Pim-3基因抑制暴发性肝细胞凋亡的机制

目的探讨Pim-3基因对暴发性肝细胞凋亡的抑制机制。方法32只大鼠随机分成4组（8只／组）。A组为正常对照组，B、C组和D组采用流体力学注射方法，分别以林格氏液、空载体质粒pEGFP-N2和重组质粒pEGFP-N2／Pim-3溶液预处理大鼠；1d后，予脂多糖（LPS）／D-半乳糖胺（D-GaIN）腹腔注射诱导暴发性肝细胞凋亡。8h后处死大鼠，采集肝组织标本。用Caspase-3活性测定法检测细胞凋亡情况；RT-PCR检测肝组织诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、p53基因表达水平；Westernblot检测肝组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平。组间数据比较采用非参数Kruskai-Wallis检验。结果LPS／D—GalN联合攻击造成了大鼠肝内Caspase-3活性显著增高，而D组Caspase-3活性较B组和C组均显著降低[（141．7±13．7）RFU比（508．1±32．0）、（493．5±33．1）RFU，P值均〈0．0.01）。LPS／D-GalN的应用也诱导了肝组织iNOSmRNA、p53mRNA、Bax蛋白表达，与B组和C组相比，D组iNOSmRNA和p53mRNA的表达水平显著降低（0．06±0．01比0．42±0．08、0．35±0．06；0．73±0．11比1．17±0．25、1．23±0．31，P值均〈0．01），而Bax蛋白表达水平差异无统计学意义（1．19±0．09比1．13±0．08、1．25±0．11，P〉0．05）；另外，D组肝内Bcl-2蛋白表达水平较A、B组和C组均显著升高（3．05±0．29比1．03±0．05、0．98±0．06、1．10±0．08，P值均〈0．01）。结论Pim-3基因通过对损伤基因和凋亡相关基因的影响抑制了暴发性肝细胞凋亡的发生。