人结肠癌LS174T/5-Fu多药耐药细胞系的建立

目的建立人结肠癌多药耐药细胞系,并研究其生物学特性。方法以5-氟尿嘧啶(5-Fu)为诱导药物,LS174T细胞株为研究对象,利用浓度递增诱导法,建立LS174T/5-Fu多药耐药细胞系。MTT法测定药物敏感性,光镜、细胞计数法、流式细胞仪及RT-PCR等方法观察其生物学特征及多药耐药相关基因(MRP)mRNA表达。结果历时6个月成功建立人结肠癌多药耐药细胞系LS174T/5-Fu,对5-Fu耐药指数为40.24,且与羟基喜树碱、顺铂、依托泊苷和脱氧氟尿苷等多种化疗药物有不同程度的交叉耐药性;细胞形态发生改变;倍增时间较亲代细胞延长;细胞周期发现其G1和S期细胞增加,G2期细胞减少;MRP mRNA表达增高。结论LS174T/5-Fu细胞是一种可靠的人结肠癌多药耐药细胞系,该细胞系的建立为深入研究5-Fu诱导人结肠癌多药耐药的发生机制奠定了基础。

Myostatin基因在荷瘤裸鼠腓肠肌组织中的表达

目的研究荷瘤裸鼠腓肠肌组织肌肉生长抑制素(myostatin)基因表达情况,观察美洛昔康对基因表达的影响及其对恶病质状况的改善作用。方法24只BALB/c裸鼠随机分三组(n=8),对照组(A组)、荷瘤+生理盐水治疗组(B组)、荷瘤+美洛昔康5 mg/kg治疗组(C组)。结肠癌Lovo细胞株皮下成瘤诱导肿瘤恶病质,RT-PCR及免疫组化法检测腓肠肌组织中myo-statin基因表达;对血清TNF-α水平与myostatin基因表达进行相关性分析。结果B组体质量为A组的60%,平均摄食量明显下降;血清TNF-α水平显著升高(均P<0.01)。C组体质量及腓肠肌质量显著高于B组;血清TNF-α水平显著降低(均P<0.01)。B组myostatin基因表达高于A组和C组(P<0.01),其表达量与血清TNF-α水平呈正相关(r=0.5438,P=0.006)。结论荷瘤裸鼠腓肠肌组织myostatin基因表达明显增高;美洛昔康能降低荷瘤裸鼠血清TNF-α水平,减少腓肠肌组织中myosta-tin基因表达水平,改善其恶病质状况。