利用高胰岛素正葡萄糖钳夹实验评估实验大鼠胰岛素抵抗异质性

目的通过高胰岛素正葡萄糖钳夹实验评估不同肥胖易感性大鼠的胰岛素抵抗状态。方法清洁级Sprague-Dawley大鼠30只,随机分为普食组(Chow组,10只)和高脂组(HF组,20只)。根据HF组喂养8周时的平均体重,将其进一步分为肥胖抵抗亚组(HF-OR亚组)和肥胖易感亚组(HF-OP亚组)。喂养8、16周时检测大鼠的血糖、血脂、胰岛素水平,并行口服糖耐量试验(OGTT)和胰岛素耐量实验(ITT);16周行高胰岛素正葡萄糖钳夹实验,测定肝脏脂质含量。结果整个实验周期中各组大鼠的空腹血糖、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05),但第16周时HF-OP亚组的空腹血清胰岛素(FIns)显著高于Chow组(P<0.05),HF-OR亚组大鼠的肝脏TG和TC水平均显著高于Chow组(P值分别<0.05、0.01),HF-OP亚组大鼠的肝脏TC水平显著高于Chow组(P<0.01)。OGTT结果显示,与Chow组相比,HF-OP和HF-OR亚组第8、16周时的葡萄糖曲线下面积均显著增大(P值分别<0.05、0.01)。ITT结果表明,与Chow组相比,HF-OP亚组第8、16周时ITT血糖曲线下面积均有增大趋势,HF-OR亚组仅在第16周时有增大的趋势,但差异均无统计学意义(P值均>0.05)。高胰岛素正葡萄糖钳夹实验结果表明,与Chow组相比,HF-OP亚组葡萄糖输注率降低49.2%(P<0.05),HF-OR亚组仅降低25.9%(P>0.05)。结论高脂饮食致大鼠胰岛素敏感性的改变存在个体差异和时序性,肥胖抵抗大鼠可部分抵抗高脂饮食对胰岛素敏感性的损伤。

早期单纯性脂肪肝基因组学改变

目的检测轻微脂肪肝患者全基因组表达,探索早期单纯性脂肪肝相关基因的改变。方法肝外科收集肝脏良性疾病的手术标本,各选取4例脂肪变性的肝细胞占肝组织切片<5%的样本(对照组)和脂肪变性的肝细胞占肝组织切片15%～25%的样本(脂肪肝组)。对两组进行基因芯片检测,对差异基因进行生物学分析及应用实时荧光定量聚合酶链反应验证。结果共得出128个差异基因。各样本差异基因表达结果均可区分对照组与脂肪肝组;脂肪肝组上调基因占63%,下调基因占37%;对照组上调基因占37%,下调基因占63%。102个基因参与分子功能;103个基因参与细胞成分;97个基因参与生物学过程,其中53个基因参与代谢过程。合成通路中,脂肪肝组甘油磷酸代谢通路上调,其关键酶1酰基甘油3磷酸O酰基转移酶2(AGPAT2)、甘油激酶基因表达为对照组的1.6(P=0.006)及2.1倍(P=0.037);脂肪酸从头合成通路下调,其关键酶乙酰COA酶羧化酶(ACACA)、脂肪酸合成酶(FASN)及脂肪酸延长酶(ELOVL6)的基因表达为对照组的60%(P=0.003)、40%(P=0.011)和40%(P=0.032);脂肪肝组脂肪酸摄取通路中膜蛋白CD36表达上调,为对照组的1.4倍(P=0.038);两组间参与脂肪酸β氧化的通路关键酶肉毒碱棕榈酰基转移酶及极低密度脂蛋白分泌的关键酶微粒体三酰甘油转移酶表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05);两组间调控三酰甘油合成的转录因子,固醇调节元件结合蛋白1、核因子、过氧化物酶体增生物激活受体α/λ的差异也无统计学意义(P值均>0.05),但脂肪肝组新发现的调控因子——成纤维细胞生长因子21(FGF21)显著上调,为对照组的2.0倍(P=0.04)。结论单纯性脂肪肝早期,脂肪摄取及三酰甘油合成基因上调,但脂肪酸从头合成基因下调,表明脂肪摄取增多及三酰甘油合成增加可能是促进早期单纯性脂肪肝进展的重要因素。