Toll样受体4在人肺泡上皮细胞株中的表达及其在细胞炎症反应中的作用

目的明确人Ⅱ型肺泡上皮细胞是否表达Toll样受体4（TLR4），探讨TLR4在慢性阻塞性肺疾病（COPD）气道炎症中的作用。方法将人Ⅱ型肺泡上皮细胞系A549细胞分为正常对照组、转染腺病毒E1A质粒（E1A^＋组）和转染不含有腺病毒E1A的空白质粒组（E1A^-组），分别以不同浓度的脂多糖（LPS，0、0．1、1、10μg／ml）、白细胞介素1β（IL-1β，0、0．1ng／ml）、香烟提取物（CSE，0.10％、20％、40％）刺激。刺激后12、24h，用反转录聚合酶链反应技术检测各组细胞IL-8 mRNA和TLR4 mRNA的表达，用蛋白质印迹技术测定核因子κB（NF—κB）亚单位P65蛋白的表达。结果10μg／ml LPS、0．1ng／ml IL-1β或20％CSE刺激24h后，E1A^＋组IL-8 mRNA表达量（2．82、1．87、4．70）明显高于正常对照组（0．95、0．78、1，02，均P〈0．05）和E1A^-组（0．97、0．81、1．12，均P〈0．05）。10μg／ml的LPS刺激后12、24h，E1A^＋组细胞TLR4 mRNA表达水平分别为4．52、7．99，明显高于正常对照组（1．91、3．81，均P〈0．05）和E1A^-组（2．00、3．88，均P〈0．05）；IL-1β也可增加TLR4 mRNA表达。CSE刺激对各组细胞TLR4 mRNA表达水平均无明显影响。3种刺激因子均可引起各组细胞NF-κB亚单位P65蛋白表达水平增高。结论人Ⅱ型肺泡上皮细胞表达TLR4，LPS、IL-1β引起IL-8释放可能与TLR4介导的NF-κB激活有关。