乙型肝炎病毒反转录酶编码区核苷酸变异与肝癌的相关性研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBy）一多聚酶（polymerase，P）基因反转录酶（reversetranscriptase，RT）区突变与肝癌发生的关系。方法：收集202例肝癌患者及202例年龄、性别匹配的慢性HBV携带者（对照组）的血清，采用病例一对照的方法进行研究；PCR法扩增HBV-P基因的RT区，对扩增产物直接测序并进行序列分析，探讨该区域基因突变与肝癌发生的关系。结果：HBIT-P基因RT区共有3个位点发生突变T895A、A904T和C955T，它们在肝癌组中的发生率均显著高于对照组，分别为47．5％坩37．1％（P=0．034）、5．4％VS1．0％（P=0．011）和5．4％vs1．5％（P=O．030）。Logistic多因素分析结果显示，T895A是肝癌的独立危险因素[比值比（oddsratio，0R）=2．230，95％可信区间（confidenceinterval，CI）：1．230～4．044，P=0．008]。A904T和C955T虽有增加肝癌风险的趋势（OR=6．523，95％CI：0．838～50．733和OR=2．904，95％C7：0．599～14．093），但差异无统计学意义。然而，A904T和C955T中有一项为阳性的发生率在肝癌组和对照组中分别是9．4％和2．5％（P=0．003），经多因素调整后统计显示，与肝癌具有相关性（OR=4．145，95％CI：1．170～14．681，P=0．028）。结论：邯V-P基因RT区存在着与肝癌发生相关的突变。

Nanog多潜能转录因子在肺腺癌干细胞中的转录功能分析

综合shRNA介导的基因沉默和全基因组表达芯片杂交技术,筛查了肺腺癌肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSC)中靶向灭活Nanog多潜能基因后的差异表达基因。发现Nanog沉默引起了1 605个基因差异表达,其中95个基因属于受Nanog转录调控的靶基因。对差异表达基因进行KEGG分析后发现,Nanog的一个重要功能是转录抑制蛋白酶体编码基因表达。此外,研究还发现在此类细胞的特征性基因表达谱中,25个基因的表达受Nanog调控,包括15个基因在Nanog沉默后表达上调和10个基因表达下调。上述研究结果揭示,Nanog多潜能转录因子在肺腺癌的CSC中具有转录调控功能。

靶向灭活肺腺癌干细胞OCT4多潜能转录因子后的差异表达基因分析

应用全基因组cDNA表达芯片杂交技术,筛查了OCT4多潜能转录因子阳性(OCT4+)的肺腺癌干细胞及其OCT4表达沉默(OCT4-KD)细胞中的差异表达基因。发现与OCT4+细胞比较,OCT4-KD细胞有2 138个基因显示差异表达,其中1 554个基因表达上调,584个基因表达下调。这些差异表达基因涉及细胞周期、细胞增殖、细胞凋亡以及细胞迁移等功能,参与肿瘤通路、EGFR信号通路和低氧/p53信号通路等多个信号转导通路。选择差异表达最显著的基因进行分析,显示其中20个基因特异性表达在OCT4+细胞,而47个基因仅在OCT4-KD细胞中表达,该组基因可以作为肺腺癌中OCT4+细胞可资鉴别的特征性基因。此外,研究还发现在肺腺癌干细胞中,OCT4表达受HIF1α调控,应用RNA干扰技术选择性灭活HIF1α基因引起OCT4表达转阴和细胞表型分化,而采用棘霉素干预HIF1α的转录活性也明显下调了OCT4表达。实验结果揭示,肺腺癌干细胞中存在HIF1-OCT4调控轴,此发现为发展OCT4靶向治疗新技术提供了研究思路。