短链脂肪酸对胰腺星状细胞氧化应激和活化的调控作用

目的探讨短链脂肪酸(SCFA)对缺氧诱导的胰腺星状细胞(PSCs)氧化应激和活化的调控作用。方法常氧及缺氧培养PSCs建立常氧组和缺氧组,SCFA工作液(10 mmol/L乙酸钠、0.5 mmol/L丙酸钠及0.5 mmol/L丁酸钠)和生理盐水分别预处理PSCs后进行缺氧培养建立缺氧SCFA组和缺氧对照组。采用CCK-8法检测各组PSCs生长活力,采用DCFH-DA荧光探针法检测PSCs活性氧(ROS)的相对水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位的变化,蛋白质免疫印迹法检测PSCs周期相关蛋白cyclin A和cyclin D、缺氧标志蛋白HIF1α、活化标志蛋白α-SMA及抗氧化蛋白NRF2和HO-1的表达。结果缺氧组PSCs在培养48 h时的相对活力显著高于常氧组(1.23±0.05比0.99±0.04),而缺氧SCFA组在培养36 h和48 h时的相对活力均显著低于缺氧对照组(0.69±0.01比0.86±0.03,0.86±0.02比1.25±0.05)。缺氧组ROS相对水平显著高于常氧组(1.74±0.11比1.00±0.10),而缺氧SCFA组ROS相对水平显著低于缺氧对照组(1.39±0.14比1.66±0.11)。缺氧组JC-1聚合体的荧光信号明显高于常氧组(1.36±0.05比1.00±0.11),而缺氧SCFA组JC-1聚合体的荧光信号明显低于缺氧对照组(1.11±0.03比1.32±0.06)。缺氧组cyclin A、cyclin D、HIF1α、α-SMA、NRF2和HO-1表达量显著高于常氧组(1.19±0.01比0.63±0.02,0.93±0.02比0.83±0.03,1.18±0.07比0.41±0.02,1.19±0.14比0.66±0.04,1.22±0.11比0.61±0.04,1.28±0.12比0.68±0.02),而缺氧SCFA组cyclin A、cyclin D、α-SMA、NRF2和HO-1的表达量显著低于缺氧对照组(0.79±0.04比1.15±0.03,0.88±0.01比0.95±0.03,0.87±0.01比1.18±0.05,0.84±0.01比1.22±0.04,0.92±0.02比1.27±0.06)。以上差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论SCFA显著改善缺氧状态下PSCs的氧化应激状态,维持线粒体膜电位的稳定,抑制缺氧诱导的PSCs活化。