流式细胞术同时检测BrdU与细胞表面抗原方法的改进

目的改善用流式细胞仪检测BrdU和细胞膜表面抗原同时标记的方法。方法小鼠腹腔注射BrdU100mg/kg,3h后取胸腺制成胸腺单细胞悬液。细胞经CD4、CD8表面抗体标记后,2%多聚甲醛溶液4℃固定过夜,0.1%Triton x-100/0.1%柠檬酸钠/PBS(pH7.2)冰上孵育2min,50U DNaseI37℃孵育30min,BrdU抗体标记,上机检测。结果此方法在细胞表面抗原与BrdU同时检测时,既能够有效的区分BrdU+、BrdU-细胞,同时BrdU抗原标记的处理过程不影响检测细胞表面抗原的检测。结论该方法可用于流式检测BrdU与表面抗原的同时标记,适用于多细胞亚群增殖的检测。

胸腺的增龄化萎缩与免疫重建

随着年龄的增长,胸腺萎缩导致T细胞生成的减少和外周初始T细胞(na(i|¨)ve T cell)输出的减少,增加了临床上许多疾病的发病率与致死率,因此了解胸腺萎缩的机制及其内环境的变化对相关临床疾病的预防和治疗至关重要。目前的研究表明,人们可通过治疗而停止甚至逆转胸腺的萎缩过程。本文将就细胞因子,如白细胞介素7、角质细胞生长因子和性激素,对恢复胸腺功能与重建外周免疫系统的研究进展做一综述。

人CXCL4蛋白原核表达与纯化

CXCL4又名血小板因子4(PF4),属于CXC趋化因子亚家族,能够广谱的作用于多种细胞,在炎症,凝血等众多生理及病理反应中发挥重要作用。将CXCL4全长基因构建到原核表达载体p ET43.1a(+),利用大肠杆菌系统表达,继而纯化获得高纯度的目的蛋白。实验表明重组人CXCL4蛋白可以有效抑制人肾癌细胞增殖,具有生物学活性。重组人CXCL4原核表达与纯化方法的建立将有助于其生物学结构与功能的研究,并且对趋化因子家族其它蛋白质的表达与纯化具有参考价值。