作用，DNMTl可能通过调控CDC25B来发挥致癌作用。

血管内皮细胞生长因子受体在甲状腺髓样癌中的高表达

目的:评估血管内皮细胞生长因子受体1(VEGFR-1)和VEGFR-2在甲状腺髓样癌(medullary thyroidcarcinoma,MTC)组织的表达,探讨其与MTC病人临床数据间的关系。方法:用免疫组化技术评估24例MTC病人的石蜡包埋组织VEGFR-1和VEGFR-2的表达,回顾收集病人的临床数据。结果:24例病人平均年龄(44.9±14.1)岁,8例(33.3%)为遗传性,其中6例为多发性内分泌肿瘤(multiple endocrine neoplasia,MEN)-2A,2例为MEN-2B。VEG-FR-1免疫组化染色阳性率为91.7%(22/24),VEGFR-2为87.5%(21/24)。年龄与VEGFR-2染色强度为正相关(r=0.609,P=0.002)。VEGFR-2与肿瘤分期(肿瘤淋巴结转移)、肿瘤大小、病人血清CEA及降钙素在手术前后的相对降幅间没有关联。然而,VEGFR-1与肿瘤分期呈负相关(r=-0.660,P=0.0005),而与MTC病人血清CEA及降钙素在手术前后的相对降幅之间均呈正相关(CEA:r=0.869,降钙素:r=0.849,P<0.0001)。我们也观察到VEGFR-1信号强度与疾病治愈间为正相关(r=0.523,P=0.009)。经(5.0±2.8)年的随访,VEGFR-2与疾病结局无相关(P=0.407)。遗传性与散发性MTC病人间VEGFR-1与VEGFR-2染色强度无统计学差异(P>0.05)。结论:VEGFR-1和VEGFR-2在MTC病人中高表达,且可能参与肿瘤的进展。

肝移植治疗肝内胆管癌的现状与挑战

肝内胆管癌(ICC)是原发性肝癌中仅次于肝细胞癌的又一原因,近年来其发病率在全球范围内呈明显上升趋势。因发病隐匿、侵袭性强,预后极差。目前,对于严重肝功能障碍而不适合切除的极早期ICC(≤2 cm)患者,以及对新辅助化疗有应答的非肝硬化局部晚期ICC患者,肝移植已成为一种潜在可行的治疗策略。本文回顾了肝移植治疗ICC的研究进展与面临的挑战。

CLSI EP09c方案评价ICU患者动脉导管采血进行生化项目检测的可行性

目的参照CLSI EP09c文件,探讨ICU患者动脉导管采集的血标本与静脉血之间电解质、代谢产物、蛋白质和酶等18项常见生化项目检测结果是否存在差异。方法采用自身配对设计,本院75例ICU患者动脉导管采血进行常见生化项目检测,同时采集相应的静脉血检测作为参照值。Passing-Bablok回归分析各参数在相应医学决定水平处的偏倚,使用卫生行业标准的1/2允许总误差(allowable total error,TEa)作为可接受标准。对于偏倚具有临床意义的项目,采用Bland-Altman分析计算2种标本类型的平均偏倚。结果除K、TP、ALB外,动脉导管采集的标本血清中Na、Cl、Ca、Urea、Crea、Uric、Glu、TBIL、CHOL、TG、HDL-c、AST、ALT、GGT、ALP等15项生化项目检测结果与相应静脉血血清的检测结果在各自医学决定水平处的偏倚均小于1/2TEa,偏倚无临床意义。与静脉血相比,动脉血K在医学决定水平(3,5.8,7.5)处的相对偏倚分别为-4.08%、-2.09%、-1.61%,平均偏倚为-0.11 mmol/L(95%CI:-0.16~-0.06,95%LoA:-0.52~0.30);TP在医学决定水平(45.0,60.0,80.0)处的相对偏倚分别为-3.4%、-2.9%、-2.6%,平均偏倚为-1.7 g/L(95%CI:-2.1~-1.3,95%LoA:-5.1~1.8);ALB在医学决定水平(20.0,35.0,52.0)处的相对偏倚分别为-3.3%、-2.1%、-1.5%,平均偏倚为-0.8 g/L(95%CI:-1.0~-0.5,95%LoA:-2.8~1.3)。结论ICU患者在使用动脉导管采血进行生化项目检测时,K、TP、ALB检测结果与静脉血检测结果之间的差异具有临床意义,不可互换使用,必要时应建立相应的参考区间。

AJUBA通过磷酸果糖激酶PFKM影响糖酵解调控结直肠癌细胞生长

目的探讨AJUBA对结直肠癌(CRC)细胞的生长代谢功能影响以及引起改变的原因。方法通过使用免疫组织化学技术,比较CRC组织和癌旁组织的AJUBA表达量。随后,使用短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)在人CRC细胞系SW480中敲低AJUBA,并将其分成sh-AJUBA组和sh-NC组(阴性对照组)。使用EdU和细胞计数试剂盒(CCK-8)法,观察敲低AJUBA对肿瘤细胞增殖影响,Seahorse检测其糖酵解水平。通过对RNA测序数据分析,选择糖酵解关键基因磷酸果糖激酶(PFKM),将其过表达后检测增殖能力和糖酵解能力的变化。分别采用t检验和方差分析比较两组或多组间差异。结果CRC癌组织中,AJUBA表达显著升高(60.180±5.046比9.720±2.002,t=15.160,P<0.01)。与sh-NC比较,AJUBA敲低后(0.310±0.212比1.000±0.121,t=9.746,P<0.01),细胞增殖能力出现明显抑制(9.040±1.351比58.470±3.940,t=20.560,P<0.01),糖酵解能力也显著下调(43.770±2.740比100.300±2.555,t=26.120,P<0.01)。在回补PFKM催化后产物丙酮酸后,细胞增殖能力有所恢复。将PFKM过表达后,sh-AJUBA组的增殖能力和糖酵解能力都明显上升(0.90±0.02比0.40±0.02、0.42±0.02比0.18±0.02,t=36.12、15.35,P<0.01;178.30±4.80比146.00±3.30、159.80±10.52比57.15±1.77,t=11.08、19.24,P<0.01、0.001)。结论AJUBA在CRC癌组织中高表达,并通过调控PFKM的表达影响糖酵解而改变细胞增殖能力。

“泡烫”治胃癌,并非“天方夜谭”

胃癌腹膜转移指癌细胞突破胃壁直接种植或经淋巴、血液循环播散至腹腔形成腹膜转移病灶,是晚期胃癌的表现。研究显示,约20%的进展期胃癌患者首次就诊时已有腹膜转移。当胃癌原发灶侵犯浆膜层(胃壁最外层)时,即便接受了根治手术,约60%的患者仍有腹膜转移的风险。发生腹膜转移的胃癌患者自然病程很短,生存时间一般不超过1年;若合并肝脏等其他器官转移,生存期仅有3个月。

CDl51、c-Met及整合素仪α3、α6在胰腺导管腺癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨CD蚓、c-Met和整合素仪3、拍蛋白在胰腺导管腺癌中的表达及其与预后的关系。方法用免疫组化法检测71例胰腺导管腺癌及10例正常胰腺组织中CD151、c-Met和整合素仪3、嘶蛋白的表达，分析它们与临床病理特征及患者预后的关系。结果CD151、c-Met和整合素仪3、面在71例胰腺导管腺癌组织中的表达阳性率分别为81．69％（58／71）、69．01％（49／71）、69．01％（49／71）和84．51％（60／71），而正常胰腺组织均未表达。CD151和c-Met的表达与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移显著相关（P值均〈0．05）。CD151，的表达与c-Met及整合素α3、α6的表达呈正相关（r=0．583，P=0．000；r=0．457；P=0．000；r=0．671；P=0．000）。单因素分析显示，CD151、c-Met、整合素α3和α6的表达与预后有关（P值均〈0．05）。多因素分析表明，CD151、c-Met是患者术后生存时间的独立预后因子。结论CD151、c-Met及整合素α3、α6在胰腺癌的发展、转移及预后发挥重要作用，CD151、c-Met可考虑作为临床评价胰腺癌生物学行为及评估预后的指标。

胃癌术后黄色肉芽肿性胆囊炎一例

患者男性,60岁.2011年因“胃癌”于我院行胃癌D2根治并毕Ⅱ式消化道重建手术.病理诊断为胃窦部溃疡型高分化腺癌,浸润胃壁全层至浆膜外,胃大弯侧淋巴结转移（1/6）.患者术后接受规范化疗.术后2年常规行CT随访检查无明显异常.患者出现右上腹不适症状,CT检查提示“胆囊占位性病变”,以“胆囊肿瘤”于2013年6月5日收入院.患者无畏寒、发热、黄疸、恶心呕吐症状,大小便正常.

小鼠胚胎胰腺组织分离及内分泌功能鉴定

目的探索小鼠胚胎胰腺组织分离技术，并对其形态学及内分泌功能进行鉴定。方法胚胎期（embryonic，E）11．5～16．5dC57BL／6小鼠胚胎胰腺组织体视显微镜下进行分离。利用常规HE染色、免疫组织化学及免疫荧光实验对分离的E12．5d、E14．5d及E16．5d胚胎胰腺组织进行组织学鉴定；糖刺激实验观察胚胎胰腺组织的内分泌功能。结果〉E12．5d小鼠胚胎胰腺组织可较易完整分离。≤E12．5d小鼠胚胎胰腺组织的形态和颜色均难以与周围组织分辨，需根据其与毗邻脏器的关系仔细辨别。分离的早期胚胎胰腺组织已有胰岛素表达，随着胚胎发育，胚胎胰腺组织胰岛素表达强度逐渐增加。结论小鼠胚胎发育和解剖学知识掌握，可提高胚胎胰腺组织分离技术，保证分离获得完整的胚胎胰腺组织，为胚胎胰腺组织移植研究奠定基础。

原位肝移植术治疗肝门胆管癌（附10例报告）

目的 研究原位肝移植治疗肝门胆管癌的疗效及分析相关因素.方法 回顾性研究2002-2010年收治的10例肝门胆管癌行原位肝移植患者的临床资料.结果 男：女=8∶2,平均年龄42.5±10.2岁,平均随访时间为5.3年.1年、3年、5年和8年的生存率分别为70.0%、60.4%、50.9%和50.9%;无肿瘤1年、3年、5年和8年的生存率分别为65.3%、58.7%、50.9%和50.9%;手术时间：306.7±38.1 min;平均失血量：659.4±300.6 mL.多元回归分析示淋巴结阳性（P=0.0092）、切缘阳性（P=0.0028）和神经浸润（P=0.021）是影响肝门胆管癌肝移植术后肿瘤复发的最主要因素.结论 原位肝移植是治疗肝门胆管癌是一种有效的手段,若能术中行根治性切除则可获得良好的疗效,切缘和淋巴结是否阳性是影响长期生存的最主要因素.

腹腔镜在胰腺肿瘤切除中的应用现状与展望

由于胰腺解剖上的复杂、剖腹手术术后并发症多以及腹腔镜技术本身的难度,导致腹腔镜在胰腺手术中的应用发展缓慢.随着手术技术日益娴熟,手术器械的不断完善,有关腹腔镜下胰腺肿瘤切除的报道逐年增多.

间充质干细胞治疗糖尿病临床潜在应用价值的展望

糖尿病是危害人类健康的“杀手”之一，我国糖尿病患者数量已跃居世界第二位，且逐渐趋于年轻化。目前认为，胰岛移植是治疗糖尿病的最佳手段，但胰岛移植面临诸多问题，如：供体短缺、移植物数量不足、移植后发生免疫排斥等。

病毒感染调控间充质干细胞生物学行为的研究

目的探讨病毒代谢产物是否影响间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSCs）的生物学行为，为MSCs移植安全性提供证据。方法分离纯化C57BL／6小鼠骨髓MSCs，检测其Toll样受体3（Toll like receptor3，TLR3）表达水平，采用poly（I：C）作为病毒代谢产物刺激MSCs，通过流式细胞术、PCR等技术检测MSCs自我更新、多向分化、定向迁移及免疫抑制功能的改变。结果①MSCs表达低水平TLR3，poly（I2C）刺激后其mRNA水平表达上调；（2）poly（I：C）分别刺激MSCs24、48及72h，其增殖能力与未刺激组MSCs相比差异无统计学意义（P〉0．05），但poly（I：C）却显著促进MSCs分化为成脂及成骨细胞（P〈0．01）；（3）poly（I：C）刺激MSCs后，其定向迁移能力明显减弱，6、12及24h其迁移率分别为未刺激组MSCs的（82．83±1．69）％、（87．80±3．58）％、（92．67±2．52）％，差异有统计学意义（P〈0．01）；④MSCs具有强大的免疫抑制功能，且具有MSCs数量依赖性，poly（I：C）刺激MSCs后其抑制脾脏淋巴细胞分裂增殖的能力并未受损，与对照组MSCs相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在保证MSCs良好活性及免疫抑制功能的前提下，病毒代谢产物通过抑制MSCs迁移，使其在移植原位发挥保护移植物的功效，为MSCs作为种子细胞移植治疗糖尿病等免疫紊乱性疾病的安全性提供了证据。

连接蛋白43通过调控细胞周期抑制结直肠癌的增殖机制研究

目的探究连接蛋白(CX43)在结直肠癌中的表达和临床关系及其作用与机制。方法在线分析网站检索GJA1在结直肠癌中的表达及其与结直肠癌的临床特征关系,下载TCGA数据库中的结直肠癌转录组数据,通过生物信息学方法分析GJA1在配对结直肠癌中的表达,收集临床结直肠癌样本,通过qPCR、Western blotting及免疫组织化学技术验证CX43在结直肠癌中的表达情况。在过表达和敲低CX43的HCT116和LOVO细胞中,利用克隆形成实验及CCK8实验检验其增殖能力,通过流式细胞仪检测其对细胞周期的影响,进一步裸鼠成瘤实验在体内验证其作用,最后通过qPCR和Western blotting技术验证其作用机制。结果TCGA数据库和组织样本中发现CX43在结直肠癌中低表达,且与更差的预后相关。过表达GJA1的HCT116细胞转录组数据分析显示,其可以通过抑制细胞周期来抑制结直肠癌的增殖,过表达和敲低CX43能够通过调控细胞周期蛋白D1(CCND1)的水平来抑制或促进结直肠癌的增殖。结论CX43在结直肠癌中低表达,并能够通过抑制细胞周期来抑制结直肠癌的增殖。