“因地制宜”改建“蜗居”实验动物设施的实践探索

推进研究型医院建设、创建“基础研究-临床研究-成果转化及产业化-临床应用”产学研医的创新体系,是国家既定的医疗战略[1-2],也是我院坚定不移的发展蓝图。建设研究型医院,其中高质量的实验动物中心是必不可少的基础性科研平台。然而,由于我院地处市中心,建筑面积有限、空间资源高度紧张,仅在院区内西南角有一个面积还不到120 m^(2),配备有192个实验大小鼠IVC饲养笼位的老旧实验动物设施,严重落后于医院日益增长的科研需求,也与全新的国家有关实验动物设施的管理标准相距甚远。因此,我院于2021年底开始对旧实验动物设施进行一系列“因地制宜”的升级、改造和重建。这期间的实践探索过程异常艰辛、曲折,但坚持“因地制宜”的灵活策略,改建“蜗居”实验动物设施是可行的,也是行之有效的。

癸酸能够活化CD8^(+)T细胞并提高其抗肿瘤免疫反应能力

目的:探究中链脂肪酸癸酸对CD8^(+)T细胞活化的影响,及其对CD8^(+)T细胞介导的抗肿瘤免疫反应的作用和机制。方法:建立C57BL/6小鼠黑色素瘤B16F10皮下荷瘤模型,随机分为癸酸组(10 mg/kg癸酸灌胃)和对照组(等量溶剂灌胃),观察癸酸对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响,采用流式细胞术检测肿瘤微环境中浸润CD8^(+)T细胞的活化水平。建立B16F10-OVA和OT-I T细胞共培养体系,采用流式细胞术检测癸酸对CD8^(+)T细胞的肿瘤细胞杀伤能力的影响。采用α-CD8抗体清除B16F10荷瘤小鼠体内CD8^(+)T细胞,观察对小鼠肿瘤体积的影响。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,采用WB、ELISA及qPCR、流式细胞术检测T细胞受体(TCR)活化、效应细胞因子产生以及增殖和代谢水平。在B16F10荷瘤小鼠模型中,观察α-PD-1抗体联合癸酸给药对小鼠肿瘤生长以及生存率的影响。结果:在小鼠黑色素瘤荷瘤模型中,与对照组相比,癸酸组小鼠移植瘤体积显著降低且生存率显著提高(均P<0.05),肿瘤浸润CD8^(+)T细胞IFN-γ和TNF-α的表达水平显著升高(P<0.01)。经癸酸处理的OT-I T细胞对B16F10-OVA细胞的杀伤水平显著升高(P<0.01)。在荷瘤小鼠模型中用α-CD8抗体清除CD8^(+)T细胞后,癸酸对移植瘤的抑制作用显著降低(P<0.0001)。小鼠原代CD8^(+)T细胞经癸酸处理后,TCR活化水平显著升高、细胞因子IL-2和IFN-γ的产生增多、线粒体代谢水平显著上调(均P<0.05)。在黑色素瘤荷瘤小鼠模型中,癸酸与α-PD-1抗体联用,能够显著抑制小鼠移植瘤生长并提高其生存率(均P<0.05)。结论:癸酸能够促进CD8^(+)T细胞活化、增强其抗肿瘤免疫反应能力。

坤泰胶囊辅助治疗非肥胖型多囊卵巢综合征肾虚肝郁证临床观察

目的探讨坤泰胶囊辅助治疗非肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)肾虚肝郁证的临床效果。方法选择肾虚肝郁证非肥胖型PCOS患者108例,按随机数字表法随机分为观察组和对照组,每组54例。对照组予屈螺酮炔雌醇片(Ⅱ)治疗,采用“24+4”给药模式,观察组在此基础上予坤泰胶囊治疗。28天为1个疗程,连续治疗3个疗程后予促排卵治疗并随访1年。治疗3个疗程结束,评价临床疗效。治疗前及治疗3个疗程结束于月经来潮第2~5天,采集所有研究对象清晨空腹肘静脉血,离心留取血清,检测性激素[包括雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)]和卵巢储备功能[抗米勒管激素(AMH)]以及糖代谢指标[包括空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FIN)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)],计算LH/FSH;治疗3个疗程结束,于月经来潮第5天口服来曲唑胶囊促排卵治疗3~6个周期并随访1年,经阴道超声监测排卵情况,计算1年内排卵率,追踪其妊娠例数并计算妊娠率。治疗期间,统计两组头痛、点滴状出血、胃肠道症状、乳房胀痛、情绪低落等常见药物不良反应情况。结果治疗3个疗程结束,观察组与对照组总有效率分别为96.29%(52/54)、85.18%(46/54),观察组总有效率明显高于对照组(χ^(2)=3.967,P<0.05)。两组治疗后血清T、LH、AMH水平及LH/FSH和HOMA-IR均明显低于其治疗前,并且观察组治疗后上述指标变化较明显(P均<0.05);两组治疗前后血清E2、FSH、FPG、FIN水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组1年内排卵率为87.0%(47/54)、妊娠率为61.1%(33/54),对照组1年内排卵率为64.8%(35/54)、妊娠率为22.2%(12/54)。观察组1年内排卵率和妊娠率均高于对照组(χ^(2)分别为9.889、18.441,P均<0.05)。观察组与对照组治疗期间不良反应发生率分别为19.2%(10/54)、25.9%(14/54),两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论坤泰胶囊辅助屈螺酮炔雌醇片(Ⅱ)治疗非肥胖型PCOS肾虚肝郁证,不仅能有效改善临床症状、性激素水平、卵巢储备功能和胰岛素抵抗,还能提高排卵率和妊娠率,并且不增加不良反应,有效性和安全性均较高。