一种制作大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片的方法

改良一种制作大鼠完整膝关节和椎间盘的石蜡切片的方法,为观察骨关节透明软骨和椎间盘纤维软骨的结构提供实验基础。取正常大鼠完整膝关节和胸椎(T3-T4),10%中性福尔马林溶液固定24h,流水冲洗后分别采用3%硝酸脱钙液、混合脱钙液及EDTA脱钙液3种不同的脱钙液配合不同脱钙条件进行脱钙,制作石蜡切片,苏木精-伊红和番红O/固绿染色方法染色,显微镜下观察并评价其效果。结果表明,采用混合脱钙液4℃搅拌脱钙条件下制作的切片颜色鲜艳,细胞和细胞核清晰,组织破坏程度小,且耗时短,全部过程仅需一周即可完成。采用混合脱钙液方法制作的大鼠膝关节和椎间盘石蜡组织切片,骨和软骨组织结构完整,细胞形态清晰,能够满足组织学评价骨关节和椎间盘的要求。

重组小鼠白介素-33对小鼠实体瘤的抑制作用

为探究重组小鼠白介素-33(mIL-33)对不同类型肿瘤的作用,采用外源性注射mIL-33的方法对荷不同实体瘤的小鼠模型进行药效学研究。本研究发现mIL-33能够显著抑制肝癌、肺癌、胃癌、前列腺癌和结肠癌的生长,但对不同肿瘤抑制作用并不完全一致。较低剂量的mIL-33(10μg/kg)能显著抑制肝癌、肺癌和胃癌皮下荷瘤小鼠的肿瘤生长;而在前列腺癌和结肠癌皮下荷瘤小鼠模型中,需要较高剂量的mIL-33(90μg/kg)才能发挥相应的抗肿瘤作用。此外,mIL-33对结肠癌皮下荷瘤的生长抑制作用还与给药时长及肿瘤进展时期相关。研究结果表明,mIL-33能够显著抑制小鼠多种肿瘤的生长,提示IL-33可能是治疗肿瘤的有效靶点。

缺血时间对大鼠心肌缺血再灌注损伤及基质金属蛋白酶表达的影响

目的观察不同缺血时间对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其可能机制。方法雄性SD大鼠24只,采用完全随机法分为心肌缺血30 min后再灌注组(A组,8只),心肌缺血10 min后再灌注组(B组,8只),假手术组(C组,8只)。采用组织病理学检查和超声心动图检测评价3组大鼠心肌损伤、心脏功能及心室重构情况,并采用RT-PCR和Western blot法检测3组大鼠心肌组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)的表达。结果与C组比较,A组、B组大鼠心肌损伤后7、14 d LVEF、左心室短轴缩短率明显降低,收缩末室间隔厚度明显减小(P<0.05);A组、B组大鼠心肌组织中MMP-2和MMP-9表达明显增加,TIMP-1表达明显减少,且A组较B组变化更明显(P<0.05)。结论延长缺血时间会促使再灌注心肌MMP-2、MMP-9表达增加,TIMP-1表达减少,继而导致心肌缺血再灌注损伤的加重。

重组人中期因子midkine对大鼠膝关节软骨部分损伤的修复作用

目的:通过外源注射不同剂量的重组人中期因子midkine(rhMK),研究其对大鼠膝关节软骨部分损伤的修复作用。方法:雄性SD大鼠双侧膝关节建立软骨部分损伤的动物模型,术后24小时分别向关节腔内注射生理盐水或rhMK(20μg/kg、60μg/kg、180μg/kg)。于术后8周将大鼠全部处死,取材进行组织学观察,从而确定最佳注射剂量;在药代动力学研究中,按最佳注射剂量向正常大鼠膝关节腔内注射rhMK,分别于注射后1小时、1天、3天、6天、9天、12天和15天处死大鼠,检测膝关节软骨组织中rhMK的含量。结果:不同剂量的重组蛋白对膝关节软骨部分损伤均有不同程度的修复作用,其中180μg/kg的剂量效果最佳;以180μg/kg的剂量向正常大鼠膝关节腔内注射rhMK后,经过Kinetica5.0药代动力学软件拟合后,计算得rhMK在软骨组织中的消除相半衰期为8.69天。结论:rhMK对大鼠膝关节软骨部分损伤有明显的修复作用,最佳注射剂量为180μg/kg,最佳注射时间间隔为8天。

大鼠骨关节炎三种动物模型的建立及比较

为探讨三种骨关节炎动物模型的建立方法、效果及其适用条件,采用Hulth手术、碘乙酸关节腔注射、前交叉韧带切除处理,对SD大鼠造骨关节炎模型,并在适当时间,取两侧膝关节进行切片,比较各组骨关节大体形态及病理变化。实验结果表明,Hulth模型组及碘乙酸模型组6周即可造模成功,损伤程度较严重,类似骨关节炎中晚期;前交叉韧带切除模型组造模需8周以上,病情类似骨关节炎早期或中期,更适合用作发病机制、药物治疗方面的研究。