遗传性血管性血友病分子发病机制研究进展

血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)是一种在一期和二期止血中都起着重要作用的糖蛋白,其缺乏将导致患者出现血管性血友病(von Willebrand disease,vWD)。遗传性vWD可根据表型分为1型、2型和3型。其中2型又可进一步分为2A、2B、2M和2N 4种亚型。3种类型及各亚型间具有不同的分子发病机制,阐明这些机制对研究vWF分子结构和功能以及vWD诊断和治疗具有重要意义。

PNMA5基因在肝癌组织中的表达及功能研究

目的:研究功能未知基因PNMA5在肝癌组织中的表达及其与肝癌细胞生长的关系;方法:利用肝癌基因表达谱数据研究发现PNMA5基因在肝癌组织中高表达。采用RT-PCR及实时荧光定量-PCR(real-time fluorescemt quantitative PCR,RFQ-PCR)方法检测PNMA5在人类正常组织以及肝癌组织和癌旁组织中的表达水平;利用RNA干扰技术沉默肝癌细胞株(Focus和PLC)内PNMA5基因的表达;CCK-8实验定量分析内源性PNMA5基因被沉默前后的Focus和PLC细胞生长曲线的变化。结果:在14种人正常组织中,PNMA5只在睾丸、卵巢和脑组织中高表达,PNMA5基因在42%(5/12)的肝癌组织中有明显的上调(与癌旁组织比大于2倍以上,P<0.05)。沉默肝癌细胞株Focus和PLC中内源性PNMA5基因表达后,2种肝癌细胞的生长均受到明显的抑制(P<0.01),同时,从G1期进入S期细胞明显减少(P<0.01)。结论:PNMA5在维持肝癌细胞恶性表型过程中可能起到重要的作用,可能是一个新的肿瘤-睾丸相关基因。进一步研究其功能有可能发现肝癌发病的新机制,成为肝癌治疗的新靶点。

国内外不同透析疗法生命质量和经济学评价结果的比较

目的:对国内外不同透析疗法的生命质量及经济学评价结果进行比较,为患者选择合适的治疗方案和决策者合理配置卫生资源提供参考和决策依据。方法:利用CNKI、Web of Knowledge和PubMed等数据库,检索相关文献;经严格筛选,比较了33篇运用原始数据进行实证研究的文献。结果:腹膜透析在这两方面均优于血液透析。结论:腹膜透析是一种相对较为理想的疗法,希望能为透析疗法的选择和推广提供参考。

PRM1,一个新的候选结肠癌相关CT抗原基因的识别及其在结肠癌组织中的表达分析

目的筛选新的肿瘤/睾丸抗原相关基因,为肿瘤的诊断和治疗提供理论依据。方法利用文献报道的大规模平行信号测序技术获得的人类33种正常组织的基因表达谱,经生物信息学分析筛选出睾丸富集表达基因。利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,在15种人类正常组织中对候选基因进行验证,最后利用荧光定量PCR技术对睾丸特异基因在结肠癌组织和癌旁组织中的表达差异进行分析。结果在15种人类正常组织中,PRM2,PRM1,TNP1,AKAP4,TCP11为睾丸特异性表达,在其它组织中均无表达。其中PRM1基因在50%(6/12)的结肠癌组织中有明显的上调(>2倍)。其它基因在结肠癌中表达与癌旁组织比较无统计学差异。结论PRM1可能是一个新的CT基因,结果显示PRM1基因可能会在结肠癌的分子诊断或者免疫治疗中起到重要作用。

基因和蛋白质的批量注释系统UBROAD

以DNA微阵列、二维电泳、二维高压液相色谱和质谱等技术为代表的转录组和蛋白质组高通量实验技术,能够产生海量的基因或蛋白质数据,对这些基因或蛋白质的注释是对相关数据进行后期处理的基础和必要条件.海量数据的注释人工难以完成,而目前基因和蛋白质的批量注释网站给出的注释又往往不够全面.在比较常用基因和蛋白质的批量注释网站的基础上,本工作研发了基因和蛋白质的批量注释系统UBROAD(Unified Batch Retriever ofAnnotation Data),该系统整合了NCBI、Swiss-Prot、BIND、enzyme-expasy、gene2accession和gene2Unigene 6个有关基因和蛋白质的数据源;支持Uniprot/trEMBL AC、Uniprot Entryname、Genbank Protein Accession Number、Genbank mRNA gi、Genbank mRNA Accession Number、Gene name、Gene ID和Unigene ID 8种登录号混合查询;含有各种登录号以及基因或蛋白质的基本信息、功能分类、相互作用共38项注释项供选择;提供微软电子表格形式的注释结果.可以通过访问网页http://www.bioscience.org.cn/ubroad免费使用该系统.

黏性血小板综合征与血栓形成

黏性血小板综合征（sticky platelet syndrome．SPS）㈦是一种先天性血小板功能缺陷疾病，呈常染色体显性遗传。临床上SPS患者并不少见，表现为血小板对腺苷二磷酸（adenosine diphosphate，ADP）和肾上腺素（epinephrine）诱导的血小板聚集反应性增高，见于许多原因不明的动、静脉血栓性疾病患者。体外血小板聚集试验是诊断SPS的主要方法。

应用多重RT-PCR在初发急性髓系白血病患者中筛查少见或难以识别的染色体易位

本研究探讨应用多重逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)筛查少见/难以识别的染色体易位患者的临床应用可行性。建立了3组多重RT-PCR以检测常规核型分析检出率较低的6种mll相关基因重排(mll/af10、mll/af17、mll/ell、mll/af9、mll/af6和mll/enl)和4种少见融合基因(dek/can、tls/erg、aml1/mds(evi1)和npm/mlf1)。结果表明:126例标本中共检测出11例阳性标本,涉及5种分子异常,其中10例为M5亚型(16.67%),1例为M4亚型(1.51%)。在这11例阳性标本中,2例患者核型分析见到标志染色体,1例患者仅有1个分裂相以致无法分析核型,其余8例用R-显带核型分析均未发现异常。结论:本研究设计的多重RT-PCR可便捷地、有效和准确地识别多种少见/难以发现的染色体易位。

利用显性负模型研究整合素β3胞浆段RGT序列对信号转导的调控机制

该研究探讨整合素β3胞浆段RGT序列在整合素信号转导中的作用。利用IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段全长或截短序列构建Tac-β3嵌合体,即Tac-β3和Tac-β3Δ759,使其分别在表达GPIbIX、整合素αIIbβ3的CHO细胞株(IbIX/IIbIIIa-CHO细胞株)中稳定表达(即IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3、IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株)。利用竞争酶联免疫法对Tac-β3嵌合体进行定量,观察IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3、IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株在固相化纤维蛋白原上的伸展情况(代表外向内的信号转导);Co-IP研究Tac-β3嵌合体、β3与下游信号分子Src的结合情况。结果发现:竞争酶联免疫法证实了两个细胞株的Tac-β3嵌合体表达都高于野生型β3,保证了Tac-β3嵌合体对内源性β3在结合胞内分子中的显性负效应;IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力受到抑制,而IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-β3Δ759细胞株在固相化纤维蛋白原上的黏附伸展能力并未受到明显影响。Co-IP结果显示:Tac-β3能结合内源性Src,而胞浆段RGT序列缺失的Tac-β3Δ759则不与内源性Src结合。选择性地破坏Tac-β3的Src结合能力即足以去除其对外向内信号转导的显性负效应,从而表明:整合素β3尾端RGT序列与Src的相互作用在这一信号转导通路中起决定性的作用。

白血病多靶点联合治疗的基础和临床研究

作为靶向诱导肿瘤细胞分化和凋亡的代表性模式，全反式维甲酸（ATRA）和三氧化二砷（ATO）治疗急性早幼粒细胞白血病（APL）取得了巨大的成功。ATRA与ATO均作用于异常转录因子PML—RARα，通过不同的途径降解PML—RARα致病蛋白，导致APL细胞分化和凋亡。临床试验证实了两药的协同作用，两药联合治疗初发APL获得了迄今急性白血病治疗的最好疗效。体外实验证实ANLL—M2b型白血病存在c—kif突变和过度表达，提示异常c—kif可以作为靶向治疗该类型白血病的候选靶点。冬凌草甲素（Oridonin）可以特异性地降解AML1-ETO，有可能成为治疗该类白血病的候选药物。酪氨酸激酶抑制剂在慢性粒细胞白血病（CML）治疗中获得了成功，该药联合砷剂治疗CML已在体外实验中初步证实其有效性。

血友病A发病的分子机制

凝血因子Ⅷ(FⅧ)内含子22倒位和错义突变分别是重型和轻/中型血友病A发病的主要机制。CpG岛是突变热点。约5%的重症血友病患者由内含子1倒位引起。大片段缺失突变多与重复序列有关。插入/缺失突变常常发生在单碱基连续地方。无义突变和剪接位点突变多导致重度表型。错义突变的效应和其所累及的位置有关,如影响蛋白分泌,降低F与血管性血友病因子(vWF)、磷脂或因子(FⅧ)结合力、影响凝血酶活化以及增加F不稳定性等。研究发病分子机制对于了解F分子结构和功能的关系、携带者判定、产前诊断以及患者的预后和治疗都有重要的意义。

获得性血友病A2例治疗报告并文献复习

目的:探讨获得性血友病A的治疗。方法:分别使用AHG、激素、IVIG及在此基础上加用免疫抑制剂。结果:治疗2周后,FⅧ抗体下降均不明显,但联合血浆置换治疗下降明显。结论:对获得性血友病A患者,联合血浆置换、大剂量AHG和免疫抑制治疗是一个有效可行方法,能够快速短期控制病情。