转基因棉花MON88913转化体特异性定性、定量PCR检测方法(英文)

本文以我国批准商业化的转基因耐草甘膦棉花MON88913为研究对象,建立并验证了其转化体特异性定性、定量PCR检测方法。建立的定性PCR方法的检测极限是20个拷贝棉花单倍体基因组DNA,定量PCR方法的检测和定量极限分别是10和20个拷贝棉花单倍体基因组DNA。同时,我们组织了实验室5位研究人员对建立的定量PCR检测方法进行了协同验证。对5个盲样的定量分析结果显示与真实值的偏差介于1.59%和10.12%之间,完全满足国际标准25%偏差范围的要求,完全可用于转基因棉花MON88913的实际样品检测。

量子点荧光免疫法快速测定氧氟沙星

研究建立了基于量子点(quantum dots,QDs)的间接荧光免疫吸附测定技术(competitive fluorescence linked immunosorbentassay,cFLISA),并应用于牛奶中的氧氟沙星(ofloxacin,0FL)抗生素残留检测中。首先将量子点同抗氧氟沙星抗体通过生物素-亲和素系统进行连接,优化连接条件进行并测定连接效率。其次对cFLISA测定条件进行了优化,并确定了合适的检测时间≤60min。所建立方法的最低检测限(IC_(90)值)和IC_(50)值分别为0.25 ng·mL^(-1)和1.16 ng·mL^(-1)。cFLISA针对实际牛奶样品中氧氟沙星抗生素残留回收率测定结果为88.2%～105.3%,CV值为7.3%～10.9%,同传统酶联免疫吸附测定(ELLSA)方法相比十分接近。结果表明,本研究所建立的cFLISA方法可以替代传统的ELISA方法应用于牛奶中氧氟沙星抗生素残留的实际测定中。更重要的是,新方法对于针对不同药物残留的多重测定技术的建立具有一定的参考价值。