CO_2激光心肌血运重建术对心脏神经损伤的实验研究

目的 研究CO2 激光心肌血运重建术对心脏神经的损伤。方法 在动物心脏上模拟CO2激光心肌血运重建治疗 ,观察特异性交感神经和迷走神经刺激剂作用下血流动力学参数的变化。结果 血流动力学情况显示激光治疗后神经反应完好无损 ,而迷走和交感神经切断后神经反应消失。结论 激光心肌血运重建术不会完全破坏治疗区域的神经 ,不会造成去神经作用而导致心绞痛的显著减轻或者消失。

条件复制型腺病毒联合HSVtk/GCV自杀基因系统对视网膜母细胞瘤细胞的杀伤性研究

目的 研究条件复制型腺病毒（CRAd）联合单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSVtk）/更昔洛韦（GCV）自杀基因系统对人视网膜母细胞瘤（RB）细胞系Y79细胞的杀伤作用.方法 实验研究.将携带HSVtk的由人端粒酶逆转录酶（hTERT）启动子调控腺病毒复制必需基因E1A的CRAd,即Ad-hTERT-E1A-CMV-HSVtk感染Y79细胞和原代培养的人视网膜色素上皮（hRPE）细胞.通过测量Y79和hRPE细胞感染病毒后0 h、24 h、48 h和72 h时的病毒滴度,观察CRAd在Y79细胞中的选择性复制情况.CRAd联合HSVtk/GCV自杀基因系统对Y79细胞的杀伤实验分为5组：分别为细胞未经GCV和腺病毒处理的阴性对照组,感染野生型腺病毒dl309的阳性对照组,单独应用GCV组,单独应用CRAd组及CRAd联合GCV处理组.以1、10、50和100感染复数（MOI）的CRAd或dl309感染Y79细胞.病毒感染48 h后,培养液换成含10 μg/ml的GCV或不含GCV的新鲜培养液.细胞继续培养3 d后分别以生物发光成像（BLI）和CCK-8方法检测各组Y79细胞的生物发光强度和细胞存活率.采用单因素方差分析对各组细胞的生物发光强度和存活率进行比较.结果 在Y79细胞感染CRAd后的72 h内,病毒量呈指数级增加,较感染前增加了 100多倍.CRAd在hRPE细胞中无明显复制.BLI和CCK-8检测均发现,在低剂量（MOI≤10）时,CRAd及其联合HSVtk/GCV自杀基因系统对Y79细胞无明显的杀伤效应.在高剂量（MOI≥50）时,CRAd对Y79细胞有一定的杀伤作用,其联合HSVtk/GCV后,杀伤作用更明显.在50和100 MOI时,CRAd可分别导致大约20%和30%的细胞死亡,其联合GCV后,可分别导致50%和80%的细胞死亡.结论 CRAd可在Y79细胞中选择性大量复制,其联合HSVtk/GCV自杀基因系统对Y79细胞有明显的杀伤作用.